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利用废弃胚胎进行体外受精实验室质控的可行性探讨
目的 探讨废弃胚胎作为体外受精(IVF)实验室质控的可行性. 方法 通过囊胚序贯培养将无原核(0PN)、单原核(1PN)、3原核(3PN)和发育迟缓或停滞的2原核(2PN)的废弃胚胎进行囊胚培养,比较不同来源胚胎的囊胚形成情况. 结果 共收集396个废弃胚胎,经序贯培养形成98个囊胚(24.75％),0PN、2PN、1PN、3PN的囊胚形成率分别为50.50％(51/101)、24.59％(30/122)、17.07％(7/41)、7.58％(10/132),其中0PN、停滞的2PN的胚胎有孵出,孵出率分别为47.06 ％(24/51)和33.33％(10/30)；有囊胚形成与无囊胚形成患者的临床妊娠率分别为30.28％(43/142)、19.72％％(28/142),两者相比有统计学差异(P＜0.05)；特别是0PN+2PN患者的临床妊娠率为23.24％(33/142),显著高于无囊胚形成者的9.15％(13/142)(P＜0.01). 结论 废弃胚胎有不同程度的发育潜能,可部分发育成囊胚,特别是0PN+2PN囊胚形成率超过35％,可以作为IVF实验室质控的一种辅助方法,并可作为临床妊娠结局预测的参考指标.
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透明带结构与受精结局的关系分析
透明带(ZP)是自初级卵泡早期阶段,由卵子和颗粒细胞共同分泌形成,由4种糖蛋白(ZP1、ZP2、ZP3、ZP4)交联形成的具有双折射性的三维网状结构.ZP糖蛋白在与精子识别及结合过程中起着重要的作用[1],精子进入质膜后激活卵,触发皮质颗粒释放,改变ZP结构,引起ZP反应从而阻滞多精子进入,保证单精子受精.
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不同纺锤体观察情况的卵母细胞的ICSI结局
目的 通过在纺锤体观察仪下行卵胞浆内单精子注射(ICSI),比较不同纺锤体观察情况的卵母细胞的ICSI结局. 方法 2014年2～5月间,就诊于我中心的反复IVF失败、获卵数较少、高龄妇女、卵母细胞质量较差、胚胎发育差而导致可移植胚胎数少或者无可移植胚胎的患者30例,在纺锤体观察仪下行ICSI操作.观察卵母细胞受精情况和胚胎发育情况,并比较观察到纺锤体组和未观察到纺锤体组胚胎的正常受精率、异常受精率、总受精率、卵裂率、可移植胚胎率和优质胚胎率. 结果 30例行ICSI助孕的患者,共获卵149枚,其中MII卵118枚;72枚MII卵观察到纺锤体,纺锤体观察率为61.01％;观察到纺锤体组和未观察到纺锤体组卵母细胞的总受精率(94.44％ vs.80.43％)、正常受精率(83.33％ vs.54.35％)、异常受精率(11.11％ vs.26.09％)均有统计学差异(P＜0.05);未观察到纺锤体组胚胎的卵裂率、可移植胚率和优质胚胎率低于观察到纺锤体组,但均无统计学差异(P＞0.05). 结论 ICSI授精时观察到纺锤体的卵母细胞受精结果优于未观察到纺锤体的卵母细胞;使用纺锤体观察仪进行ICSI有助于避免纺锤体损伤,进而改善受精结局.
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人类体外受精中的异常受精
在人类体外受精(in vitro fertilization,IVF)技术中,卵子正常受精的标准是出现2个原核(PN)和2个极体(PB),通常在授精后12～18 h通过光学显微镜观察.
