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RP-HPLC测定枇杷叶中熊果酸和齐墩果酸的含量
目的:为控制和评价枇杷叶及其中药制剂的质量,建立RP-HPLC法测定枇杷叶中熊果酸和齐墩果酸含量的方法.方法:采用反相高效液相色谱法,在不同品牌碳十八柱上以不同流动相系统检测同一枇杷叶样品中熊果酸、齐墩果酸.结果:佳色谱条件为:采用Lichrospher C18(250mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,甲醇-水-冰醋酸三乙胺(90∶10∶0.03∶0.06)为流动相,流速0.8 mL/min,检测波长215nm,熊果酸、齐墩果酸能达到基线分离(Rs＞1.65),两者在0.4 μg～4.0μg范围内呈良好的线形关系.结论:本方法简便、准确、重现性好,可为建立枇杷叶及其中药制剂的质量标准提供参考.
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"黄枇烟"吸入抑制肺癌小鼠肿瘤生长及其对HIF-1α、VEGF mRNA表达的影响
目的:观察"黄枇烟"吸入对肺癌小鼠抑瘤率、去氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及其上游基因mRNA表达的影响.方法:建立小鼠肺癌模型,随机分为模型组、顺铂组和黄枇烟低、高剂量组,每组10只,各组分别予相应药物或生理盐水雾化.治疗后计算各组抑瘤率,免疫印迹法(Western blotting)检测肿瘤组织HIF-1α、VEGF的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测上游基因mRNA表达.结果:黄枇烟低、高剂量组和顺铂组小鼠瘤重明显低于模型组(P<0.05,P<0.01),顺铂组小鼠瘤重明显低于黄枇烟低、高剂量组.与模型组比较,黄枇烟高剂量组和顺铂组小鼠肿瘤组织HIF-1α、VEGF蛋白及其上游基因mRNA的表达均明显降低,以顺铂组作用明显.结论:"黄枇烟"吸入可抑制肺癌小鼠肿瘤生长,其作用机制可能为下调HIF-1α、VEGF蛋白及其上游基因mRNA的表达,继而抑制肿瘤血管生成而发挥抗肿瘤效应.
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中药雾化吸入治疗慢性咽炎
1治疗方法枇杷叶、玄参、麦冬各30g经精制加工,配成100ml瓶装灭菌药水.取药水20ml置于超声雾化器药杯内,以超声雾化器发出的超声波的声能,将药液化成气雾状,通过导管将中药气雾直接喷洒于患者咽部.每日1次,每次15～20分钟.1周为1疗程,一般连续治疗1～3个疗程.
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枇杷叶三萜酸降血糖活性实验研究
以格列齐特和盐酸二甲双胍为阳性对照药物,研究枇杷叶三萜酸提取物对正常小鼠空腹血糖值的影响、对正常小鼠经口葡萄糖和淀粉耐受的影响以及对糖尿病小鼠血糖的影响.结果与格列齐特相比(100 mg/kg),枇杷叶三萜酸提取物对正常小鼠的空腹血糖无明显影响(P＞0.05)；与格列齐特(100 mg/kg)相比,枇杷叶三萜酸提取物对四氧嘧啶所致高血糖模型小鼠的血糖值的抑制效果不明显(P＞0.05)；枇杷叶三帖酸粗提物(CTAL,400 mg/kg)对正常小鼠空腹灌胃葡萄糖后的血糖上升有明显的抑制作用(P＜0.01),抑制效果与盐酸二甲双胍(100 mg/kg)相当,而枇杷叶科罗索酸(CAL)对此抑制活性不明显(P＞0.05)；枇杷叶三帖酸粗提物(CTAL,400 mg/kg)对正常小鼠空腹灌胃淀粉后的血糖上升有较强的抑制作用(P＜0.01),抑制效果强于盐酸二甲双胍( 100 mg/kg),而枇杷叶科罗索酸(CAL,400 mg/kg和100 mg/kg)也显示较好抑制作用(P＜0.05).枇杷叶提取物体现出较好的控制餐后血糖的活性且不对正常机体的血糖值造成影响,具有开发成减肥产品或相关药物的良好的前景.
