补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜周期蛋白D3表达的影响

目的观察补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜cyclin D3表达的影响. 方法妊娠雌鼠随机分为正常组、模型组、治疗组各20只,模型组取非孕子宫和妊娠子宫,余两组取妊娠子宫.采用免疫印迹法和免疫组织化学法,分别测定雌、孕激素、cyclin D3. 结果胚泡着床障碍小鼠子宫内膜cyclin D3表达在时空上明显滞后,补肾益气和血方能促进胚泡着床障碍小鼠子宫内膜cyclin D3及时有序地表达. 结论补肾益气和血方可促进子宫内膜cyclin D3的表达,并可能与子宫内膜的蜕膜化有关,可能有助于胚泡着床.

寄生助孕冲剂对胚泡着床障碍小鼠HOXA10表达的影响

目的 观察寄生助孕冲剂对胚泡着床障碍模型小鼠HOXA10表达的影响.方法 将孕鼠随机分为正常组、模型组、西药对照组和中药(高、中、低剂量)治疗组,从妊娠第1天起分别给予生理盐水、地屈孕酮和寄生助孕冲剂(高中低剂量)灌胃治疗.妊娠第4天上午皮下注射米非司酮0.08mg/只,正常组不予任何处理.妊娠第5天处死小鼠留取子宫组织,运用实时荧光定量PCR法检测内膜中HOXA-10的含量.结果 与模型组比较,中药(高、中剂量)治疗组均有利于提高HOXA-10的表达(P<0.05).结论 寄生助孕冲剂可以提高同源框基因10的表达量,从而改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床.

保胎液对胚泡着床障碍小鼠着床位点数及分布形态影响的实验研究

目的 观察保胎液对胚泡着床障碍模型小鼠着床位点数及分布形态的影响.方法 采用米非司酮小鼠胚泡着床障碍模型.将孕鼠随机分为正常组、模型组、西药对照组和中药(高、中、低三种剂量)治疗组,从妊娠第1天起分别给予生理盐水、地屈孕酮和保胎液(高、中、低三种剂量)灌胃治疗.于妊娠第4天上午皮下注射米非司酮,每只0.08 mg.正常组不予任何处理.于妊娠第5天腹腔静脉注射1% 浓度的Trypan Blue 0.3 mL,观察10 min,取出子宫,观察蓝染点,计算胚泡着床位点数.结果 中药高、中、低治疗组,西药对照组,模型组小鼠胚泡着床位点数均低于正常组(P＜0.05);与模型组比较,中药各治疗组、西药组小鼠着床位点数明显提高(P＜0.05).结论 保胎液能够增加着床障碍小鼠的胚泡着床位点数,从而有利于胚泡的着床,提高妊娠率.

补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜P21表达的影响

目的:观察补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠着床部位子宫内膜中周期素依赖的蛋白激酶抑制物P21和增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响.方法:采用免疫印迹法观察胚泡植入[即妊娠第6天(pregnancy day 6,Pd6),Pd7和Pd8]时P21在整个子宫中的表达,采用免疫组化法进一步定位观察着床部位子宫内膜中PCNA和P21的表达.结果:与对照组相比,模型组子宫内膜PCNA和P21的出现和消失在时间和空间上均明显滞后;补肾益气和血方能促进PCNA和P21及时有序地表达或消失,从而改善胚泡着床障碍小鼠子宫内膜的蜕膜反应.结论:补肾益气和血方可通过促进子宫内膜的蜕膜反应来改善胚泡着床,其作用机制与其促进子宫内膜PCNA和P21时空有序地表达和消失密切相关.

