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去铁胺对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后海马CA1区BrdU和GFAP表达的影响
目的 研究去铁胺(DFO)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)和胶原纤维酸性蛋白(GFAP)表达变化的影响.方法 通过结扎并剪断7日龄新生Wistar大鼠右侧颈总动脉,吸入8％O2+ 92％N21h制备新生鼠HIBD模型.随机将HIBD鼠分为模型组和实验组,同时设置假手术组;实验组于脑缺氧缺血后立即腹腔注射DFO0.2 mg· g-1·d-1,然后分别于24,48 h各注射1次;模型组于相同时间点给予同体积0.9％ NaCl腹腔注射;假手术组不注射.以间接免疫荧光组织化学方法检测各组大鼠给药后第4天海马CA1区BrdU阳性细胞数和GFAP表达变化,光镜下观察脑组织病理改变.结果 3组新生Wistar大鼠脑组织病理改变:假手术组无异常病理改变;模型组海马CA1区细胞层次减少,排列紊乱,出现胶质细胞增生,大量神经细胞核固缩、碎裂;实验组大鼠脑病理改变较模型组减轻.3组新生鼠海马CA1区5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)阳性细胞数比较:给药后第4天,假手术组、模型组和实验组BrdU阳性细胞数分别为14.50±11.14、35.63±15.79和51.63±17.79,与假手术组比较,模型组差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组比较,实验组差异有统计学意义(P＜0.05).3组新生鼠海马CA1区胶原纤维酸性蛋白表达:给药后第4天,假手术组、模型组和实验组积分光密度值分别为0.16±0.46×10-2,0.20±0.65×10-2,0.28 ±0.74 ×10-2,与假手术组比较,模型组差异有统计学意义(P＜0.001);与模型组比较,实验组差异有统计学意义(P ＜0.001).结论 DFO可减轻新生Wistar大鼠HIBD后脑组织病理损害,促进海马CA1区BrdU、GFAP表达增加,提示DFO早期干预可促进新生Wistar大鼠HIBD后受损神经细胞的再生.
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神经干细胞移植与脑梗死
背景：将神经干细胞移植到脑梗死病灶区可以促进受损神经细胞的修复。目的：分析神经干细胞移植治疗脑梗死的相关影响因素。
方法：文章通过数据库检索的方式分析近年来关于神经干细胞移植治疗脑梗死的实验研究，从中国临床试验注册和基础实验研究两方面分析神经干细胞与脑梗死的研究进展。
结果与结论：脑梗死后神经干细胞的增殖和分化与脑内微环境密切相关，梗死区域有大量的神经细胞丢失。细胞因子在神经干细胞移植修复神经功能损伤时发挥一定作用，能够诱导大鼠脑梗死后神经干细胞的增殖、分化和迁移，目前被证实的有表皮生长因子、脑源性神经营养因子、胰岛素样生长因子1、神经生长因子、碱性成纤维细胞生长因子等。针灸和中医药对脑梗死后室管膜下区神经干细胞的增殖、迁移和分化有促进作用。神经干细胞移植治疗脑梗死的研究已经取得了阶段性进展，未来仍有许多问题需要进一步解决。 -
5-BrdU标记的骨髓间充质干细胞对大鼠创面愈合的作用研究
目的 探讨以5-溴脱氧尿嘧啶(5-BrdU)标记的骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)在大鼠创面愈合中的作用.方法 分离培养大鼠BMSCs并用流式细胞仪技术鉴定.在大鼠背部脊柱一侧制作全层皮肤缺损模型,实验组经尾静脉注入经5-BrdU标记的BMSCs,移植细胞数为2×107.对照组为5-BrdU标记的BMSC移植的正常大鼠.术后3 d、7 d、14 d、21 d、28 d分批处死动物,观察移植细胞参与创面愈合的情况.结果 流式细胞仪鉴定细胞表达CD29、CD90;CD45表达呈阴性.实验组:经5-BrdU体外标记的BMSCs进行细胞移植14 d后,大鼠创面局部及边缘可见5-BrdU标记的阳性细胞聚集,免疫组化染色可见基底层、真皮层、新生血管周围有散在红棕色标记细胞;对照组中未发现明显的聚集现象;抗BrdU/FⅧ、BrdU/波形蛋白免疫双标技术检测结果显示:在创伤部位有部分BMSCs分化为血管内皮细胞和成纤维细胞参与创面愈合.大鼠正常皮肤中未见明显的BMSCs聚集和增殖分化情况.结论 经尾静脉注射移植的BMSCs参与皮肤创面愈合.
