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大鼠幼龄期和成年后长期运动对抵抗高脂诱导肥胖作用和机制研究
目的:探讨大鼠幼龄期长期运动后12周龄(成年期)时,进行高脂饮食诱导肥胖(DIO),体内脂肪含量以及脂肪组织和下丘脑组织内基因的变化,同时进一步研究幼龄期长期运动大鼠在成年后DIO的同时进行持续运动的效果和机制.方法:3周龄断乳雄性幼鼠随机分为对照组(C组,不运动),运动组(E组,连续9周运动),每组各12只.12周龄时C组分为成年期对照组(CC组,不运动)和成年期高脂诱导肥胖模型组(DIO组),E组大鼠随机分为成年期高脂组(EH组,高脂饲料喂养,不运动)和成年期高脂运动组(EHE组,高脂饲料喂养,运动),每组各6只.24周龄时取材,制备脂肪组织切片,用IPP软件统计400倍视野下脂肪细胞数目;ELISA法测定血清Leptin和Adiponectin含量;R-T PCR测定脂肪组织Leptin和Adiponectin mRNA表达水平,下丘脑NPY和POMC mRNA表达水平.结果:①根据体重、脂体比、脂肪细胞数目以及血糖和血脂等指标,DIO组大鼠出现肥胖、血糖和血脂代谢紊乱,EH组体内脂肪含量显著低于DIO组(P＜0.01),EHE组脂肪含量也低于EH组(P＜0.05);②血清Leptin含量DIO组均高于CC组和EH组(P＜0.05),血清Adiponectin含量各组之间无差异;③DIO组脂肪组织中Leptin mRNA表达水平与CC组无统计学差异,但EH组低于DIO组(P＜0.05).脂肪组织中Adiponectin mRNA表达水平DIO组低于CC组(P＜0.05)和EH组(P＜0.05);④DIO组大鼠下丘脑组织中NPY mRNA和POMC mRNA表达水平均高于CC组(P＜0.05),而EH组与DIO组之间无统计学差异,但EH组NPY mRNA表达水平高于EHE组(P＜0.05),POMC mRNA表达低于EHE组(P＜0.05).结论:大鼠幼龄期长期运动抑制成年后高脂饲料诱导肥胖,脂肪组织中Leptin和Adiponectin基因的变化是其重要作用机制;下丘脑内NPY和POMC基因变化是大鼠在成年后高脂诱导肥胖同时继续运动保持低脂肪含量的重要机制.
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GnIH对去卵巢兼予雌激素大鼠下丘脑POMC的调节作用
目的:探讨侧脑室微量注射促性腺激素抑制激素(GnIH)对下丘脑阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)蛋白表达的影响.方法:40只雌性SD大鼠建立卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠模型后随机分为对照组(n=20)和实验组(n=20),分别于侧脑室微量注射生理盐水和GnIH 4μl;每组根据注射时间不同分为注射1h、2h、4h、6四个亚组(n=5).采用蛋白印迹技术检测下丘脑POMC蛋白表达的情况.结果:注射1h、2h、4h,实验组大鼠下丘脑POMC蛋白的表达量与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).注射6h,实验组大鼠下丘脑POMC蛋白的表达量明显低于对照组(P＜0.05).结论:侧脑室微量注射GnIH可以抑制下丘脑POMC蛋白的表达.
关键词： 侧脑室 GnIH POMC 下丘脑-垂体-性腺轴 -
瘦素在生殖中的作用
瘦素(Leptin)是一种具有多效性的激素,而初只被认为是一种抗肥胖激素[1].瘦素传递体内脂肪含量的信号给中枢神经系统,从而抑制摄食,增加能量消耗,进而减轻体重,控制能量平衡.之后研究发现,它还是一种能对多种生理过程起到调节作用的内分泌因子,如血管发生、炎症、造血、免疫及牛殖功能等[2-4].近些年,越来越多的研究者开始关注瘦素与生殖的关系.本文就瘦素对生殖的调节作用作一综述.