中药助孕方对促排卵和胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响

目的 研究中药助孕方对促排卵(OS)和胚泡着床障碍(BID)小鼠子宫内膜容受性的影响及其潜在机制.方法 200只正常雌性昆明小鼠,随机分为A组(对照组)、B组(OS)、C组(OS加中药助孕方)、D组(BID)、E组(BID加中药助孕方)、F组(中药助孕方).OS组腹腔内注射孕马血清促性腺素和人绒毛膜促性腺素(HCG),BID组于妊娠第4天9:00皮下注射米非司酮.3个中药组于妊娠第1-4天8:00灌胃中药1.5 mL/100 g.妊娠第4天21:00每组取出8只子宫标本固定,运用免疫组化的方法测定标本中白血病抑制因子(LIF)和整合素β3的表达水平.妊娠第8天21:30处死各组妊娠小鼠,取出子宫,计数胚泡数.结果 B组和D组的妊娠率(6.67%,1/15、18.75%,3/16),LIF蛋白OD值(0.18 ±0.02、0.23 ±0.02),整合素β3蛋白OD值(0.20 ±0.05、0.19 ±0.02),与A组比较差异有统计学意义(P<0.01).C组和E组的妊娠率(54.55%,12/22、65.22%,15/23),LIF蛋白OD值(0.37 ±0.09、0.39 ±0.02),整合素β3蛋白OD值(0.34 ±0.04、0.38 ±0.08)分别与B组和D组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 OS和BID对小鼠子宫内膜容受性有负面影响,阻碍胚泡植入.中药助孕方可以通过上调LIF和整合素β3的表达来改善子宫内膜容受性,提高妊娠率.

补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体凋亡的影响

目的 观察补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体凋亡的影响. 方法 复制小鼠胚泡着床障碍模型,分为对照组、模型组和治疗组,每组30只.观察小鼠妊娠率和着床胚泡数,分析子宫内膜腺体的凋亡情况,检测子宫内膜腺体的增殖细胞核抗原(PCNA)、bax、bcl-2和激活型Caspase-3蛋白表达情况. 结果 模型组妊娠率和平均着床胚泡数均显著降低,治疗组两者均较模型组显著提高(P<0.05或P<0.01).模型组子宫内膜腺体增殖指数(PI)明显高于对照组(P<0.01),而凋亡指数(AI)则明显低于对照组(P<0.05);治疗组与模型组比较,腺体PI明显降低而AI明显增高(P<0.01),两者与对照组比较差异均无统计学意义.模型组子宫内膜腺体中bax和激活型Caspase-3蛋白显著低于对照组(P<0.01);治疗组两者则显著高于模型组(P<0.01);治疗组与对照组差异无统计学意义. 结论 促进子宫内膜腺体中bax蛋白的表达和Caspase-3的激活,调节植入窗期腺体细胞增殖和凋亡的平衡,可能是补肾益气和血方促进子宫内膜接受性建立和改善胚泡着床障碍的机制之一.

保胎液对胚泡着床障碍小鼠着床位点数影响研究

目的:观察保胎液对胚泡着床障碍模型小鼠着床位点数及分布形态的影响.方法:采用米非司酮小鼠胚泡着床障碍模型.将孕鼠随机分为正常组、模型组、西药对照组和中药治疗组,从妊娠第1天起分别给予生理盐水、地屈孕酮和保胎液灌胃治疗.于妊娠第4天上午皮下注射米非司酮,每只0.08mg.正常组不予任何处理.于妊娠第5天腹腔静脉注射1％浓度的Trypan Blue0.3ml,观察10min,取出子宫,观察蓝染点,计算胚泡着床位点数.结果:中药治疗组,西药组,模型组小鼠胚泡着床位点数均低于正常组(P＜0.05)；与模型组比较,中药治疗组,西药组小鼠着床位点数明显提高(P＜0.05).结论:保胎液能够增加着床障碍小鼠的胚泡着床位点数,从而有利于胚泡的着床,提高妊娠率.

