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叶酸对人宫颈癌细胞增殖抑制的作用及其与HPV16相互关系的研究
目的 探讨体外补充不同剂量叶酸对HPV阴性细胞C33A和HPV16阳性细胞CaSki的细胞增殖及凋亡的影响以及叶酸与HPV16的相互关系.方法 倒置显微镜下观察叶酸对两种细胞基本生长状态的改变及形态的变化；采用MTT法和流式细胞术观察不同浓度叶酸(0.1、1.0、10、50、100、500、1 000和2 000 μg/ml)对两种宫颈癌细胞的增殖抑制、细胞周期及凋亡情况；采用RT-PCR技术检测CaSki细胞中HPV16 E2/E6 mRNA的表达水平.结果 补充叶酸对C33A和CaSki细胞的增殖均有抑制作用,细胞形态发生改变,细胞数量明显减少.随着叶酸浓度的增加,对两种宫颈癌细胞的生长抑制率逐渐上升(C33A:r=0.948,P=0.010；CaSki:r=0.895,P =0.006),G0/G1期细胞比例逐渐增大,细胞凋亡率亦随之升高(C33A:r=0.989,P ＜0.001;CaSki:r=0.994,P＜0.001),呈现线性关系.但对C33A和CaSki两种细胞的增殖抑制及凋亡的影响程度无明显差异.当补充叶酸时,CaSki细胞HPV 16E2和E6基因mRNA的表达水平在对照组、叶酸缺乏组和叶酸实验组之间的差异无统计学意义.结论 补充叶酸可抑制宫颈癌细胞的增殖,促进凋亡；未发现在宫颈癌细胞中叶酸与HPV16存在交互作用.
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样品前处理对食物中叶酸测定的影响
叶酸结构上带有多谷氨酸残基,要准确测定食品中叶酸含量,必需采用适当的样品前处理方法对叶酸进行降解和提取.本文采用微生物法针对不同类食物讨论了磷酸缓冲液(0.05 mol/L,pH6.8)一次水解、二次水解、鸡胰酶水解、蛋白酶和/或淀粉酶水解以及3酶联合水解等方法对叶酸检出结果的影响.结果:强化剂类样品采用磷酸缓冲液一次水解;口服液采用鸡胰酶水解;蔬菜类样品采用磷酸缓冲液二次水解;含高蛋白和/或淀粉类样品采用3酶联合水解法,可得到叶酸大检测结果.对不同的样品选用相应的前处理方法,批内、批间测定的相对标准差分别为6.5%～9.9%和3.5%～14.1%,回收率为86.8%～106.8%.
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5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T位点突变与地方性砷中毒皮肤病变发生关系的研究
目的5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是叶酸代谢关键酶,旨在了解该酶基因C677T位点突变是否是地方性砷中毒皮肤病变发生的遗传易感因素.方法选择50名出现砷性皮肤病变居民作为皮肤病变组,以同地区饮水砷浓度相近的35名正常人作为对照,进行MTHFR基因C677T位点多态性分析(PCR-RFLP法)、血清叶酸测定(微生物法)和维生素B12测定(电化学发光法).结果皮肤病变组MTHFR基因C677T位点TT基因型占34.0%,T等位基因频率为56.0%.皮肤病变组和对照组基因型构成和等位基因频率差异无显著性.两组血清叶酸、VitB12水平差异均无显著性.以血清叶酸水平≥10.5nmol/L且CC基因型作为参照,其它组粗OR值和经Logistic回归分析控制性别、年龄、水砷浓度、吸烟后的校正OR值均大于1,但95%CI包含1.结论MTHFR基因C677T位点多态性与地方性砷中毒皮肤病变的发生无明显关联.
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叶酸拮抗乙酰水杨酸致大鼠卵黄囊毒性作用的研究
以全胚胎培养模型结合免疫组化和电镜技术等探讨了乙酰水杨酸和叶酸对大鼠卵黄囊及胚胎的影响.结果表明:培养基含乙酰水杨酸300μg/ml组的卵黄囊直径和胚胎体长均显著低于阴性对照组,胚胎畸形率明显增高.组织学检查发现卵黄囊厚度变薄.间质层血岛、微血管数量明显减少,血管壁细胞不连续,血管发育不良.卵黄囊内皮层细胞顶端微绒毛少见.内皮层细胞的溶酶体、内质网及核蛋白体等结构和数量均有明显改变.而60mg/kg叶酸灌胃鼠血清与乙酰水杨酸联合应用后,则卵黄囊的上述毒性作用明显减轻或消失,提示叶酸能明显拮抗乙酰水杨酸致大鼠卵黄囊的毒性作用.
