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尿液纤维连接蛋白糖链结构在膀胱癌患者中的变化及意义
目的寻求诊断膀胱癌的检测新方法.方法收集8例膀胱癌患者术前和术后3个月(正常)尿液标本16份,提纯纤维连接蛋白(Fn),辣根过氧化物酶(HRP)标记的凝集素作探针,连接到已固定在膜上的Fn糖链,检测已结合的HRP代表Fn糖链与凝集素的结合力,增强化学发光法(ECL)检测已结合HRP的结合力.高效液相(HPLC)和荧光标记底物测定膀胱癌和癌旁正常组织N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(GnT)活力.结果用伴刀豆球蛋白凝集素(ConA)-HRP作探针时,膀胱癌尿液Fn结合力仅为正常膀胱尿液Fn的0.18,而用蔓陀罗凝集素(DSA)-HRP和麦胚凝集素(WGA)-HRP作探针时,膀胱癌组的结合力为正常组的3.34倍和3.26倍.膀胱癌患者尿液中Fn N-糖链的天线数和平分型GlcNAc结构都升高.尿Fn与WGA的结合力与病理分期、分级相关.膀胱癌组织GnT-Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ的酶活力比癌旁正常组织分别增加34.0、18.1和1.6倍.结论凝集素-HRP检测分析尿液Fn的N-糖链结构改变有可能是一种简单和精确诊断膀胱癌的方法.
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前列腺增生和前列腺癌患者血、尿中PSA糖链结构的改变及意义
目的 探索前列腺癌的早期诊断和鉴别诊断的新依据.方法 收集前列腺增生和前列腺癌患者空腹第一次晨尿和血标本各90份和30份,随机分为3组,用PSA抗体亲和层析柱提纯尿液和血液中的PSA,用辣根过氧化物酶(HRP)标记的凝集素SNA(sambucus nigra agglutinin)做探针,连接到己固定在膜上纯化的PSA的糖链,检测已结合的HRP来代表PSA糖链与凝集素的结合力,用增强化学发光法(ECL)检测已结合的HRP的结合力,其数值用发光单位(LLU)来表示.结果 用HRP标记的凝集素SNA-HRP作探针检测前列腺癌和前列腺增生血中PSA时,前列腺癌血中平均LLU仅为前列腺增生血中PSA的18.3%,与SNA-HRP的结合力两者之间有明显差异(P<0.001);而在尿液中两者无明显差异(P>0.05).说明前列腺癌血中PSA糖链结构中唾液酸残基表达较前列腺增生明显减少.结论 前列腺癌患者血中PSA糖链结构与前列腺增生相比发生改变,其中糖链结构中唾液酸残基表达的改变可能为今后前列腺癌的早期诊断和鉴别诊断提供新的依据.