保胎液对胚泡着床障碍小鼠雌孕激素的影响

目的:观察保胎液对胚泡着床障碍模型小鼠的雌、孕激素的影响.方法:采用米非司酮小鼠胚泡着床障碍模型.将孕鼠随机分为正常组、模型组、西药对照组和中药(高、中、低3种剂量)治疗组.从妊娠第1天起分别给予生理盐水、地屈孕酮和保胎液(高中低3种剂量)灌胃治疗.于妊娠第4天上午皮下注射米非司酮,每只0.08 mg.正常组不予任何处理.于妊娠第5天处死小鼠留取血清,运用罗氏电化学发光法检测血清雌激素(E2)和孕激素(P)的含量.结果:与模型组比较,保胎液各治疗组均有利于改善血清雌孕激素水平(P＜0.05),与西药对照组比较无统计学意义(P＞0.05).结论:保胎液可以调节血清雌激素(E2)和孕激素(P)的含量,从而改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床.

对两种胚泡着床障碍小鼠模型围着床期子宫内膜形态结构的比较研究

目的 比较研究米非司酮、吲哚美辛诱导的两种胚泡着床障碍小鼠模型围着床期子宫内膜形态结构.方法 将成年♀昆明小鼠交配后随机分为对照组、米非司酮组和吲哚美辛组,于妊娠d 8观察小鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数,利用光镜和电镜观察子宫内膜的形态结构.结果 与对照组相比,米非司酮组和吲哚美辛组其着床率和平均着床胚泡数均降低;米非司酮模型小鼠子宫内膜的发育明显受抑制,吲哚美辛模型小鼠子宫内膜的血管形成受阻.结论 米非司酮和吲哚美辛通过对围着床期子宫内膜形态结构不同的影响而复制小鼠胚泡着床障碍模型.

小鼠胚泡着床障碍模型的建立

目的建立小鼠胚泡着床障碍动物模型.方法①将成年雌性昆明小鼠交配后随机分为对照组和实验组,于妊娠d 4实验组于皮下注射不同浓度的米非司酮,于妊娠d 8观察小鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数,筛选佳造模剂量.②选用0.08 mg*只-1米非司酮造模,采用放免法检测对照组和模型组的血清及子宫组织雌二醇、孕酮的含量,利用光镜和电镜观察子宫内膜及卵巢的形态结构.结果①当米非司酮的剂量达0.08 mg*只-1以上时,着床率和平均着床胚泡数均降低.②与对照组相比,模型组子宫内膜的发育明显受抑制,而血清及子宫组织的雌二醇和孕酮的含量、卵巢的形态结构均无改变.结论于妊娠d 4皮下注射米非司酮0.08 mg*只-1,可复制机制明确、稳定可靠的小鼠胚泡着床障碍模型.

大鼠胚泡着床障碍动物模型的建立

目的 建立大鼠胚泡着床障碍动物模型.方法 将与雄性大鼠交配后的成年雌性SD大鼠随机分为正常组、小剂量组(5 mg/kg)、中剂量组(6 mg/kg)、大剂量组(8 mg/kg),小剂量组、中剂量组、大剂量组于妊娠第3天皮下一次性注射不同剂量的米非司酮,于妊娠第8天观察大鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数,筛选佳造模剂量.结果 与正常组相比,小剂量组和中剂量组着床率和平均着床胚泡数均显著降低(P＜0.01).中剂量组的着床率和平均着床胚泡数低于小剂量组组,差异无统计学意义(P＞0.05).当剂量达到8 mg/kg时,胚泡着床被完全抑制.结论 于妊娠第3天皮下注射5 mg/kg的米非司酮,可建立稳定可靠的大鼠胚泡着床障碍模型.

补肾安胎方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜HB-EGF及其受体EGFR表达的影响

目的 观察中药补肾安胎方对胚泡着床障碍模型小鼠胚泡着床情况及对类肝素结合样表皮生长因子(HB-EGF)及其受体(EGFR)表达的影响.方法 将妊娠雌鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组30只.分别于妊娠第5、6天(Pd5、6)用伊文思蓝尾静脉注射后取妊娠子宫.观察妊娠第5天(Pd5)各组对伊文思蓝的着色反应;运用RT-PCR方法检测HB-EGF mRNA的含量,采用免疫组织化学法测定HB-EGF及其受体EGFR的表达.结果 Pd5,模型组对伊文思蓝反应和平均反应点数显著低于正常组,中药组与模型组有显著差异.Pd5、6,模型组子宫内膜HB-EGF及其受体EGFR的表达在时间上明显滞后于正常组并且表达量减少,中药组与模型组有显著差异(P<0.05).结论 补肾安胎方改善胚泡着床障碍小鼠胚胎着床可能与提高着床位点的HBEGF及其受体EGFR的表达有关.