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人胚胎移植后剩余胚胎继续体外培养潜能的研究
目的 探讨IVF新鲜周期中D3可用胚胎移植和冷冻后剩余胚胎继续培养的价值.方法 通过囊胚序贯培养法将无原核(0PN)、单个原核(1PN)、多个原核(≥3PN)和卵裂期发育延缓的2原核(2PN)废弃胚胎培养至囊胚期.结果 ① 314枚剩余胚胎于D5～D7形成152枚囊胚(48.41%),其中53枚为优质囊胚(34.87%); ② 胚胎级别越高,囊胚形成率越高(54.39%、52.39%、49.61%和21.62%); ③ 0PN和1PN卵裂发育而来的D3优质胚胎、2PN卵裂发育来的D3评分为Ⅲ级的胚胎囊胚形成率高于2PN卵裂发育来的D3评分＞Ⅲ级的囊胚形成率(P＜0.05).结论 D3 Ⅲ级以上胚胎仍有形成囊胚的机会;对于由0PN、1PN胚胎卵裂发育而来的D3优质胚胎可以继续培养,待形成囊胚后,行种植前遗传学诊断,如染色体核型为整倍体核型,可以冷冻或移植.以上措施可以提高患者单次取卵的累积妊娠率,也可以为胚胎干细胞研究提供资源.
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异常受精胚胎临床利用价值探讨
目的:探讨常规体外受精(IVF)和卵胞浆内单精子注射(ICSI)周期中异常受精胚胎的临床利用价值.方法:回顾性分析2013年4月至2015年6月在白求恩国际和平医院生殖中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗(包括常规IVF和ICSI)的955个周期的实验室和临床数据.结果:IC-SI周期双原核(2 PN)受精率显著高于IVF周期2 PN受精率(88.20％ vs 72.04％,P＜0.01),而IC-SI周期的未见原核(0 PN)、单原核(1 PN)及多原核受精率均低于IVF周期(P＜0.01),差异有统计学意义.第5天(D5)0 PN的囊胚形成率和可利用囊胚率显著高于2 PN和1 PN组(P＜0.01).新鲜移植周期和冻融卵裂胚移植周期,0 PN组种植率和临床妊娠率显著低于2 PN组(P＜0.01),但是冻融囊胚移植周期,0 PN组的种植率和临床妊娠率与2 PN组相比,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:IVF/ICSI周期中没有2 PN胚胎可供选择移植时,可选择0 PN胚胎,囊胚培养是合理利用异常受精胚胎的有效手段.
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不同时间拆卵对胚胎发育的影响
目的 探讨在新鲜IVF周期中,加精后不同时间拆卵对胚胎发育的影响.方法 回顾性分析2014年6月~2014年11月在本生殖中心进行新鲜IVF周期的228例患者,将每位患者的卵子随机分为2组(A组和B组).A组在加精4 h后拆除颗粒细胞并观察极体排出;B组将所剩余的受精卵在加精4 h后从受精液滴中捞出,直接移入卵裂培养基中14 h后再拆除颗粒细胞.对比两组之间的受精率,正常受精率,多精受精率,可利用胚胎率,优质胚胎率和临床妊娠率.结果 两组之间的受精率,正常受精率,多精受精率,可利用胚胎率,优质胚胎率和临床妊娠率差异不显著(P>0.05).结论 在受精4 h后对部分受精卵拆除颗粒细胞观察极体排出情况,既能避免其受精率低下和受精障碍的发生,也探讨了一种新的方法.
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移植无原核胚胎出生健康子代
目的:观察无原核(PN)胚胎的发生率、影响因素及移植0PN胚胎周期的临床治疗结局.方法:回顾性分析4424个IVF-ET周期移植0PN来源胚胎的结局.结果:0PN胚胎的发生率为11.3％.女方的年龄、获卵数及优质胚胎率与0PN的发生率相关.70个周期移植了112个0PN来源的卵裂期胚胎,获得的临床妊娠率为24.3％(17/70),植入率为17.0％(19/112),流产率为11.8％(2/17).1例死产.13个周期活产13个健康子代,未见畸形的发生.对0PN来源的囊胚进行复苏周期移植,可获得与2PN囊胚相似的临床妊娠率及植入率,但流产率较高,差异有统计学意义.结论:IVF周期中,含有0PN优质胚胎的周期可能有较好的临床治疗结局.形态正常的0PN胚胎有较好的胚胎发育潜能,在无2PN胚胎的情况下,可考虑移植0PN来源胚胎.
