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"慢性肾衰基本方"抗肾小球硬化的实验研究
目的:探讨"慢性肾衰基本方"对5/6肾切除慢性肾衰竭大鼠模型肾小球硬化的拮抗作用.方法:应用"慢性肾衰基本方"处理构建成功的5/6肾切除大鼠模型4周;应用全自动生化分析仪及血细胞分析仪检测实验动物血清钙(Ca2+)、磷(P3-)、尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)水平以及血红蛋白(Hb)浓度,HE染色及PASM染色结合图像分析评估系膜/肾小球面积比值,免疫组化染色结合数码医学图像分析系统定量评判肾小球α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达量.结果:"慢性肾衰基本方"治疗组血清BUN、Scr、P3-水平和系膜/肾小球面积比值显著低于模型对照组,而血清Ca2+水平和Hb浓度则显著高于对照组,肾衰竭大鼠系膜/肾小球面积比值和肾小球α-SMA的表达量呈正相关.结论:"慢性肾衰基本方"可减轻肾小球硬化,保护残余肾功能,其机制可能与抑制肾小球固有细胞转分化有关.
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"慢性肾衰基本方"含药血清对人肾小管上皮细胞转分化的影响
目的:观察经验方"慢性肾衰基本方"对转化生长因子β1(TGF-β1)所诱导的肾小管上皮细胞(TECs)转分化及细胞外基质分泌的影响,以进一步证实并初步探讨其延缓慢性肾衰竭肾小管-间质纤维化的作用机制.方法:给予家兔中药灌胃3 d后制备"慢性肾衰基本方"含药兔血清,应用不同浓度含药血清处理经TGF-β1诱导活化的HK-2细胞,然后应用免疫细胞化学方法、流式细胞技术测定HK-2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达率;应用酶联免疫吸附检测法(ELISA)测定培养上清纤维连结蛋白(FN)及Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)水平,并进而计算单个细胞FN及Col-Ⅳ分泌水平.结果:含药兔血清呈剂量依赖方式逆转TGF-β1诱导的HK-2细胞α-SMA的表达,并呈剂量依赖方式抑制单个细胞FN及Col-Ⅳ的分泌.结论:"慢性肾衰基本方"至少部分是通过抑制肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质的过度分泌而对防治肾小管-间质纤维化发挥作用.
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"慢性肾衰基本方"对肾小管-间质纤维化防治作用的实验研究
目的: 研究"慢性肾衰基本方"的拮抗肾小管-间质纤维化(TIF)作用.方法:5/6肾切除大鼠模型给药4周,检测动物血尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)水平;应用HE染色及PASM染色结合半定量计分法评估肾小管-间质损伤程度;应用免疫组化染色结合数码医学图象分析系统定量评判肾小管-间质α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、角蛋白18(CK-18)、胶原I(Col-I)和纤连蛋白(FN)的表达量.结果: CRF模型未治疗组BUN、Scr水平显著较假手术组升高,肾小管-间质严重纤维化,α-SMA表达量显著上调而CK-18表达量显著下调,Col-I和FN表达量也显著上调.经"慢性肾衰基本方"治疗后CRF大鼠BUN、Scr水平显著下降,TIF指数降低,肾小管上皮细胞表达CK-18回升, Col-I、FN及α-SMA表达也有不同程度回降.结论: "慢性肾衰基本方"可通过抑制肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞、抑制肾小管-间质ECM合成而防治TIF.
