清毒安肾胶囊LC-MS指纹图谱与应用

目的:建立清毒安肾胶囊的质量控制方法.方法:采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法,分析得到清毒安肾胶囊总离子流图,找出共有特征峰,利用提取离子功能,考察各特征峰的有无及特征性,由此监控清毒安肾胶囊质量.结果:共找出21个共有特征峰,方法稳定可靠,可用于清毒安肾胶囊的快速鉴别.结论:该文建立的清毒安肾胶囊LC-MS指纹图谱检测方法,通过考察特征峰的有无及特征性,可快速有效地全面监控其质量.

LC-MS鉴定木通、川木通与关木通

采用LC-MS对木通、川木通和关木通进行鉴别.结果表明,木通科木通与毛茛科川木通含有较多的相似成分,相似性较大;而关木通与前两者差别很大,相似成分较少.可用于这三种木通的鉴别.

基于XC-MS和NMR的药用植物代谢组学研究进展

药用植物代谢组学研究将LC-MS、GC-MS和NMR技术与化学计量学、多元统计分析相结合,在对药用植物体内大量的代谢物进行定性定量分析的基础上,探讨种源、生境、生长期、药用部位等因素所引起的代谢产物种类和含量的变化及其规律.该文综述了代谢组学在药材的基原植物鉴定、分类,药用植物对生境变化的响应,药用活性成分组织器官特异性分布与积累规律,次生代谢产物的生物合成途径分析,产地加_工与炮制方法对药材质量的影响等方面的研究进展.

化橘红PPARα靶标激动成分的测定和有效部位筛选

目的:对化橘红提取液中3种PPARα靶标激动成分进行LC-MS含量测定,建立基于活性成分的质量控制方法并以此为指标对各提取部位进行筛选.方法:采用计算机辅助药物设计法,分析和筛选PPARα靶标激动剂并初步归纳出母核与特征基团信息,对比化橘红中已知活性成分确定激动剂候选成分;之后对化橘红提取液进行UHPLC-MS分析,测定上述成分的含量进行确证;后对不同溶剂提取所得的有效部位进行测定,找到上述目标成分产量大的部位.结果:化橘红中的橙皮苷、柚皮苷和橙皮内酯水合物具有PPARα靶标激动活性;UHPLC-MS含量测定结果表明,化橘红有效部位中,橙皮苷的平均含量为0.738 mg/g,柚皮苷为24.496 mg/g,橙皮内酯水合物为4.167 mg/g;不同溶剂提取的有效部位测定结果表明,正丁醇部位具有高的目标化合物含量.结论:该方法快速、灵敏、准确,适宜用于对化橘红进行活性导向的多指标质量控制.

LC-MS导向研究烟根中芦丁、绿原酸的分离及含量测定

目的 研究烟根中活性化合物芦丁和绿原酸的分离方法及含量.方法 烟根乙醇-水提取物浓缩后经乙酯萃取得乙酯组分和水层浓缩液,水层浓缩液经大孔吸附树脂柱层析得90%乙醇组分和50%乙醇组分.使用液质联用(LC-MS)技术分析以上三个组分化学成分,利用硅胶、MCI GEL CHP 20P等柱色谱对有效成分进行分离,利用HPLC测定有效成分的含量.结果 烟根50%乙醇组分含有芦丁和绿原酸,90%乙醇组分仅含有芦丁,乙酯组分两者皆无;芦丁和绿原酸在烟根中总含量分别为151 mg/kg和2.67 mg/kg.结论 芦丁和绿原酸的极性较大,存在于大极性的组分中.

