二次回归通用旋转组合设计法优化枸杞多糖的荧光标记
摘要: 目的:利用二次通用旋转组合设计试验筛选枸杞多糖荧光标记的优标记条件。方法枸杞多糖与酪胺氨基共价偶联后与异硫氰酸荧光素反应,实现选择性荧光标记。利用二次通用旋转组合设计试验,研究缓冲液pH值、标记时间、温度、酪胺量与标记效率之间的关系,从中筛选出佳的标记条件。结果得回归方程为:Y=0.08541-0.00282X1-0.01568X2+0.00811X3+0.00501X4+0.00875 X1X2-0.00575X1X3-0.00175X1X4+0.01063X2X3+0.000125X2X4+0.00025X3X4-0.02144X12-0.00889X22-0.001984X32+0.00366X42,失拟性检验F=1.76<F0.05(5,3)=9.01;显著性检验F=8.42>F0.01(11,8)=5.74,表明二次回归模型有统计学意义。枸杞多糖荧光标记时温度在50℃,pH 值为8.5,反应时间设为4 d时结合效率高。结论在枸杞多糖荧光标记的过程中,在特定的反应温度和缓冲液pH值条件下,适当延长反应时间可提高反应效率。
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