补肾益气和血方中药对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜表面胞饮突表达的影响

补肾固黄汤改善胚泡着床障碍小鼠子宫内膜组织形态的实验研究

目的 观察中药补肾固黄汤对胚泡着床障碍小鼠子官内膜组织学形态的影响.方法 将45只雌性昆明小鼠随机分为中药组、模型组、正常组.中药组在孕前预防性行补肾固黄汤灌胃2次,孕后每天灌服补肾固黄汤;其余两组给予等体积生理盐水.妊娠第4天中药组、模型组皮下注射米非司酮溶液造成小鼠胚泡着床障碍.妊娠第5天,收集各组小鼠子宫,应用光学显微镜观察小鼠子宫内膜组织形态学变化.结果 妊娠第5天,模型组小鼠子宫内膜腺体数量少、腺腔小而直,间质细胞体积小,间质紧密;而正常组则表现为腺体数目多,腺腔扩张、弯曲,腺腔、官腔均有较多分泌物,间质疏松、水肿;中药组与正常组相似.结论 补肾固黄汤可以改善胚泡着床障碍小鼠子宫内膜组织学形态,从而提高子官内膜容受性.

二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜的形态学影响

目的 从形态学角度探讨二补助育汤对胚胎着床障碍模型小鼠子宫内膜的影响.方法 将56只C57小鼠随机分为空白组、模型组、补佳乐组、阿司匹林组、二补助育汤低、中、高剂量组,每组8只.用吲哚美辛建立胚胎着床障碍动物模型,小鼠妊娠第5日下午脱颈椎处死,计算各组小鼠妊娠率及胚胎着床位点数;光学显微镜下观察各组小鼠子宫内膜形态结构;透射电子显微镜下观察超微结构、胞饮突表达情况,并计算胞饮突评分.结果 ①模型组平均着床位点数(1.8±2.1)明显低于空白组(8.1±4 2)(P＜0.05);中药中、高剂量组平均着床位点数(分别为62.5％,75.0％)明显高于模型组(P＜0.05);与补佳乐组和阿司匹林组间无统计学差异.②光学显微镜下形态学观察:正常组内膜间质疏松、腺体和血管丰富、腺体扩张;模型组内膜变薄或消失、腺体和血管减少;二补助育汤各剂量组、补佳乐组、阿司匹林组内膜均有改善,以二补助育汤中剂量组与正常组接近.③电子显微镜下超微结构观察:空白组子宫内膜上皮细胞及细胞器结构清晰;模型组细胞破坏严重甚至局灶性坏死,线粒体膜不完整、嵴结构消失,胞质中较多空泡样变,核糖体和内质网明显减少;二补助育汤各剂量组、补佳乐组、阿司匹林组细胞及细胞器有不同程度破坏,与模型组相比有明显改善.④胞饮突:空白组胞饮突丰富,绒毛较少;模型组绒毛丰富,但胞饮突很少;二补助育汤各剂量组胞饮突较模型组丰富,见少量绒毛;补佳乐组和阿司匹林组可见少量胞饮突,较模型组增加,绒毛表达稀疏.⑤胞饮突评分:模型组胞饮突评分(1.1±0.3)较空白组低(2.5±0 7)(P＜0.05))中药中剂量组(2.3±0.9)、阿司匹林组(2.0±0 7)评分高于模型组(P＜0.05),亦高于补佳乐组(1.3±0.5)(P＜0.05).结论 二补助育汤能够促进子宫内膜发育及胞饮突,从而提高子宫内膜容受性,有利于胚胎着床.