LC-MS和HPLC法测定人血浆中格列本脲和二甲双胍方法的建立

目的建立人血浆中盐酸二甲双胍的高效液相色谱和格列本脲的液相色谱-质谱测定方法.方法二甲双胍血浆样品经乙腈直接沉淀蛋白进样.分析柱:EC 250/4.6 NUCLEOSIL 100-5(4.6mm×250mm,5μm);流动相:0.03 mol/L(NH4)H2P04:乙腈(75:25,pH 7.0),流速1.0 ml/min;检测波长240 nm.格列本脲血浆中加入格列吡嗪为内标,经乙酸乙酯提取,进行LC-MS测定.色谱柱为ORBAX SB300C18柱(2.1 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈:0.1%乙酸铵(55:45),流速为0.2 ml/min;ESI选择性正离子检测.结果格列本脲浓度为2～200 ng/ml线性关系良好(r=0.999 8),盐酸二甲双胍浓度为6.25～4 000 ng/ml线性关系良好(r=0.999 9).二甲双胍和格列本脲方法的日内和日间RSD＜5%.结论所建立的人血浆中格列本脲的HPLC-MS测定方法和二甲双胍的HPLC测定方法灵敏、准确、简便,可用于格列本脲、二甲双胍的人体药代动力学研究.

复方苦参注射液中4种生物碱在大鼠体内组织分布研究

目的:建立LC-MS法测定大鼠血浆和其他组织中苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱的浓度,研究复方苦参注射液在大鼠体内心、肝、脾、肺、肾等12个脏器组织的分布.方法:在血浆和组织样品中加入内标,用氯仿提取,以甲醇:10 mmolNH4Ac-0.02％ HCOOH-水=90:10(v:v)；CN柱分离,LC-MS法检测健康大鼠给予复方苦参注射液后3个时间点(15min、1h、4h)的血浆及组织样品中4种生物碱的浓度.结果:在给药后3个时间点,苦参碱和槐果碱在各组织中的分布量依次为:肝＞肾/脾＞肌肉/肠＞肺/胃＞心/脑＞脂肪/子宫＞睾丸；氧化苦参碱和氧化槐果碱在各组织中的分布量依次为:肾/肺＞肌肉＞肠/胃＞心/脾＞子宫＞脂肪/睾丸＞脑/肝；随着时间的推移,苦参碱和槐果碱浓度下降速度明显缓于氧化苦参碱和氧化槐果碱；苦参碱和槐果碱在肝脏分布多,而氧化苦参碱和氧化槐果碱在肝脏分布低.结论:复方苦参注射液4种生物碱在组织脏器中的分布,氧化态和非氧化态存在较大差异,尤其在肝脏,氧化苦参碱、氧化槐果碱浓度很低,而苦参碱、槐果碱浓度很高；而且在各组织中苦参碱和槐果碱的浓度显著高于氧化苦参碱和氧化槐果碱,与血浆中的分布相反,说明苦参碱和槐果碱相对于氧化苦参碱和氧化槐果碱而言主要分布于组织脏器中.

LC-MS法测定清热养心颗粒中的5种成分

目的 采用LC-MS法同时测定清热养心颗粒中的绿原酸、咖啡酸、甘草次酸、氧化苦参碱和薯蓣皂苷元.方法 色谱柱为Agilent Zorbax SB C18柱(100 mm ×3.0 mm,3.5 μm),流动相为水-甲醇(10∶90),柱温40℃,流速0.2 mL∶ min-1,进样量10 μL,离子化方式为电喷雾(ESI),选择性离子检测(SIR),正负离子同时检测,检测电压3.5 kV,离子源温度120℃,脱溶剂温度450℃,脱溶剂气体为N2,体积流量480 L·h-1.结果 绿原酸、咖啡酸、甘草次酸、薯蓣皂苷元和氧化苦参碱的线性范围分别为11.60～2.97×103(r=0.9986)、3.05 ～780(r =0.9958)、1.10 ～282(r=0.9991)、3.63 ～930(r =0.9931),0.47 ～ 120μg·L-1(r =0.9977).结论 所用方法专属性强、快速灵敏、可用于清热养心颗粒中绿原酸、咖啡酸、甘草次酸、氧化苦参碱、薯蓣苷元等成分的含量测定.

