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白细胞介素-18结合蛋白联合骨髓来源间充质干细胞治疗肝纤维化的实验研究
目的:观察骨髓来源间充质干细胞(MSC)与白细胞介素-18结合蛋白(IL-18BP)联合治疗肝硬化大鼠的疗效.方法:由大鼠胫骨及股骨骨髓腔分离培养MSC,鉴定后制备成1×107/ml的细胞悬液.40只大鼠随机分为4组:正常对照组、肝硬化模型组、MSC治疗组和MSC+IL-18BP治疗组.正常对照组不制模,其余3组采用四氯化碳(40 ml/L)0.2 ml/100 g腹腔注射、每周2次、连续6周诱导大鼠肝硬化模型.MSC治疗组于制模后6周尾静脉注射MSCs 300 μl;MSC+IL-18BP组在给予MSCs的同时腹腔注射IL-18BP 0.5 mg/kg;正常对照组和肝硬化模型组于相同时间给予等量磷酸盐缓冲液腹腔注射.4周后各组动物眼眶静脉取血检测血清白蛋白和丙氨酸转氨酶(ALT)水平;处死取肝组织,HE染色,光学显微镜下进行病理学观察及肝纤维化分级;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织匀浆中I型胶原蛋白基因的表达量.结果:病理学观察显示肝硬化模型组肝纤维化明显,与正常对照组比较,血清白蛋白水平明显下降,ALT明显上升,Ⅰ型胶原蛋白基因表达明显增强(P<0.05). MSC治疗组和MSC+IL-18BP治疗组纤维化程度均减轻, ALT和血清白蛋白水平明显改善,I型胶原蛋白基因表达明显下降,且MSC+IL-18BP治疗组比MSC治疗组各指标改善更加明显(P<0.05).结论: MSC联合IL-18BP治疗肝硬化较单纯MSC治疗效果更加明显,能更有效地减轻肝纤维化.
关键词： 肝硬化 干细胞治疗 白细胞介素-18结合蛋白 移植 -
类风湿性关节炎患者血清和滑液IL-18及IL-18结合蛋白的水平及意义
目的研究类风湿性关节炎(RA)患者血清、滑液中白细胞介素-18(IL-18)及IL-18结合蛋白(IL-18BP)的水平,探讨他们在RA致病中的作用.方法应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)和生物学方法分别测定RA患者血清、滑液中IL-18及IL-18BP水平和生物活性,同时采用硝酸酶还原法及竞争ELISA分别检测一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)的含量.以因外伤截肢者作对照.结果 RA患者血清、滑液中IL-18水平和生物活性均显著高于对照组,且滑液中量及活性比血清中高;而IL-18BP水平RA患者明显低于对照组.结论 IL-18的过度表达以及IL-18BP表达的相对不足,可能是RA发病的机制之一;选择抑制过度表达的IL-18生物活性,及增加IL-18BP的表达,将是RA治疗的新途径.
关键词： 白细胞介素-18 白细胞介素-18结合蛋白 类风湿性关节炎 -
人IL-18结合蛋白cDNA的克隆及其逆转录病毒载体的构建
目的克隆人白细胞介素-18结合蛋白(hIL-18BP)的cDNA及构建hIL-18BP逆转录病毒载体,以研究IL-18BP与IL-18相互作用的机制及自身免疫性疾病的基因治疗.方法从中国汉族人胎盘组织中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增hIL-18BP cDNA,与载体pcDNA3连接,转化大肠杆菌DH5α.得到的重组质粒经鉴定正确后,再作为模板进行PCR.PCR产物插入逆转录病毒载体pLNCX中.结果 RT-PCR扩增出全长585 bp的hIL-18BP cDNA,2次酶切鉴定证明hIL-18BP已分别与pcDNA3、pLNCX重组.2次测序结果均与国外文献报道的hIL-18BP的序列一致.结论成功地克隆了中国人IL-18BP cDNA,并构建了重组hIL-18BP逆转录病毒载体.
