体外环境下纤溶酶及不同载药量对纤维蛋白胶缓释作用影响

目的:考察纤溶酶及不同载药量对顺铂-纤维蛋白胶复合物在体外缓释作用的影响.方法:采用衍生-紫外分光光度法对顺铂-纤维蛋白胶复合物体外释放样本进行测定.观察纤溶酶对不同载药量纤维蛋白胶(fibrin glue,简称FG)的释放过程是否存在影响.结果:溶介为纤溶酶时早期(24h)药物释放相对较快,1h和24h时间点溶液中药物浓度存在差异(p＜0.05).结论:体外环境下纤溶酶对顺铂-纤维蛋白胶复合物( CDDP/FG)缓释过程早期存在影响.不同载药量对其缓释作用无影响.

BMP-2诱导MSCs修复无血运区半月板损伤的实验研究

目的:为探寻无血运区半月板损伤的治疗方式.方法:选用健康新西兰大白兔分成A、B两组,双膝内外侧半月板均用于实验,在其半月板体部统一造成无血运区纵行全层裂.A组(36膝)对每只双膝随机采取一侧于半月板损伤区注入纤维蛋白胶(FG组),另一侧为空白对照组(NT组),B组(36膝)对其双膝随机采取一侧于半月板损伤区注入纤维蛋白胶与骨髓间充质干细胞混合物(FM组),另一侧于膝关节半月板损伤区注入纤维蛋白胶+骨髓间充质干细胞+骨形态发生蛋白混合物(FMB组),对半月板损伤区的修复情况行大体观察,结果:FMB组术后,缺损区修复组织与周围组织融合可,效果明显好于FG组及FM组,与NT组和FG组及12周时与FM组相比差异显著(P＜0.05).结论:纤维蛋白胶是骨髓间充质干细胞及骨形态发生蛋白的理想载体,以纤维蛋白胶为载体的FG+MSCs+BMP-2复合物可以有效的促进和改善无血运区半月板损伤的修复,从而为临床治疗无血运区半月板损伤提供一种新的方法.

纤维蛋白胶在骨科中的应用及前景展望

纤维蛋白胶又称纤维蛋白封闭系统或纤维蛋白黏合胶(fibrin sealant,FS/fibrin fibronectin sealing system,FFSS/fibrin glue,FG)是由纤维蛋白单体与凝血酶聚合而成的一种可降解的复合制剂,不仅具有封闭创面、止血、促进愈合、组织封闭、防止组织粘连、生物黏合等多种功能,因其生物相容性、可塑性、可降解性良好,无细胞毒性,制备方便,现已被广泛应用于开发各种组织工程支架和生长因子释放系统,成为近年来组织工程的主要研究方向之一.目前在骨科领域纤维蛋白胶除了局部止血、防止粘连和渗漏外主要是作为缓释载体,骨材料支架而发挥作用.

纤维蛋白胶对骨髓间充质干细胞黏附作用的影响

目的:探讨纤维蛋白胶(FG)对骨髓间充质干细胞(MSCs)黏附作用的影响,以提高组织工程骨(TEB)成骨能力.方法:将成骨诱导后人MSCs体外与同种异体的脱钙骨基质(DBM)复合构建组织工程骨,根据DBM中是否加入FG分为两组,A组加入FG,B组未加入FG.于构建后10 h计算细胞黏附率,24 h后用荧光显微镜观察MSCs在支架材料上的黏附情况,3 d、7 d用扫描电镜观察比较两组种支架材料的MSCs生长与增殖的差异.结果:体外构建10 h后,A组的细胞黏附率为(95.3±9.2)%,B组为(89.2±8.7)%,两者之间差异具有统计学意义(P＜0.05).24 h后荧光显微镜下见A组上黏附的细胞数量明显多,部分呈簇状和团状较均匀地密布;而B组细胞数量较少,呈散在非均匀分布.构建后3 d A组网孔间出现细胞外基质,至第7 d基质变得稠密;B组细胞外基质较少.结论:纤维蛋白胶与MSCs具有良好的组织相容性,能明显促进MSCs的黏附生长.

纤维蛋白胶包裹嗅神经鞘细胞促进脊髓轴突再生的实验研究

目的观察纤维蛋白胶(FG)包裹嗅神经鞘细胞(OECs)植于成年大鼠脊髓全横断断端间隙内对损伤轴突再生的促进作用.方法成年雄性SD大鼠16只,行脊髓T11节段全横断术.FG-OECs组于间隙内移植FG包裹的OECs,FG对照组移植等量的FG,OECs对照组移植等量DF12-OECs悬液,单纯全切对照组未做任何移植,每组动物4只.术后2周处死动物,脊髓损伤区冰冻水平切片,荧光显微镜下观察OECs的存活及迁移,并行抗神经丝(NF)和生长相关蛋白-43(GAP-43)抗体免疫组织化学染色.结果 OECs及单纯全切对照组脊髓两断端连接较差,而FG对照组及FG-OECs组两断端连接良好.FG、OECs及单纯全切对照组损伤区可见少量NF及GAP-43免疫反应纤维;FG-OECs组间隙内OECs大量存活,并迁移至两侧脊髓实质内,大量NF及GAP-43免疫反应纤维通过间隙.结论 FG包裹的OECs可在成年大鼠脊髓全横断断端间隙内存活并迁移至脊髓实质内,促进损伤轴突的再生.