HPLC测定蜀五加和糙叶藤五加中的金丝桃苷

目的 采用LC - MS定性鉴别蜀五加和糙叶藤五加中的金丝桃苷;采用HPLC测定蜀五加和糙叶藤五加中金丝桃苷的含量,并比较两种五加不同药用部位的金丝桃苷含量.方法 采用Kromasil C18柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相以甲醇(A)和0.5％磷酸水溶液(B),梯度洗脱,检测波长358 nm,流速1.0 mL· min-1.结果 金丝桃苷0.0250 ～ 1.25 μg与峰面积具有良好的线性关系,回归方程为:Y=4×106X +1.327×104(r=0.9999),平均回收率为100.25％,RSD=0.96％(n=9).结论 所用方法简便、准确、重复性好,可用于蜀五加和糙叶藤五加药材质量控制方法的研究.

三七三醇皂苷及制剂的LC-MS指纹图谱研究

目的 通过HPLC-MS法建立三七三醇皂苷(PTS)及其制剂三七通舒肠溶微丸胶囊的指纹图谱.方法 采用梯度洗脱法,流动相为水和乙腈,检测波长为203 nm,流速为1.0 mg·ml-1,对多批PTS及其制剂进行HPLC测定和方法学考察,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对测定结果进行相似度评价.采用对照品法和LC-MS法对原料药指纹图谱中的主要色谱峰进行成分鉴定.结果 所建立的HPLC指纹图谱条件能分离PTS的各组分,具有较好的精密度、重复性和稳定性;各组分平均相似度大于0.9.LC-MS鉴定表明,PTS中所含主要成分为三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1.结论 采用LCMS技术建立的PTS及其制剂的指纹图谱能充分展示PTS及其制剂的物质组成.

RPLC-MS测定人血浆中阿普唑仑的浓度

目的:建立液质联用(RP-MS)法测定血浆中阿普唑仑的方法.方法:以地西泮为内标物;以Agilent Zorbax SB C18(2.1 mm × 30 mm,3.5μm)柱为色谱柱,流动相为50 mmol·L-1甲酸-乙腈(3:7),流速为0.2 ml·min-1,柱温30℃,进样量50μl;质谱条件为电喷雾电离源(ESI),检测方式为正离子电离、多离子反应监测(MRM).结果:阿普唑仑在0.5～50ng·ml-1血浆浓度范围内线性关系良好(r＝0.9985,n=7 );批内和批间精密度均低于5%;低检测限为0.5 ng·ml-1.结论:该方法灵敏、准确、快速,可用于临床上阿普唑仑血药浓度监测和药代动力学研究.

LC-MS法应用于利巴韦林颗粒剂的人体生物等效性研究

目的:建立LC-MS法测定利巴韦林在人体内血药浓度并进行利巴韦林颗粒剂在健康受试者体内的生物等效性试验.方法:20名男性健康志愿者以标准二阶段交又设计自身对照试验法,分别单剂量口服2种利巴韦林片,采用LC-MS法测定受试者服药后72h内血浆中利巴韦林的浓度.结果:受试制剂和参比制剂利巴韦林主要的药代动力学参数Tmax分别为0.9±0.2,1.1±0.4h,C.max分别为:708.4± 187.5,595.4± 125.1μgL-1;AUC(0-72h)分别为6182±1182,5709±848.6μghL-1,受试制剂的相对生物利用度为109.7%.结论:2种利巴韦林制剂在健康志愿者体内生物等效.

盐酸罗匹尼罗渗透泵型控释片的药代动力学研究

目的：建立一种测定动物血浆中盐酸罗匹尼罗的方法，并进行盐酸罗匹尼罗渗透泵型控释片的药物动力学研究，并计算与参比制剂（RequipXL）的相对生物利用度。方法6只Beagle犬分别单次口服盐酸罗匹尼罗渗透泵片（受试制剂）和Requip XL （参比制剂）1片，用LC‐M S法测定血浆中的药物浓度，计算药物动力学参数和相对生物利用度。结果参比制剂和受试制剂的主要药代动力学参数 tmax分别为（2．92±0．49）和（3．58±0．49）h ，Cmax分别为（2．60±0．41）和（2．35±0．39） ng · mL －1，MRT分别为（7．76±0．89）和（8．48±0．59） h ，t1／2（Ke）分别为（4．70±0．67）和（5．94±1．19） h ，AUC（0～ t）分别为（16．06±5．55）和（17．90±2．75） ng · mL －1· h ，AUC（0～∞）分别为（16．71±5．87）和（19．03±3．08） ng · mL －1· h ，受试制剂相对于参比制剂的相对生物利用度 Fr 为111．48％。结论统计结果显示，各主要药动学参数均无显著性差异。本方法能测定口服盐酸罗匹尼罗渗透泵的血药浓度，进行动物药物动力学和相对生物利用度研究。

