首页 > 文献资料
-
菲牛蛭素对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的干预作用
目的 研究菲牛蛭素对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化及斑块的干预作用.方法 按照体重将高脂饲料喂养的雄性ApoE-/-小鼠随机分为3组:模型组、对照组(给予辛伐他汀3mg· kg-1·d-1灌胃)和实验组(给予菲牛蛭素400 U·kg-1·d-1腹腔注射);另设C57BL/6J小鼠为正常组(不予任何处理).给药10周后,全自动生化仪检测各组小鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平,以免疫组化法检测主动脉血管标记物CD34蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体(VEGFR-2)的表达.结果 给药后,模型组、对照组和实验组血清TG分别为(1.57±0.12),(1.10±0.21),(0.95±0.20) mmol·L-1;这3组的TC分别为(19.93±2.24),(14.47±1.30),(11.90±2.38) mmol·L-1;这3组的LDL-C分别为(17 24±1.52),(13.94 ±1.46),(10.02±2.14) mmo1·L-1;这3组的HDL-C分别为(4.05±1.81),(4.62±0.50),(3.38±0.24) mmol·L-1,与模型组相比,实验组差异均有统计学意义(均P＜0.01).模型组、对照组和实验组的斑块胶原相对含量分别为(21.48±2.44)％,(37.12±3.33)％,(51.60±2.47)％;这3组的CD34蛋白含量分别为(11.02±1.64)％,(6.82±0.66)％,(4.56±0.59)％;这3组的VEGF蛋白分别为(22.13±2.04)％,(16.20±0.65)％,(11.16 ±0.82)％;这3组的VEGFR-2蛋白表达分别为(17.90±0.73)％,(15.11±0.52)％,(10.56 ±0.60)％;与模型组相比,实验组差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 菲牛蛭素可改善ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化,稳定粥样斑块,其机制可能与减少VEGF和VEGFR-2表达、抑制斑块微血管新生有关.
-
菲牛蛭素体内外抗凝实验研究
目的:研究广西菲牛蛭中提取的两种菲牛蛭素--菲牛蛭素A(Bufrudin A,BA)和菲牛蛭素B(Bufrudin B,BB)在人体外及动物体内的抗凝作用.方法:观察菲牛蛭素在人体外及动物体内对部分活化凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)的影响.结果:在体内外实验中,BA、BB均能明显延长活化部分APTT、PT及TT,但两者的三个指标有明显差异性,其中BA对TT的作用显著,BB则对PT的作用更强.结论:广西菲牛蛭中的抗凝物质BA、BB在体内外均有较强的抗凝活性.
-
菲牛蛭素对凝血酶诱导血管内皮细胞活力和vWF、PAI-1、t-PA分泌量的影响
目的:通过研究菲牛蛭素对凝血酶诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞活力和血管假性血友病因子(vWF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、组织纤溶酶原激活物(t-PA)分泌量的影响,进一步明确菲牛蛭素抑制血栓形成作用机制.方法:通过体外培养HUVEC,建立凝血酶细胞损伤模型,四甲基噻唑蓝(MTT)法测定不同浓度凝血酶对细胞活力的影响,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测培养液中LDH含量,根据以上结果选取凝血酶佳诱导浓度进行试验;肝素为阳性药,菲牛蛭素分终浓度为1 U/mL、3 U/mL、4 U/mL 3个剂量组,MTT法测定菲牛蛭素对模型细胞活力的影响,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养液中vWF、PAI-1、t-PA含量,LDH试剂盒检测培养液中LDH含量.结果:凝血酶15 U/mL浓度组诱导作用明显;与凝血酶模型组比较:菲牛蛭素中剂量和大剂量组保护凝血酶对HUVEC的损伤的效果明显(P＜0.01),菲牛蛭素小、中、大剂量组明显减少vWF、PAI-1分泌,增加t-PA含量(P＜0.01).结论:高浓度菲牛蛭素具有保护凝血酶对血管内皮细胞的损伤作用,对内皮细胞抗凝、纤溶和血小板活化具有调节作用,使内皮细胞的抗凝、纤溶功能趋于正常,抑制血小板活化.其作用可能与菲牛蛭素对抗凝血酶诱导内皮细胞的损伤,抑制vWF和PAI-1,增加t-PA的分泌释放,增加t-PA/PAI 1比值有关.
-
菲牛蛭素对血管新生作用的研究
目的:通过菲牛蛭素刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管,研究其对血管新生的影响.方法:体外培养HUVEC,以血管内皮生长因子(VEGF)作阳性对照药,采用四甲基噻唑蓝(MTT)比色法测定菲牛蛭素对HU-VEC细胞活力的影响,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测菲牛蛭素对HUVEC培养液中VEGF释放含量的影响;制备CAM模型,生理盐水作对照,观察不同浓度菲牛蛭素对血管生成的影响.结果:菲牛蛭素终浓度0.25 U/mL时细胞活力强,与空白对照组比较增殖率为28.4％,且在此浓度培养液中VEGF含量高,比空白对照组高出80.7％;与生理盐水对照组比较,CAM血管总数明显增加,大、中血管数增加显著(P＜0.01),小血管数变化不明显(P＞0.05),其中以22 U/mL剂量组增生作用明显.结论:菲牛蛭素对血管新生具有促进作用,这可能为缺血性疾病治疗提供依据.