激光心肌打孔隧道埋植bFGF缓释胶对急性缺血心肌血管生成及血流灌注的影响

目的:评价急性心肌缺血犬模型行激光打孔隧道埋植碱性成纤维细胞生长因子纤维蛋白胶对缺血心肌血管生成及血流灌注的影响.方法:18只健康杂种犬随机分成三组,即单纯冠脉结扎组(AMI组)、冠脉结扎加激光打孔组(TMLR组)和冠脉结扎加激光心肌打孔隧道埋植碱性成纤维细胞生长因子纤维蛋白胶组(bFGF组).所有实验犬均结扎左前降支中段造成急性心肌缺血模型,TMLR组和bFGF组在冠脉结扎后30 min于缺血区心肌行激光打孔(TMLR),bFGF组并于激光打孔的心肌隧道内埋植碱性成纤维生长因子纤维蛋白胶(bFGF-FG).术后2个月用冠脉血流显像检测缺血区心外膜表面冠脉侧支及心肌内血流,用免疫组化Ⅷ因子相关抗原染色定量缺血心肌内微血管密度及Ⅷ因子表达.结果:TMLR组及bFGF 组缺血打孔区冠脉侧支及心肌内血流的彩色信号面积及平均吸光度均大于AMI组,以bFGF组为显著(P均<0.01),且bFGF组的上述两项指标高于TMLR组(P均<0.05);TMLR组和bFGF组缺血打孔区心肌内微血管密度及Ⅷ因子相关抗原显色面积、平均吸光度均大于AMI组(P＜0.05或0.01),且bFGF 组三项指标高于TMLR组(P均<0.05).结论:激光心肌打孔隧道内埋植碱性成纤维细胞生长因子纤维蛋白胶,能够进一步促进缺血心肌内新生血管的生成,加强改善缺血心肌的血流灌注.

纤维蛋白胶干粉对兔肝创面的止血效果及应用剂量

目的观察纤维蛋白胶(FS)干粉对严重创伤创面的止血效果,并寻找佳有效剂量.方法在新西兰大白兔肝脏表面制作面积为1 cm2的圆形创面,应用不同剂量的FS干粉,通过出血时间和出血量检测,找出适宜的FS干粉剂量,同时与明胶海绵、甲壳素棉、普通纱布等的止血效果进行比较.结果 FS 10 mg/cm2组的止血时间和出血量与FS 8 mg/cm2组相比有显著性差异(P＜0.05),与FS 12 mg/cm2组无显著性差异.FS 10 mg/cm2组止血时间短,出血量少,与明胶海绵、甲壳素敷料和普通纱布有显著性差异(P＜0.05～0.01).结论 FS干粉的止血效果优于明胶海绵、甲壳素敷料以及普通纱布等,适剂量为10mg/cm2.

自体骨髓间充质干细胞移植与纤维蛋白胶复合骨形态发生蛋白体内成骨的比较研究

目的 比较纤维蛋白胶(FS)复合骨形态发生蛋白-2(BMP-2)与各种自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植骨折后体内成骨的效果.方法 20只日本大耳白兔行桡骨中段骨缺损造模.取第2代BMSCs进行成骨诱导.分别将BMSCs联合成骨诱导后的BMscs(A组)、成骨诱导的BMSCs(B组)、BMSCs(C组)、生理盐水(E组)经皮注入兔桡骨中段骨缺损处,FS复合BMP-2于造模手术中植入(D组).通过组织学、放射学、生物力学方法在不同时相比较骨缺损区修复情况.结果 A组在12周内骨缺损区新生骨的数量和质量与D组无显著性差异(P>0.05),但两组均优于B组(P<0.01)和C组(P<0.01),E组骨缺损主要由纤维结缔组织填充.结论 BMSCs联合成骨诱导后的BMSCs、FS复合BMP-2均具有理想的体内成骨能力;BMSCs与成骨诱导后的BMSCs联合移植可能存在协同效应,具有更强的成骨能力,可作为种子细胞应用于骨组织工程.

