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尿液纤维连接蛋白糖链结构在膀胱癌患者中的变化及意义
目的寻求诊断膀胱癌的检测新方法.方法收集8例膀胱癌患者术前和术后3个月(正常)尿液标本16份,提纯纤维连接蛋白(Fn),辣根过氧化物酶(HRP)标记的凝集素作探针,连接到已固定在膜上的Fn糖链,检测已结合的HRP代表Fn糖链与凝集素的结合力,增强化学发光法(ECL)检测已结合HRP的结合力.高效液相(HPLC)和荧光标记底物测定膀胱癌和癌旁正常组织N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(GnT)活力.结果用伴刀豆球蛋白凝集素(ConA)-HRP作探针时,膀胱癌尿液Fn结合力仅为正常膀胱尿液Fn的0.18,而用蔓陀罗凝集素(DSA)-HRP和麦胚凝集素(WGA)-HRP作探针时,膀胱癌组的结合力为正常组的3.34倍和3.26倍.膀胱癌患者尿液中Fn N-糖链的天线数和平分型GlcNAc结构都升高.尿Fn与WGA的结合力与病理分期、分级相关.膀胱癌组织GnT-Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ的酶活力比癌旁正常组织分别增加34.0、18.1和1.6倍.结论凝集素-HRP检测分析尿液Fn的N-糖链结构改变有可能是一种简单和精确诊断膀胱癌的方法.
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胰腺癌患者术后血清N-糖链结构变化意义的分析
目的：研究胰腺癌患者血清特征性N-糖链结构变化规律，期望找到胰腺癌特异性血清标志物。方法选取2011年6月至2013年12月在哈尔滨医科大学附属第三医院就诊的胰腺癌患者，将检测对象分成胰腺癌患者术前血清组（123例）与术后血清组（78例）。选取体检中心收集的健康人群血清样本271例作为健康人血清组。应用基于DNA测序仪的荧光糖电泳（DSA-FACE）技术比较分析3组血清中N-糖链的变化。计量资料以均数±标准差（x ±s）表示，2组间比较采用成组t检验。结果通过对血清N-糖链的DSA-FACE分析，确定了胰腺癌患者血清N-糖链谱图，在此基础上比较分析胰腺癌患者术前、术后血清与健康人血清的N-糖链变化。糖峰8在胰腺癌患者术前组显著低于健康人群组（t＝2．735，P＜0．05）及术后组（P＜0．05），而术后组与健康组差异无统计学意义。结论糖峰8可以成为辅助的胰腺癌诊断标志糖链。
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肝癌早期筛查肿瘤标记物研究进展
肝癌的早期筛查和术后复发的监测仍是临床工作中的难点,虽然已经有甲胎蛋白、CA19-9、AFU、GGT、人端粒酶反转录酶mRNA、热休克蛋白等肿瘤标记物在临床上广泛应用,但是每种肿瘤标记物都存在一定弊端,特异性不强,往往需要联合检测才能提高诊断的准确性.糖生物学中的异常糖基化被认为与肿瘤的发生发展有密切关系,因此研究异常糖基化成为近年来的研究热点.N-糖链是异常糖基化的一种,检测特异性的N-糖链有望成为筛查及监测肝癌患者变化的动态指标.
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全反式维甲酸和佛波酯对HL-60细胞表面N-糖链结构的影响
目的:研究肿瘤细胞分化时细胞膜上糖链结构的改变.方法:通过蛋白酶消化提取细胞表面3H标记N-糖链,结合外切糖苷酶处理,经序列凝集素亲和层析分析HL-60细胞诱导分化后细胞表面N-糖链结构.结果:全反式维甲酸(ATRA)和佛波醇-12-豆蔻酰-13-乙酸酯(PMA)均引起HL-60细胞二天线复杂型和高甘露糖型糖链升高,多天线复杂型糖链减少.但对平分型β-N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)糖基的影响却相反,ATRA使之减低,而PMA则促进合成.结论:在分化过程中,HL-60细胞表面N-糖链从高分支向低分支的转变,可能是某些肿瘤分化的一个特征.平分型GlcNAc可能与细胞的粘附有关.
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N-糖链抑制剂对高糖刺激鼠肾系膜细胞粘着斑激酶表达及透明质酸分泌的影响
目的:观察N-糖链抑制剂衣霉素(TM)和1-deoxymannojirimycin(DMM)对高糖刺激肾小球系膜细胞(GMC)增生、粘着斑激酶(FAK)表达及透明质酸(HA)分泌的影响.方法:体外培养大鼠GMC,分为七组:正常组,高糖组,甘露醇组,高糖加衣霉素组,高糖加DMM组,并设TM、DMM对照组.采用四唑盐比色(MTT)法测定细胞增生,免疫组织化学方法测定粘着斑激酶(FAK),放射免疫法测定透明质酸(HA)含量.结果:高糖可诱导GMC增生、增加FAK表达及HA分泌.相对于正常培养条件下生长的GMC,N-糖链抑制剂TM和DMM对高糖作用条件下的GMC增生、FAK活性及HA分泌有更为明显的抑制作用.结论:N-糖链抑制剂TM和DMM可通过阻断糖链的合成和改变糖链类型抑制高糖诱导的细胞增生、FAK活性及HA分泌的作用.
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胰腺癌相关特异性N-糖链的研究现状及进展
胰腺癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤,5年生存率低于4％.而胰腺癌特异性标志物对肿瘤患者的筛选、诊断术后复发及转移的监测都有着重要作用,且研究胰腺癌患者血清及组织中特异性N-糖链结构及功能的变化成为国内外研究的热门.因此本研究从糖基化与肿瘤的生物学行为、N-糖链与恶性肿瘤的关系、胰腺癌相关的特异性N-糖链的实验技术及临床研究等方面的研究现状及进展进行了综述.
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肾小球系膜细胞中β1整合素表达及细胞凋亡与N-糖链抑制剂关系的研究
目的观察N-糖链抑制剂衣霉素(TM)对肾小球系膜细胞(GMC)增殖、凋亡的影响以及β1整合素和cyclin D1表达在细胞凋亡以及细胞增殖中的作用.方法体外培养的大鼠GMC分四组:正常对照组,0.5、1.0和2.0μg/mL衣霉素组.采用流式细胞技术测定β1整合素水平和细胞凋亡率,细胞免疫化学方法测定cyclin D1表达,MTT法测定细胞增殖能力.结果TM作用以后,细胞β1整合素水平降低,细胞凋亡率增加,同时细胞周期正调控蛋白cyclin D1表达下降,增殖能力降低,这种作用呈剂量依赖性.结论N-糖链抑制剂TM通过抑制β1整合素的表达,影响细胞的粘附而导致细胞凋亡,并影响细胞周期正调控蛋白cyclin D1表达,使细胞增殖能力受抑,这种作用呈剂量依赖性.