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枸杞多糖对热暴露大鼠血浆中CRH、HSP70和脑垂体POMC基因表达水平的影响
通过对热暴露大鼠进行枸杞多糖干预,观察大鼠应激器官重量和血浆促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)、热休克蛋白70(Heat shock 70 protein,HSP70)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)及垂体阿黑皮素(proopiomelanoeortin,POMC) mRNA表达水平的变化.与对照组(CN)相比,热暴露组(HE)和热暴露+枸杞多糖组(HL)大鼠脾脏、肝脏器官相对重量明显降低,血浆CRH、HSP70含量明显增高(P ＜0.05);HE组下丘脑器官相对重量明显降低(P＜0.05);LBP明显增高大鼠下丘脑器官相对重量及血浆HSP70的表达水平(P＜0.05);HE和HL组大鼠心脏、胸腺器官相对重量,血浆中IgG含量及垂体POMC mRNA表达水平与对照组相比无明显改变(P＞0.05).结果表明,热暴露会对机体产生不利影响,枸杞多糖可通过增高HSP70的表达来对热暴露状态下的机体进行保护.
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电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞POMC转录水平的影响
目的:观察75 mGy、2.0 Gy X射线全身照射后小鼠腹腔巨噬细胞阿黑皮素原(POMC)mRNA转录水平的时程变化.方法:采用地高辛标记碱性磷酸酶显色原位杂交法.结果:阳性细胞胞浆被染成蓝紫色,假照组有POMC mRNA的表达,2.0 Gy照射后不同时间点均未见有POMC的表达.75 mGy照射后从2～8 h表达逐渐增加,8 h达峰值,然后回降到假照水平.结论:低剂量辐射可增强巨噬细胞POMC转录,而高剂量则抑制其表达.
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FoxO1对下丘脑摄食中枢的影响研究进展
下丘脑是人体的摄食中枢,它通过抑制食欲的阿黑皮素原(POMC)神经元和促进食欲的神经肽相关蛋白(AgRP)神经元调节摄食及能量代谢.叉头转录因子O亚族1 (FoxO1)是胰岛素信号通路和瘦素信号通路中重要的调节蛋白,FoxO1的生理作用是促进下丘脑Agrp基因表达、抑制Pomc基因表达,抑制瘦素信号通路的转录激活因子3(STAT3)蛋白对Pomc基因转录的促进作用,从而促进食欲.瘦素和胰岛素均可激活经典的IRS/PI(3)K/Akt信号通路,使FoxO1磷酸化失去活性,抑制食欲.此外,沉默信息调节因子Sirt1也可以通过去乙酰化,影响FoxO1的转录活性.本文综述了胰岛素、瘦素、Sirt1通过FoxO1调节下丘脑摄食中枢的作用机制.
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静力训练对大鼠β-内啡肽及 POMC 基因表达的影响
探索静力训练对大鼠β-内啡肽及其前体前阿黑皮素(POMC)基因表达的影响.168只大鼠随机分为静力训练高(A)组、中(B)组、低负荷(C)组,动力训练(D)组,绑缚(E)组和正常(F)组6组,六周后,分别检测安静和运动后即刻下丘脑、垂体、血浆β-内啡肽及下丘脑 POMC mRNA 含量.结果:静力训练和动力训练均可以提高下丘脑 POMC 基因转录水平,但静力训练提高了安静和运动后中枢β-内啡肽含量及下丘脑POMC基因转录水平.结论:启动内源性β-内啡肽的基因表达可能是静力训练效应的内在机制之一.
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R-(α)-甲基组胺对AtT20垂体瘤细胞Pomc及其转录因子表达的影响
[目的]研究R-(α)-甲基组胺[R-(α)-MeHA]对AtT20垂体瘤细胞Pomc及其转录因子表达的影响.[方法]以小鼠垂体瘤细胞(AtT20)为实验对象,分别采用0.02～12.5μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞24h,通过MTT检测药物对细胞增殖的影响;采用0.1μmol/LR-(α)-MeHA干预AtT20细胞30min、1、2、4、8、12h等相应时间,运用ELISA方法检测细胞分泌至培养液的促肾上腺皮质激素(ACTH)含量,RT-qPCR方法检测相关基因mRNA表达,Western blot方法检测相关蛋白表达.[结果] 0.02～12.5μmol/L的R-(α)-MeHA对AtT20细胞的增殖无抑制作用更无毒性作用.0.1μmol/R-(α)-MeHA对AtT20细胞ACTH分泌功能无明显作用.与对照组比较,0.1 μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞4h后,可增强阿片促黑素皮质素原(Pomc)基因表达、0.5μmol/L R-(α)-MeHA促进Pomc蛋白表达;此外0.1μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞30min～12h不同时点后Pou1f1基因表达均显著上调,其中以4h为明显,上调达3倍(P＜0.05);同样,0.1 μmol/R-(α)-MeHA作用4h也显著促进Egr1基因表达上调约2倍(P＜0.05);作用1h显著增强了Prop1基因表达,上调近4倍(P＜0.05);干预4h、8h均显著上调Foxl2基因表达,上调约3倍(P＜0.05),对Neurod1、Pitx1和Tbx19基因表达无明显影响.[结论] R-(α)-MeHA具有促进Pomc基因以及其转录因子Pou1f1、Egr1、Prop1和Foxl2的表达作用.