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又到枇杷上市时
枇杷与大多数果树不同,在秋天或初冬开花,果子在春天至初夏成熟,比其他水果都早,被称为“果木中独备四时之气者”.枇杷因果实形似琵琶而得名,略带酸味,清香鲜甜.枇杷在我国陕西、甘肃、江苏、安徽、浙江、福建等省区均有产,虽然各地的品种口味会有所不同,但各有滋味,营养丰富,还有不少药用价值.除了枇杷果,枇杷花、枇杷叶、枇杷根都对健康有益,可以说枇杷一身是宝.
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加味泻心汤治疗痤疮38例
近年来,笔者临床采用加味泻心汤治疗痤疮患者38例,结果12例痊愈(皮损消失,或仅留少许色素沉着),8例显效(皮损大部分消退),15例有效(皮损部分消退),3例无效.所用基本方药:大黄、黄连各5～10g,焦山栀5～15g,黄芩、枇杷叶、桑叶、桑白皮、丹皮、赤芍、紫草各10g,连翘12g,白芷3～6g,丹参30g.
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天竹兜铃汤治疗百日咳50例
近年来，笔者根据钱育寿老中医的经验，运用天竹兜铃汤治疗小儿百日咳50例，均获痊愈，其中用药2～6周治愈者49例，用药8周治愈1例。其法：取炙桑皮、南天竹、射干、地骨皮、炙百部、大贝母、金沸草、葶苈子各10g，炙兜铃5g，生甘草3g，黛蛤散(包)15g，鱼腥草30g。加减：鼻衄加鲜茅根30g，炙侧柏叶10g；痉咳频频加炙全蝎3g，炙僵蚕10g；呕吐频作，影响进食，加代赭石、紫石英各15g，枇杷叶10g；两目红肿加龙胆草10g；大便干结加全瓜蒌15g。日1剂，水煎分服。百日咳又称“顿咳”，中医认为其病因乃外感时行疠气，侵入肺经，夹痰交阻气道，以致肺失清肃，肝火偏旺。其治重在清肺热、泄肝火、止咳化痰。天竹兜铃汤的组方正禀此义，故而每获佳效。
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枇杷叶总黄酮的纯化工艺及抗氧化活性研究
目的 优选枇杷叶总黄酮分离纯化的工艺条件,考察枇杷叶总黄酮抗氧化活性.方法 考察不同型号大孔树脂吸附洗脱能力,及大孔树脂、聚酰胺、硅胶对枇杷叶总黄酮的纯化能力,选择佳分离纯化工艺,并采用ABTS自由基清除试验对黄酮提取物进行抗氧化活性评价.结果 D101树脂对枇杷叶总黄酮的吸附性能好,佳纯化工艺为D101树脂每1 g上样相当于1.5 g原药材样液,水、10％乙醇、40％乙醇、90％乙醇分别洗脱,洗脱流速为80 mL·h-1(12 BV·h-1),收集40％乙醇部分经D101大孔树脂同样条件二次洗脱,收集40％乙醇洗脱液得总黄酮提取物.提取物对ABTS自由基有较好的清除作用.结论 D101大孔树脂重复吸附是分离纯化枇杷叶总黄酮的理想方法.枇杷叶总黄酮具有良好的抗氧化活性.
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福建道地药材枇杷叶ISSR反应体系的建立与优化
目的 建立适于福建产枇杷叶的ISSR分析的PCR反应体系,筛选适宜引物,并确定佳退火温度.方法 改良的CTAB法提取嫩叶中DNA,通过单因子实验分别找出合适的ISSR-PCR反应条件,利用梯度PCR确定引物佳退火温度.结果 适于枇杷叶ISSR佳的反应体系为:总反应体积为25μL,其中模板DNA 60 ng,Taq DNA聚合酶0.9 U,引物浓度0.4μmol·L-1,dNTP浓度200 μmol.L-1,10×Buffe(含Mg2+) 2.5 μL,加入灭菌去离子水至25 μL.扩增程序为:预变性94℃7 min,变性94℃1min,复性佳退火温度1min,延伸72℃1 min,35个循环,72℃延伸10 min.在100条引物中筛选出14条扩增条带清晰且条带数目较多的引物,佳退火温度为48～58℃(因引物不同而异).结论 建立了枇杷叶ISSR佳反应体系,筛选出14条引物并确定了佳退火温度,为应用ISSR技术鉴定枇杷叶的种质资源和遗传多样性研究奠定了基础.