大网膜及纤维蛋白胶在结肠手术中的应用

目的 总结大网膜及纤维蛋白胶(FG)粘贴在结肠手术中的治疗效果.方法 回顾分析48例实行结肠手术的患者的临床资料,在吻合口吻合完毕后采取大网膜及纤维蛋白胶粘贴治疗.结果 结肠手术患者采用大网膜及纤维蛋白胶粘贴治疗降低了术后吻合口瘘的发生率.结论 结果表明,大网膜及FG的作用一定程度上减少了发生吻合口瘘的危险因素,促进了吻合口的生长.只要正确掌握手术适应证,采用该方法做结肠一期吻合,尤其对于急性梗阻患者,大大降低了术后吻合口瘘的发生率.

纤维蛋白胶在功能性鼻内窥镜手术中的应用

纤维蛋白胶是一种生物止血黏合剂,由纯化了的纤维蛋白原与凝血酶以及其它相关血清来源蛋白组成.由于其能够模拟生物止血过程,对于某些微毛细血管及组织渗血等效果明显;并且可以通过介导细胞与细胞、细胞与基质的相互作用促进细胞黏附与移动、细胞分化以及损伤修复,被广泛用于临床手术中[1,7].

纤维蛋白胶控制bFGF在激光心肌隧道内释放对急性缺血心肌重构的影响

目的评价纤维蛋白胶(FG)控制bFGF在激光心肌打孔隧道内释放对犬急性缺血心肌重构的影响.方法 18只健康杂种犬结扎左前降支中段造成急性缺血心肌模型,随机分成三组,即单纯冠脉结扎组(AMI组)、冠脉结扎加激光心肌打孔组(TMLR组)和冠脉结扎加激光心肌打孔隧道注入碱性成纤维细胞生长因子纤维蛋白胶组(bFGF组).术后2个月用超声和显微病理技术观察缺血心肌形态及结构的变化.结果左房室腔内径三个实验组之间无统计学差异(P>0.05).AMI组有2只犬、TMLR组有1只犬存在心尖部室壁瘤,bFGF组无室壁瘤现象.左室前壁及前室间隔厚度(TLVAW、TAIVS)在bFGF组、TMLR组和AMI组依次减小,其中bFGF组TLVAW与AMI和TMLR组之间的差异有显著性意义(P<0.05).AMI组缺血区存在大量的坏死心肌细胞,TMLR组部分心肌细胞变性坏死、部分结构正常,bFGF组大部分心肌细胞结构正常,小部分变性坏死.结论用FG控制bFGF在激光心肌打孔隧道内释放,能够减轻或阻止心肌缺血性损害以及缺血心肌的重构.

纤维蛋白胶在氩氦刀冷冻治疗肝癌中的止血作用

目的:探讨纤维蛋白胶(finbrin sealant,FS)在氩氦刀冷冻治疗(argon super-cryosurgery system,ASCS)肝癌时的止血作用.方法:将45例行术中ASCS治疗的肝癌患者随机分为对照组(用明胶海绵填塞)和治疗组(FS封闭),分别测定术后3、6、12、24、48 h腹腔引流液总量及相应时间点引流液中Hb含量.结果:全组无手术死亡病例.术后3、6、12、24、48 h腹腔引流液总量对照组与治疗组相比无显著性差异(141.9±99.8 vs 118.9±72.3、216.1±142.2 vs 172.1±74.2、254.3±145.7 vs 224.8±91.8、301.2±156.3 vs 273.8±101.6、349.6±202.2 vs 330.5±137.4 mL);相应时间点引流液中Hb含量两组相比具有显著性差异(50.7±17.4 vs 39.1±12.3g/L、49.9±13.8 vs 38.5±8.5g/L、45.1±12.6 vs 31.9±7.8 g/L、26.5±8.9 vs 14.1±5.0 g/L、11.0±3.9 vs 5.0±3.1 g/L,P＜0.05).结论:纤维蛋白胶有很好的止血功能,可作为ASCS治疗肝癌的创面止血材料.

纤维蛋白生物胶外周支持对大鼠颈静脉移植物的增殖和凋亡的影响

目的研究纤维蛋白胶血管外周支持对静脉移植物平滑肌细胞增殖、凋亡的影响.方法建立大鼠颈总动脉自体颈静脉移植模型,按照有无纤维蛋白胶血管外周支持,分为外周支持组、无外周支持组,每组24只.术后1周、2周、4周分别切除移植静脉,用免疫组织化学方法检测静脉移植物平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达,用原位DNA断裂位点3'-羟基末端标记(TUNEL)法检测静脉移植物平滑肌细胞凋亡的变化,以及检测内膜厚度.结果静脉移植术后1～4周,无外周支持组静脉移植物血管平滑肌细胞的凋亡和增殖均明显升高,内膜明显增厚;纤维蛋白胶血管外周支持组静脉移植物血管平滑肌细胞的凋亡和增殖同处于低水平,内膜增厚不明显.两组静脉移植物血管平滑肌细胞的凋亡和增殖具有显著相关性.结论纤维蛋白胶外周支持可以抑制血管平滑肌的增殖和凋亡,使两者同时处于低水平,一方面减少细胞凋不足所造成的对血管重塑造成的影响,另一方面使凋亡程度与巨噬细胞及正常血管平滑肌吞噬作用达到平衡,抑制了静脉移植物的内膜增生.