LC-MS测定正常及非酒精性脂肪肝模型大鼠血浆中冬青素A的质量浓度

目的 建立正常及非酒精性脂肪肝模型大鼠血浆中冬青素A质量浓度的液质联用测定方法,同时比较其代谢差异.方法 采集到的血浆样品以三七皂苷Rc为内标,经固相萃取柱处理后进行LC-MS分析.色谱条件:岛津Shim-pack CLC-ODS C18柱(150 mm × 6.0 mm,5 μm);流动相A为1 mLL-1甲酸水溶液,B为1 mLL-1甲酸乙腈溶液,梯度洗脱;质谱条件采用大气压电喷雾离子源(ESI源),负离子方式,选择离子检测(SIM),检测离子分别为m/z 501.1(冬青素A)和m/z 1 078.3(三七皂苷Rc).结果 方法学考察表明,该法定量限为2.5×10-3 μgmL-1,在2.5×10-3～5.0 μgmL-1范围内线性关系良好,日内和日间精密度(RSD)均小于10%,提取回收率在85%～115%范围内.结论 该方法灵敏性高,专属性强,适用于正常及非酒精性脂肪肝模型大鼠血浆中冬青素A的药动学研究.

Lipopeptides are currently re-emerging as an interesting subgroup in the peptide research field, having historical applications as antibacterial and antifungal agents and new potential applications as antiviral, antitumor, immune-modulating and cell-penetrating compounds. However, due to their specific structure, chromatographic analysis often requires special buffer systems or the use of trifluoroacetic acid, limiting mass spectrometry detection. Therefore, we used a traditional aqueous/acetonitrile based gradient system, containing 0.1% (m/v) formic acid, to separate four pharmaceutically relevant lipopeptides (polymyxin B1, caspofungin, daptomycin and gramicidin A1), which were selected based upon hierarchical cluster analysis (HCA) and principal component analysis (PCA).
In total, the performance of four different C18 columns, including one UPLC column, were evaluated using two parallel approaches. First, a Derringer desirability function was used, whereby six single and multiple chromatographic response values were rescaled into one overall D-value per column. Using this approach, the YMC Pack Pro C18 column was ranked as the best column for general MS-compatible lipopeptide separation. Secondly, the kinetic plot approach was used to compare the different columns at different flow rate ranges. As the optimal kinetic column performance is obtained at its maximal pressure, the length elongation factorλ(Pmax/Pexp) was used to transform the obtained experimental data (retention times and peak capacities) and construct kinetic performance limit (KPL) curves, allowing a direct visual and unbiased comparison of the selected columns, whereby the YMC Triart C18 UPLC and ACE C18 columns performed as best. Finally, differences in column performance and the (dis)advantages of both approaches are discussed.

HPLC-MS法测定小鼠血浆中蒜氨酸的浓度

目的:建立测定小鼠血浆中蒜氨酸浓度的液相色谱-串联质谱法.方法:使用大气压化学电离源(APCI),在正离子条件下选择性离子监测(SIM).用于定量分析的离子分别为m/z179→m/z200(蒜氨酸)和m/z195→m/z217(内标,咖啡因).结果:蒜氨酸浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性范围为1.35～12.15μg/ml.其低检测限(S/N＝3)可达1.62pg/μl.结论:LC-MS法灵敏、快速、准确,可用于小鼠血浆中蒜氨酸的浓度测定及临床前药动学研究.