关键词： AtT20垂体瘤细胞 R-(α)-甲基组胺 基因表达 POMC ACTH Pou1f1 -
InsR/FoxO1信号通路对妊娠胆汁淤积症子代大鼠下丘脑中POMC表达的影响
目的:探讨胰岛素受体(InsR)/胰岛素调节转录因子(FoxO1)信号通路对妊娠肝内胆汁淤积症出生后6 个月子代大鼠下丘脑中阿片-促黑素细胞皮质素原( POMC )表达的影响. 方法:40只清洁级SD孕鼠随机分为2组,每组20只. 孕第13天时,对照组孕鼠皮下注射精制植物油2. 0ml/(kg·d),ICP组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇1. 0 mg/( kg·d) ,直至孕21天. 从ICP组和对照组出生子代中各随机选取雌性20只喂养至6月龄. 分别在出生后1个月、3个月、6个月断尾取血. 6月龄时进行糖耐量实验,检测血糖水平的变化. 6 月龄处死子代提取下丘脑组织, PCR 法检测InsR、FoxO1 及POMC mRNA表达. 应用免疫组化法检测POMC在下丘脑弓状核的表达. 结果:ICP组子代大鼠在出生时、1个月时体重明显低于对照组(P<0. 05),6个月时体重与对照组比较无明显差异. 6月龄时进行糖耐量实验,ICP 6月龄子代血糖水平在不同时间段均高于对照组子代水平,差异有统计学意义( P<0 . 05 ). ICP组6月龄子代大鼠下丘脑中InsR、FoxO1 A、POMC mRNA相对含量与对照组比较,差异有统计学意义( P<0 . 05 ). 免疫组化结果显示,ICP子代鼠下丘脑中POMC阳性细胞数明显低于对照组. 结论:ICP组由于存在高胆酸水平和不良的胎儿宫内生长环境,引发子代下丘脑调控能量稳定的信号通路改变,抑制食欲细胞减少,表现为饥饿状态,导致体重增加和血糖变化明显.
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GnIH对卵巢摘除术后补充雌激素大鼠下丘脑POMC阳性神经元的影响
目的:探讨促性腺激素抑制激素(GnIH/RFRP-3)对卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠下丘脑阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)阳性神经元的影响.方法:65只成年雌性SD大鼠,随机选取2只用于免疫荧光多重染色,观察GnIH/RFRP-3与POMC在大鼠下丘脑神经元的表达;随机选取3只用于免疫共沉淀(Co-IP)实验,检测GnIH/RFRP-3与POMC的相互作用;余下60只建立卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠模型,模型组随机分成注射GnIH实验组和生理盐水对照组,每组30只,每组根据注射时间不同分为20、40、60、120、240、360min等共6个亚组,每组5只,采用Western Blot法检测GnIH/RFRP-3处理对下丘脑POMC表达的影响.结果:免疫荧光多重标记结果显示,GnIH/RFRP-3与POMC共表达于大鼠下丘脑神经元;Co-IP结果证明,GnIH/RFRP-3与POMC存在相互作用;Western Blot结果表明,注射GnIH/RFRP-3后20 min组大鼠下丘脑POMC蛋白表达量显著高于对照组(P＜0.05),注射60、120、240、360 min实验组大鼠POMC蛋白表达量明显低于对照组(P＜0.05).与20 min实验组相比,60、120、240 min组蛋白表达量依次呈下降趋势,360 min组蛋白表达量有升高趋势但是仍然低于20 min组(P＜0.05).结论:GnIH/RFRP-3可直接作用于POMC神经元.
