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扇贝裙边糖胺聚糖对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响
目的研究扇贝(Placopecta magellanicus)裙边中提取的糖胺聚糖(SS-GAG)是否如肝素一样抑制血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖.方法采用胎牛血清和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)所诱导的大鼠胸、腹主动脉VSMC增殖模型,通过细胞计数、结晶紫染色及MTT比色法观察SS-GAG对VSMC增殖的影响,并运用免疫组织化学技术和计算机图像分析系统检测SS-GAG对VSMC的增殖细胞核抗原(PCNA)和血小板衍化生长因子(PDGF)表达的影响.结果 SS-GAG 50,100和200 mg·L-1对20% 胎牛血清和50 μg·L-1 bFGF所诱导的VSMC增殖均有明显抑制作用,并能抑制VSMC增殖时PCNA 和PDGF的表达.结论 SS-GAG能抑制VSMC的增殖,该作用可能是通过抑制PDGF和PCNA的表达而实现的.
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扇贝裙边糖胺聚糖对U937泡沫细胞形成过程中TNF-α、IL-6和IL-8表达的影响
目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导的U937泡沫细胞形成过程中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)表达的影响,以探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化作用的机制.方法:采用U937细胞与80mg/L OX-LDL孵育48 h建立U937泡沫细胞模型.将培养的U937细胞分为5组:正常细胞对照组、模型组(OX-LDL)和低、中、高浓度的SS-GAG药物组.分别检测不同处理组细胞分泌的TNF-α、IL-6和IL-8的含量.结果:培养的U937泡沫细胞中TNF-α、IL-6和IL-8表达量明显高于正常细胞组,而药物组中TNF-α、IL-6和IL-8表达量则明显降低,以800ug/mL药物组降低为明显(P<0.01).结论:SS-GAG能降低泡沫细胞形成过程中炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8的表达从而发挥抗动脉粥样硬化的作用.
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扇贝裙边糖胺聚糖对OX-LDL致血管内皮细胞损伤的保护作用
目的研究扇贝裙边提取物糖胺聚糖(SS-GAG)对血管内皮细胞的保护作用,进而探讨其抗动脉粥样硬化(AS)作用机制.方法本研究采用氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(HUVEC,CRL-2480)损伤模型,用MTT法和化学方法分别从细胞和分子水平观察SS-GAG对血管内皮细胞增殖活性及细胞内一氧化氮(NO)水平和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响.结果 OX-LDL能明显抑制血管内皮细胞的增殖活性(P<0.01),降低血管内皮细胞内NO水平及eNOS的活性(P<0.01);用SS-GAG(终浓度为50,100,200 mg·L-1)预处理后,能逆转上述效应(P<0.01).结论 OX-LDL抑制血管内皮细胞的增殖,降低内皮型eNOS的活性,减少细胞内NO的生成;SS-GAG对血管内皮细胞的脂质过氧化物损伤有保护作用.
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扇贝裙边糖胺聚糖对SH-SY5Y细胞氧化及凋亡影响
目的 探讨扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)含量及凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-9表达的影响.方法 体外培养SH-SY5Y细胞,随机分为对照组、6-OHDA损伤组和SS-GAG(200、400和800 mg/L)处理组,测定各组细胞中MDA含量、LDH活性,实时荧光(real-time) PCR检测细胞Bcl-2、Bax mRNA表达的变化,流式细胞技术(FCM)检测活化Caspase-9蛋白表达.结果 与对照组相比较,6-OHDA损伤组的MDA含量、LDH活性增加,Bcl-2 mRNA表达降低,Bax mRNA表达升高,表达活化Caspase-9蛋白的细胞数增加,差异均有统计学意义(F=27.699～280.567,P＜0.01).与6-OHDA损伤组比较,各浓度SS-GAG处理组SH-SY5Y细胞中MDA含量、LDH活性降低,Bcl-2mRNA表达升高,Bax mRNA表达降低,活化的Caspase-9蛋白表达量减少,并且呈剂量依赖性,差异均有显著意义(F=27.699～280.567,P＜0.01).结论 SS-GAG能降低6-OHDA诱导的氧化应激水平,保护生物膜的完整性.SS-GAG通过上调Bcl-2基因的表达和下调Bax基因的表达,抑制Caspase-9蛋白的活化,从而抑制6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞凋亡.