关键词： 白细胞介素-18结合蛋白 克隆 逆转录病毒载体 -
原发性肝癌患者血清IL-6、IL-18和IL-18BP检测的意义
目的：探索血清白介素-6（IL-6）、血清白介素-18（IL-18）和IL-18结合蛋白（IL-18BP）联合检测在原发性肝癌（PLC）患者诊断、临床分期和临床治疗中的应用价值。方法选择2013年1月～2014年6月入院治疗的43例PLC患者（包括I期12例、II期16例和III期15例）、24例良性肝肿瘤患者、23例肝硬化患者和23例健康体检者，采用ELISA法检测血清IL-6、IL-18和IL-18BP水平。结果 PLC患者血清IL-6水平为(144.4±7.8） pg/ml，显著高于正常人[（41.9±4.5）pg/ml，P＜0.05]、肝硬化患者[（67.8±5.3）pg/ml，P＜0.05]和良性肝肿瘤患者[（72.0±5.8）pg/ml，P＜0.05]；PLC患者血清IL-18水平为(47.7±4.8）pg/ml，显著低于正常人[（80.8±5.7）pg/ml，P＜0.05]、肝硬化患者[（107.8±6.8）pg/ml，P＜0.05]和良性肝肿瘤患者[（120.0±7.5）pg/ml，P＜0.05]；PLC患者血清IL-18BP水平为(235.7±13.7）pg/ml，显著高于正常人[（76.5±7.4）pg/ml，P＜0.05]、肝硬化患者[（147.848.5） pg/ml，P＜0.05]和良性肝肿瘤患者[（163.4±11.0）pg/ml，P＜0.05]；III期PLC患者IL-6水平显著高于II期和I期（P＜0.05），III期PLC患者IL-18水平显著低于II期和I期（P＜0.0），III期PLC患者血清IL-18BP水平显著高于II期和I期（P＜0.05）；PLC患者手术后IL-6和IL-18BP水平降低，IL-18水平升高（P＜0.05）。结论血清IL-6、IL-18和IL-18BP联合检测在原发性肝癌诊断、分期及临床治疗中的应用价值较高。
关键词： 原发性肝癌 白细胞介素-6 白下表介素-18 白细胞介素-18结合蛋白 -
慢性乙型肝炎患者血清IL-18和IL-18BP水平的变化及意义
目的 探讨血白细胞介素-18 (ILq8)和白细胞介素-18结合蛋白(IL-18BP)水平在慢性乙型肝炎患者中的变化及临床意义.方法 分别应用酶联免疫吸附法和速率法检测100例慢性乙型肝炎患者血清IL-18、IL-18BP和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,应用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV) DNA载量,并以100例正常健康体检者作对照.结果 与正常对照组相比,慢性乙型肝炎患者组血清IL-18、IL-18 BP、ALT和HBV DNA载量水平明显增高(P＜0.05);血清IL-18和IL-18BP、ALT和HBVDNA载量水平随着临床表现逐步加重逐步升高;血清IL-18水平与血清IL-18 BP、ALT和HBV DNA载量水平水平呈正相关(r=0.808,r=0.672,r =0.631,P均＜0.01),IL-18BP水平与ALT、HBV DNA载量水平水平亦呈明显正相关(r=0.717,r=0.683,P均＜0.01).结论 IL-18和IL-18BP共同参与慢性乙型肝炎免疫致病过程,且与肝脏炎症活动性、肝损害程度及预后密切相关.
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急性冠状动脉综合征患者血浆IL-18结合蛋白和IL-18水平变化及意义
目的:探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆白细胞介素(IL)-18结合蛋白和IL-18水平的变化.方法:连续入选稳定型心绞痛(SAP)组(50例),不稳定型心绞痛(UAP)组(75例)和急性心肌梗死(AM1)组(67例).同期冠状动脉(冠脉)造影正常的65例患者为对照组.采用夹心酶联免疫法(ELISA)测定血浆IL-18结合蛋白和IL-18水平.结果:SAP组、UAP组和AMI组血浆IL-18和IL-18结合蛋白水平显著高于对照组,UAP组和AMI组血浆IL-18和IL-18结合蛋白水平显著高于SAP组.冠心病患者IL-18结合蛋白水平与IL-18、C反应蛋白(CRP)、左室舒张末期内径(LVEDD)正相关,与左室射血分数(LVEF)显著负相关.结论:血浆IL-18结合蛋白和IL-18水平变化可能与ACS的出现密切相关.
关键词： 急性冠状动脉综合征 白细胞介素-18结合蛋白 白细胞介素-18 炎症 -
HAART治疗对不同临床类型HIV-1感染者血清IL-18及IL-18BP水平的影响
目的:探讨高效抗逆转录病毒治疗(HAART)对不同临床类型HIV-l感染者血清白细胞介素-18(Interleukin 18,IL-18)和白细胞介素-18结合蛋白(Interleukin 18 binding protein,IL-18BP)水平的影响.方法:酶联免疫吸附法(ELISA)检测67例经12个月以上HAART治疗有效的HIV-1感染者及18例健康人的血清IL-18和IL-18BP水平.采用流式细胞术测定HIV-1感染者血液中CD4+、CD8+T细胞水平.结果:不同临床类型HIV-1感染者血清IL-18、IL-18BP水平均高于正常对照组(P＜0.05)；A类HIV-1感染组CD4/CD8比值高于B类、C类HIV-1感染组(P＜0.05,P=0.004,0.014).CD4+T细胞＜500的两组血清IL-18、IL-18BP水平均高于正常对照组(P＜0.05)；正常对照组血清IL-18和IL-18BP水平呈正相关(P＜ 0.01,r=0.705).结论:HAART治疗不能完全逆转HIV-1感染者免疫系统失衡,但艾滋病患者早期治疗可能降低机体免疫系统失衡的程度.
关键词： HIV-1 白细胞介素-18 白细胞介素-18结合蛋白 -
IL-18BP重组蛋白对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞的作用研究
目的 探讨人重组白细胞介素-18结合蛋白(rhIL-18BP)对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的内皮细胞炎症、凋亡的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用20 ng/ml的TNF-α和不同质量浓度的rhIL-18BP孵育相应时间,提取mRNA并用PCR及实时定量PCR检测细胞因子(IL-6、IL-8)、黏附分子(ICAM-1、VCAM-1)的mRNA表达；ELISA法检测细胞上清液中细胞因子(IL-6、IL-8)、可溶性黏附分子(sICAM-1、sVCAM-1)的蛋白含量；流式细胞术检测细胞凋亡的变化.结果 1)IL-18BP可以抑制TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞中炎症因子的表达；2) IL-18BP能抑制TNF-α诱导的HUVECs的凋亡.结论 rhIL-18BP对TNF-α诱导的内皮炎症反应有抑制作用,并可以抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡.
关键词： 白细胞介素-18结合蛋白 人脐静脉内皮细胞 炎症 凋亡 肿瘤坏死因子-α