纤维蛋白胶外周支持对大鼠颈静脉移植物内膜增生的影响

目的:探讨可降解纤维蛋白胶血管外周支持对静脉移植物内膜增生的影响.方法:建立大鼠颈总动脉自体颈静脉移植模型,按照有无纤维蛋白胶血管外周支持,分为纤维蛋白胶血管外周支持组、无血管外周支持组,每组24只大鼠.术后1周、2周、4周分别切除移植静脉,计算机图像分析系统测量和计算内膜、中膜厚度,进行透射电镜检查,用免疫组织化学方法检测静脉移植物平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:纤维蛋白胶血管外周支持组静脉移植物术后1～4周内膜、中膜的厚度,明显低于无血管外周支持组(P<0.001).纤维蛋白胶血管外周支持组静脉移植物的PCNA指数也明显低于无血管外周支持组(P<0.01～0.001).透射电镜检查显示纤维蛋白胶血管外周支持组静脉移植物破坏程度轻于无血管外周支持组.结论:纤维蛋白胶血管外周支持可抑制血管内膜、中膜在移植术后的增生.

丝裂原活化蛋白激酶在人冠状动脉平滑肌细胞向三维纤维蛋白胶迁移中的作用

激光心肌孔道内控制释放bFGF对急性心肌梗死犬心脏功能的影响

目的探讨在激光打孔的心肌孔道内埋植控制释放碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的纤维蛋白胶(FG)对急性心肌梗死(AMI)犬整体心脏收缩与舒张功能的影响.

142 暂时性纤维蛋白胶闭塞主胰管以防胰腺切除后腹腔内并发症

缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的细胞相容性研究

目的 探讨缓释血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的细胞相容性.方法 将MC3T3-E1细胞分别接种缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架(实验组)、纳米珍珠层/聚乳酸支架(对照1组)和聚乳酸支架(对照2组),单纯细胞培养为空白对照组.倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞生长情况,MMT法检测细胞增殖功能,碱性磷酸酶(ALP)测定了解细胞成骨分化情况.结果 细胞在新型支架上粘附生长良好.各组MTT和ALP值随培养时间延长而增大,各时间点实验组均高于其他三组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架具有良好的细胞相容性,是一种理想的骨组织工程支架材料.

以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料对兔桡骨骨缺损修复的实验研究

目的了解以纤维蛋白胶(FS)为载体的注射型骨修复材料修复兔桡骨节段性骨缺损的能力,为其临床的应用提供实验依据.方法实验分组为:实验组b(FS+bFGF+牛BMP bBMP)、对照组b1(FS+bBMP)、实验组r(FS+bFGF+rhBMP-2)、对照组r1(FS+rhBMP)、对照组FS.于70只新西兰白兔右侧桡骨干处造成1.5 cm缺损,然后严密缝合皮下组织及皮肤,将各组材料经正常皮肤注射骨缺损处,术后不同时间进行放射学、组织学和骨密度等方法检查,对其成骨效应进行研究.结果在以bBMP为成骨因子的实验区中,实验组b骨缺损区在成骨活跃程度、骨密度和再生髓腔结构等方面均显著优于对照组b1,使骨缺损得到了较彻底的修复(P＜0.01);同样,在以rhBMP-2为成骨因子的实验区中,实验组r骨缺损区在成骨活跃程度、骨密度和再生髓腔结构等方面均显著优于对照组r1,使骨缺损得到了较彻底的修复(P＜0.01),对照组FS不能产生骨性愈合.结论以FS为载体复合BMP和bFGF的注射型骨修复材料具有高效的骨修复能力.

缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架生物安全性评价

目的 探讨缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的生物安全性,为临床应用提供理论依据.方法 采用支架材料浸取液进行急性毒性试验、皮内刺激试验以及热原实验,根据实验数据评价其安全性;同时采用皮下置入试验,观察其对周围组织的反应,对复合材料组织相容性进行评价.结果 该支架材料无毒性作用,不引起皮内刺激反应,不具有致热原作用;皮下置入试验术后病理组织学切片证实该材料置入兔体内后炎性细胞反应逐渐减轻,材料周围组织纤维囊壁逐渐变薄.结论 缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架具备良好的生物安全性和组织相容性,符合作为骨组织工程材料的基本条件.