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枇杷叶中熊果酸的超声提取研究
目的 用超声波辅助提取法考察不同处理方法对熊果酸的提取效果.方法 将枇杷叶及不同方法处理后的药渣,以乙醇为介质,用超声波辅助提取;同时用HPLC测定提取液中熊果酸的含量.结果 枇杷叶中熊果酸的含量为0.9%以上,不同方法处理后的药渣中熊果酸均有不同程度的残留.结论 熊果酸在水和油中几乎不溶;乙醇回流法的提取效果欠理想,增加提取次数,其得率无明显提高;枇杷叶中的熊果酸主要以游离形式存在.
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川贝母-枇杷叶配伍对枇杷叶中3种黄酮成分血浆药动学的影响
目的 通过高效液相色谱-串联质谱法(LG-MS/MS)方法,探讨川贝与蜜炙枇杷叶配伍后,枇杷叶中芦丁、槲皮素和山柰酚的药动学变化.方法 血浆样品经固相萃取处理.色谱柱为Waters XTerra MS C18柱(150 mm×2.1 mm,3.5 μm);流动相为乙腈-0.1％甲酸溶液;质谱采用电喷雾离子源,负离子模式(ESIˉ),多反应监测模式(MRM)进行定量.大鼠随机分2组,分别灌胃单味枇杷叶和药对川贝-枇杷叶水煎液,测定药动学参数.结果 待测物线性关系良好(r2≥0.998),精密度、准确度、基质效应和提取回收率满足定量要求.与单药组相比,药对组中芦丁、槲皮素和山柰酚的Cmax和AUC0-t均下降,t1/2推迟.结论 川贝与枇杷叶配伍后,降低了芦丁、槲皮素和山柰酚的大血药浓度,减慢了消除率,延长了它们在体内的驻留时间.
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枇杷叶中黄酮类化学成分的HPLC-MSn分析
目的 检测枇杷叶中的黄酮类化学成分.方法 高效液相色谱与多级质谱联用法(HPLC-MSn).结果 初步鉴定了11个黄酮类、1个多酚类及1个单萜苷类物质,其中1个黄酮苷类成分为首次在枇杷叶中发现结论 HPLC-MSn可以迅速鉴定黄酮类化合物.
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白沙枇杷叶、枇杷花三萜酸类和黄酮类含量的比较
目的 比较白沙枇杷叶、枇杷花主要功效成分熊果酸、齐墩果酸及总黄酮含量.方法 采用HPLC法同时测定了枇杷叶和枇杷花中熊果酸和齐墩酸的含量;采用紫外可见分光光度法测定了枇杷叶和枇杷花总黄酮含量.结果 白沙枇杷叶熊果酸含量为10.43 mg·g-1,齐墩果酸含量为2.71 mg·g-1,白沙枇杷花熊果酸含量2.87 mg·g-1,齐墩果酸含量为0.44 mg· g-1,白沙枇杷叶中三萜酸类含量明显高于枇杷花.白沙枇杷叶的总黄酮含量也高于枇杷花,两者分别为61.5 mg·g-1和38.7 mg·g-1.结论 白沙枇杷叶的三萜酸类及总黄酮含量高于枇杷花.
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丝裂原活化蛋白激酶通路对慢支大鼠肺泡巨噬细胞产生TNF-α的影响及枇杷叶三萜酸的作用机制
目的 探究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路对慢性支气管炎(CB)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)生成的影响及枇杷叶三萜酸(TAL)的作用环节.为TAL治疗慢支的抗炎作用机制提供进一步的实验依据.方法 以AM为实验平台分别给予MAPK 3条通路(ERK,p38,JNK)的特异性阻滞剂,用RT-PCR和Western blot的方法 来分别检测CB大鼠AM中TNF-α的mRNA及蛋白的表达水平.并采用析因实验设计,ELISA法检测AM培养上清中的TNF-α的水平.结果 RT-PCR和Western blot的结果 均显示ERK特异性阻滞剂(PD98059)和p38特异性阻滞剂(SB203580)对CB大鼠AM中TNF-α的表达有明显的抑制作用.析因分析结果 表明TAL、特异性阻滞剂(PD98059和SB203580)及其交互作用项对TNF-α含量的影响存在统计学意义.结论 TAL对TNF-α的抑制作用可能与其作用于ERK和p38通路有关,这可能是TAL治疗与防治慢支的主要作用环节之一.