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卵胞质内单精子显微注射后异常受精的影响因素分析
目的:探讨卵胞质内单精子显微注射(ICSI)后异常受精发生的影响因素.方法:回顾性分析299个ICSI周期,按照是否有异常受精分为异常受精组(n=118)和正常对照组(n=181),异常受精组至少发生1个非2原核(2PN)的受精卵.比较分析异常受精组和对照组临床和实验室资料.结果:异常受精组hCG注射日E2水平(14 097±3 066 pmol/L)高于对照组(1 2461±6 836 pmol/L),差异有统计学意义(P＜0.05)；异常受精组获卵数及成熟卵数分别为17.8±7.2个、15.3±6.1个,多于对照组的13.6±7.0个、10.2±5.3个,差异均有统计学意义(P＜0.01)；卵子成熟率(81.7％ vs76.4％)、2PN受精率(78.4％ vs 86.9％),组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01)；而患者年龄、基础激素水平、促性腺激素(Gn)使用总量、精子来源及质量、着床率、临床妊娠率组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:卵巢对Gn刺激的高反应性可能与ICSI后异常受精的发生有关.异常受精卵的发生虽对临床结局无明显影响,但减少异常受精发生率,增加卵子利用率,可能会提高累积妊娠率.
关键词： 卵胞质内单精子显微注射(ICSI) 异常受精 合子 -
废弃胚胎继续囊胚培养研究
目的:探讨体外受精治疗周期中废弃胚胎的体外发育潜能.方法:通过囊胚序贯培养法将无原核(0PN)、单个原核(1PN)、多个原核(≥3PN)和卵裂期发育延缓的2原核(2PN)废弃胚胎培养至囊胚期.比较不同来源胚胎囊胚形成情况和d 3胚胎的卵裂球数、质量分级等:并利用废弃胚胎囊胚形成情况对体外受精妊娠结局进行预测.结果:共收集801个废弃胚胎,经序贯培养,形成209个囊胚(26.09%),其中58个为优质囊胚(27.75%).1PN胚胎、0PN胚胎、d 3卵裂球数为7-9-细胞胚胎、d 3评分为Ⅰ-Ⅱ级胚胎以及卵裂球数为偶数的胚胎囊胚形成率较高(P均＜0.05).废弃胚胎中有囊胚形成者的临床妊娠率明显高于无囊胚形成者(P＜0.05).结论:废弃胚胎有不同程度的发育潜能,部分可发育为囊胚;特别是:①0PN和1PN胚胎:②d 3的4-9-细胞胚胎,偶数卵裂球者更佳:③Ⅰ级和Ⅱ级胚胎.
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异常受精对体外受精-胚胎移植结局的影响评价
目的 探讨异常受精对体外受精-胚胎移植结局的影响评价.方法 回顾性分析收集的体外受精-胚胎移植临床资料2000例为对象,依据有无异常受精分为两组,即无异常受精组(n=1688个周期)、有异常受精组(n=312个周期),比较分析两组体外受精-胚胎移植结局以及存在的影响因素.结果 与无异常受精组比较,有异常受精组的获卵数、可移植胚胎数、可移植胚胎数、优胚数、受精率更高,而受精率及卵子利用率更低(P<0.05);两组可移植胚胎率、优质胚胎率、卵裂率、种植率、妊娠率无差异性(P>0.05).结论 异常受精可减少新鲜周期妊娠率,可提升可移植胚胎数,对体外受精-胚胎移植结局影响较大.
关键词： 异常受精 体外受精-胚胎移植结局 影响