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神经生长因子对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后神经再生的影响
目的 探讨外源性神经生长因子(NGF)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经再生的影响.方法 通过7日龄新生Wistar大鼠制作HIBD模型,设置假手术组、HIBD对照组、NGF治疗组,应用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记新生神经细胞,免疫组化方法和计算机图像分析技术检测不同时点(术后4、7、14、21 d)海马齿状回(DG)巢蛋白(nestin)表达、BrdU阳性细胞数的变化.结果 各时点HIBD对照组nestin、BrdU阳性细胞数较假手术组增加(P均＜0.05);各时点NGF治疗组nestin、BrdU阳性细胞数较假手术组和HIBD对照组增加(P均＜0.01).结论 早期给予外源性NGF治疗可促使新生鼠脑缺氧缺血后中枢神经系统nestin、BrdU的表达增加,NGF治疗可促进受损神经细胞的增殖再生,在神经细胞损伤的修复巾发挥一定的保护作用.
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低分子量肝素抑制球囊损伤后兔血管内膜增生的实验研究
目的:探讨不同剂量、不同给药时间低分子量肝素(LMWH)对兔髂动脉内膜损伤后内膜增生和血管平滑肌细胞增殖的影响.方法:将96只纯种雌性家兔分为空白对照组6只(A),实验对照组18只(B)、小剂量(60u/Kg)LMWH组36只(C)、大剂量(120u/Kg)LMWH组36只(D).根据不同给药时间,C、D组分别分成三个亚组.三组均经左侧股动脉,近心端插入3FFogarty球囊导管,反复拉动导管制备髂动脉内膜损伤模型.分三批于用药后72h、14d和28d提取髂动脉标本;利用计算机成像系统测量内膜厚度,抗SMCα-ActinABC免疫组织化学方法行5-BrdU单抗标记和verhoff方法联合测定SMC增殖指数.结果:A组内膜厚度平均41.35±7.06μm;未见5-BrdU标记的阳性细胞.B、C、D组内膜厚度均明显高于A组(P＜0.01).C、D组的内膜厚度和SMC增殖指数高于B组,有显著性差异(P＜0.05),并可见5-BrdU标记的阳性细胞.C和D组比较,前者的内膜厚度和SMC增殖指数均小于后者,但两者间无统计学差异,P＞0.05.结论:兔髂动膜球囊导管损伤后,内膜明显增生,平滑肌细胞增殖;LMWH可抑制其血管内膜增生和平滑肌细胞增殖,尤其是小剂量、损伤后早期用药.
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骨髓基质细胞体外分化移植治疗大鼠脊髓损伤的初步研究
[目的] 探讨大鼠骨髓基质细胞体外分化为神经干细胞后移植治疗大鼠脊髓损伤的可行性.[方法] 骨髓基质细胞经培养及定向分化为神经干细胞,后者由5-溴脱氧尿嘧啶核苷法标记,制备大鼠脊髓损伤模型,伤后第9 d移植神经干细胞,实验分组:细胞移植组、PBS填充组、正常对照组.应用组化法观察移植细胞是否存活,取材前24 h显露坐骨神经,行辣根过氧化物酶逆行示踪法观察脊髓损伤处的修复重建.[结果] 骨髓基质细胞在定向分化为神经干细胞后标记并移植于脊髓损伤区,标记的阳性细胞可在受体脊髓内检测到,辣根示踪技术显示细胞移植组较PBS填充组阳性细胞明显增多,差别有统计学意义.[结论] 大鼠骨髓基质细胞在体外分化为神经干细胞后移植于脊髓损伤区,移植细胞可以存活,并参与脊髓损伤处神经传导通路的结构重建.
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榄香烯乳联合顺铂抑制胃癌AGS细胞生长的实验研究
目的 研究榄香烯乳(elemene)单独或联合顺铂(cisplatin)对人胃癌AGS细胞增殖和周期的影响,并探讨两药是否有协同作用及其可能的分子机制.方法 榄香烯乳单独或联合顺铂作用人胃癌AGS细胞.MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;BrdU掺入标记增殖的AGS细胞,免疫荧光细胞染色法测定增殖细胞数;Western印迹检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达.结果 榄香烯乳(10-160μg/ml)对AGS细胞生长的抑制作用呈现浓度和时间依赖性,与对照组比较,除10μg/ml作用12h外,其它各组差异均有统计学意义(P<0.05).细胞周期中DNA合成前期(G0/G1期)细胞比例增加,DNA合成期(S期)细胞比例下降.榄香烯乳作用AGS细胞后,降低BrdU的渗入率,减少cyclinD1的表达.榄香烯乳(80μg/ml)联合顺铂(4μg/ml)对细胞增殖和周期的抑制明显强于单独用药(P<0.05).结论 榄香烯乳可抑制人胃癌AGS细胞的增殖并阻滞细胞于G0/G1期,与顺铂联合具有协同作用,其机理可能与降低cyclinD1的表达有关.