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枇杷叶三萜酸对慢性支气管炎大鼠肺泡巨噬细胞一氧化氮合酶及一氧化氮表达的影响
目的 观察枇杷叶三萜酸(TAL)对慢性支气管炎(CB)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)一氧化氮合酶(iNOS)和一氧化氮(NO)生成的影响,探讨其对慢性支气管炎抗炎作用的部分机制.方法应用卡介苗联用LPS的方法复制大鼠CB模型,观察TAL对CB大鼠AM iNOS表达、活性及NO释放的影响.结果 在卡介苗联用LPS诱导大鼠CB模型中,TAL能降低AM iNOS的mRNA及蛋白的表达,并且抑制NO的释放.结论 TAL抑制CB大鼠AM iNOS的表达及其活性,从而减少NO的释放可能是其对慢支的治疗与防治作用机制之一.
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咳速停胶囊中5味药材成分的薄层色谱鉴别
目的：为完善咳速停胶囊现有质量标准项下的薄层鉴别，对咳速停胶囊中枇杷叶、麻黄、罂粟壳、百尾参、虎耳草5味药材进行薄层色谱鉴别（TLC）研究。方法采用 TLC 法分别对5味药材进行鉴别。结果所建立的方法专属性较强，各色谱斑点清晰且分离度良好，阴性均无干扰。结论TLC 可适用于咳速停胶囊中5味药材的薄层鉴别。
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枇杷止咳颗粒中枇杷叶、薄荷脑和罂粟壳薄层鉴别的研究
目的 通过对枇杷止咳颗粒中枇杷叶、薄荷脑和罂粟壳薄层鉴别条件的研究,建立该制剂中这三味中药的鉴别方法,完善枇杷止咳颗粒质量控制.方法采用薄层色谱(TLC)方法对制剂中的枇杷叶、薄荷脑和罂粟壳进行鉴别试验.结果TLC法能鉴别出枇杷止咳颗粒中枇杷叶、薄荷脑和罂粟壳.结论该法简便可行,专属性强,阴性无干扰,重现性好,能为枇杷止咳颗粒的质量评价提供科学依据.
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中药枇杷叶采收期调查研究
通过市场调查发现,市场枇杷叶有青叶和黄叶两种类型,且以黄叶为主体.梳理历代本草表明,枇杷叶以4月采质重者为佳;而从上世纪初至今,青叶和黄叶两种类型均作中药枇杷叶使用,并以捡拾地上的黄叶质量为佳.产地调查发现,枇杷叶采收时间完全取决于其整枝修剪时间,现今5月至10月均有采收.
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正交试验优化枇杷叶中总三萜酸的醇提工艺
目的 优化枇杷叶中总三萜酸的提取工艺.方法 用正交试验法优选提取工艺,采用分光光度法测定枇杷叶中总三萜酸的含量.结果 枇杷叶中总三萜酸的佳提取条件是用30倍量95%乙醇超声提取3次,佳提取时间为30 min,方差分析结果表明乙醇浓度对结果的影响为明显(P＜0.05).结论 该优化工艺稳定可行,总三萜酸提取率高.
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高效液相色谱法测定枇杷叶中苦杏仁苷含量
目的建立枇杷叶中苦杏仁苷含量测定方法.方法色谱柱KROMASILC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈∶水(10∶60),流速为0.8ml*min-1,检测波长240nm.结果苦杏仁苷在0.302～3.02μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=23542.1X-56.7(r=0.9997),重复性RSD=2.2%,平均回收率100.74%,RSD=2.3%.结论可用于枇杷叶药材质量控制.