LC-MS法测定人血浆中人参三醇二琥珀酸酯钠含量的方法学研究

目的:建立测定人血浆中人参三醇二琥珀酸酯钠的液相色谱-质谱联用法.方法:色谱柱为Shimadzu VP-C18柱(150MM×2.0mm,5 μm);乙腈-10mmol/L乙酸铵水溶液(55∶45)为流动相,体积流量0.3mL/min;柱温40℃;内标物吲达帕胺.质谱条件为电喷雾离子源(ESI),选择负离子提取方式检测,人参三醇二琥珀酸酯钠和吲达帕胺的选择检测离子分别为m/z 675.5([M-Na+H]*)、m/z 364.1([M+H]+).结果:人参三醇二琥珀酸酯钠线性范围为0.030 4～101.3 μg/mL,定量下限为0.030 4 μg/mL.准确度、精密度以及稳定性均符合有关要求.结论:本方法专属性强,灵敏度高,适用于人血浆中人参三醇二琥珀酸酯钠的药代动力学研究.

LC-MS法鉴定槲皮素在大鼠体内的主要代谢产物

目的:采用液相色谱-质谱联用法(LC-MS)鉴定大鼠几服(ig)槲皮素单体后血浆中的代谢产物.方法:血浆样品经过β-葡萄糖醛酸酶/硫酸酯酶(G1512)水解后,进行色谱分离,采用液相色谱-质谱联用仪检测,大气压电喷雾离子源(APESI)负离子条件下进行扫描,鉴定大鼠给药槲皮素(100 mg·kg-1)单体后血浆中代谢产物的结构.结果:通过与对照品比较,结合质谱仪扫描结果分析,在大鼠给药槲皮素单体后血浆中鉴定出槲皮素(m/z 300.9)、异鼠李素(m/z 314.9)及柽柳素(m/z 314.9)等代谢产物.结论:采用酶水解的方法鉴定出大鼠血浆中槲皮素代谢多种产物,为进行含槲皮素中药及其复方的药物代谢动力学研究提供参考.

к-卡拉胶寡糖为配体的亲和探针制备方法的研究

目的:建它一种以к-卡拉胶寡糖为配体,Affi-gel 15为载体的亲和探针,用于分离纯化к-卡拉胶寡糖在细胞信号通路中的特异性受体.方法:将标准寡糖和к-卡拉胶寡精进行己二胺衍生化后与Affi-gel 15结合,并利用MS、NMR、PAGE电泳等方法对各步的产物进行分析.结果:MS、NMR结果表明,标准寡糖和к-卡拉胶寡糖均能与己二胺进行完全稳定的衍生化反应,其衍生物与Affi-gel 15的结合率都能达到50%以上,其中к-卡拉胶寡糖-己二胺与Affi-gel 15的结合率达到了68%.结论:制备得到的以к-卡拉胶寡糖为配体的亲和探针能够与к-卡拉胶寡糖的受体结合,如碱性成纤维细胞生长因子(bFGF).这表明这种制备方法是可行的.

LC-MS/MS测定人血浆中左西孟旦

目的:建立LC-MS/MS法测定左西孟旦在血浆中的浓度,研究左西孟旦在健康志愿者中的药代动力学特征.方法:待测血浆1.0 mL,经0.1 mol·L-1的盐酸0.1 mL酸化后用乙酸乙酯4 mL萃取处理,采用DiamonsilTMC18(5 μm,4.6 mm×150mm)色谱柱.流动相为乙腈(0.1%甲酸)-水(85:15),LC-MS/MS选择性正离子检测法测定血浆中左西孟旦浓度.结果:血浆中内源性物质对测定无干扰,低检测限低于0.5 ng·mL-1,在1.0～50.0 ng·mL-1范围内左西孟旦线性关系良好(r=0.9977),日内、日间RSD均小于8%,每个样品分析时间仅需5.5 min.结论:该法特异性强、灵敏度高,操作简便快速,测定结果可靠,适于进行左西孟旦药代动力学研究.