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扇贝裙边糖胺聚糖抗肿瘤作用和对荷瘤小鼠免疫功能的影响
目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)的抗癌作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:建立小鼠移植性S180实体瘤模型,观察SS-GAG的抑瘤率以及对荷瘤小鼠的体质量、肝质量、白细胞计数、脾指数、胸腺指数的影响,同时观察SS-GAG对荷瘤小鼠细胞免疫活性的影响.结果:SS-GAG可明显抑制S180实体瘤的生长,SS-GAG与环磷酰胺联用可使化疗药物的抗癌作用增强并能有效提升减少的白细胞;能显著增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力和杀伤活性,增强荷瘤小鼠脾淋巴细胞的转化增殖和NK细胞活性.结论:SS-GAG可显著抑制肿瘤生长,与环磷酰胺联用时有减毒增效作用;并能增强荷瘤小鼠的免疫功能.
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扇贝裙边糖胺聚糖对过氧化氢损伤的内皮细胞释放血管活性物质的影响
目的:观察扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对过氧化氢(H2O2)损伤的血管内皮细胞产生血管活性物质的影响.方法:用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304建立H2O2诱导的内皮细胞损伤模型组、不同浓度的SS-GAG组以及正常对照组,用放射免疫法测定培养液中6-酮-前列腺素Fla(6-keto-PGFla)、血栓素B2(TXB2)、内皮素(ET)的含量;用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)的含量.结果:与模型组比较,不同浓度的SS-GAG组均可使血管舒张因子6-keto-PGFla、NO含量明显增加;缩血管因子TXB2、ET含量明显减少(P＜0.05,P＜0.01).结论:SS-GAG可能通过增加舒血管因子、降低缩血管因子的分泌来减轻H2O2对内皮细胞的氧化损伤.
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扇贝裙边糖胺聚糖的体外抗肿瘤活性及对荷瘤小鼠抗氧化作用的研究
目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)的体外抗肿瘤活性及对荷瘤小鼠的抗氧化功能的影响.方法:用MTT法观察不同浓度的SS-GAG对体外培养的宫颈癌HeLa、人大肠癌LOVO、肺癌A549、神经胶质瘤U251等肿瘤细胞株增殖活性的影响;观察SS-GAG对小鼠接种S180后30 d内的存活时间;通过黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸显色法等多种生化方法观察SS-GAG对荷瘤小鼠血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物岐化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响,并与对照比较.结果:与对照比较,SS-GAG可明显抑制HeLa、U251细胞生长,对LOVO、A549细胞生长也有一定的抑制作用;SS-GAG能显著延长S180腹水瘤小鼠的生存时间,提高荷瘤小鼠的T-AOC、SOD水平,降低MDA含量(P<0.01或P<0.05).结论:SS-GAG可抑制肿瘤生长,并有一定的抗氧化作用.
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扇贝裙边糖胺聚糖对U937泡沫细胞形成过程中抗氧化酶、NO和细胞内Ca2+的影响
目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)抗动脉粥样硬化作用机制.方法:将培养的U937细胞分为正常组、模型组和SS-GAG不同浓度组,除正常组外,其余组加入氧化低密度脂蛋白造模后给予相应浓度药物进行处理,分别采用不同方法测定各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和一氧化氮(NO)含量及Ca2+水平.结果:各组中SOD含量无显著性差别;SS-GAG组中GSH-Px活性和NO含量与模型组比较明显升高,而细胞内Ca2+水平则明显降低.结论:SSGAG可能通过增强GSH-Px活性和NO释放,同时降低细胞内Ca2+水平而发挥抗动脉粥样硬化作用.