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维生素A与维生素E增强叶酸防畸效果的研究
为观察维生素A与维生素E能否增强叶酸的防畸效果,采用环磷酰胺致大鼠胎鼠发育畸形作为动物模型,孕鼠在孕期分别补充叶酸和叶酸+维生素A+维生素E,观察其防畸效果.结果显示孕鼠不补充叶酸和维生素、单独补充叶酸和联合补充叶酸、维生素A和维生素E使胎鼠脑膨出率分别为87.27%、42.03%和30.08%(P<0.01).联合补充组与单独补充叶酸组相比,脑膨出率降低更为明显(P<0.05),上枕骨骨化程度明显提高(P <0.01),胎鼠平均体重增加(P<0.05).结果提示叶酸、维生素A、维生素E有明显促进胚胎发育及拮抗环磷酰胺的致畸作用,且叶酸与维生素A、维生素E联合应用的作用明显优于单独补充叶酸.
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血清同型半胱氨酸及叶酸水平与先天性心脏病的关系
目的了解先天性心脏病(CHD)患者及其父母血清同型半胱氨酸(Hcy)及叶酸水平与CHD发生的关系.方法以核心家庭为基础的病例-对照设计,在辽宁省选择CHD患者151人及其生物学父母作为病例组,另选取同地区无出生缺陷病史及家族史的98名正常人及其生物学父母作为相应对照.采用荧光免疫偏振法检测部分子代及其母亲的血清总Hcy(tHcy)水平,放射免疫法测定全部对象血清叶酸和维生素B12(VB12)水平.结果 CHD患者及其母亲血清tHcy水平与对照组相比无明显差异;两组血清叶酸水平及叶酸缺乏率(<7nmol/L)差异亦无显著性;与对照组相比,CHD患者血清VB12水平明显较高(315.36pmol/L和185.34pmol/L,P<0.05),VB12缺乏率(<150pmol/L)明显较低,CHD组父亲血清VB12缺乏率也低于相应对照.分类型分析显示室间隔缺损患者血清tHcy水平明显低于对照组,而VB12水平明显高于对照;动脉导管未闭组父母血清叶酸水平均高于相应对照(P<0.05).相关性分析表明亲代叶酸、VB12水平与子代呈明显正相关;病例组母亲tHcy水平与子代tHcy正相关,子代tHcy与叶酸水平负相关;对照组子代tHcy与VB12水平负相关(P<0.05).结论叶酸及VB12是影响血清Hcy水平的重要因素,呈明显负相关;本研究尚不能得出叶酸及Hcy与CHD相关的结论,有待进一步研究.
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叶酸对体外胎鼠神经干细胞增殖分化的影响
目的 探讨叶酸对体外培养的胚胎大鼠神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响.方法 采用无血清悬浮培养方法分离培养NSCs,光镜下观察不同时间点各组NSCs形态变化,并采用MTT法、生长曲线法检测叶酸对细胞增殖和功能的影响.培养6天后用含5%胎牛血清的培养基进行分化培养,于分化第7天用免疫荧光技术做Nestin/BrdU双标染色,共聚焦显微镜下观察,每组随机选择8个非重叠视野,计数做统计处理.结果 MTT结果显示,两叶酸干预组NSCs增殖较对照组快(P＜0.05),分化后免疫荧光双标试验中,两叶酸干预组NSCs增殖率高于正常对照组,且差异有显著性(P＜0.05).结论 叶酸可以在一定程度上增强NSCs的增殖能力,促进NSCs的生长与分化.
关键词： 叶酸 神经干细胞 体外 Nestin BrdU 细胞增殖 -
叶酸对脑梗塞大鼠神经细胞凋亡及Notch1 mRNA表达的影响
目的 研究叶酸(FA)对脑梗塞大鼠缺血侧脑组织内神经细胞凋亡及Notchl mRNA表达的影响.方法 雄性SD大鼠4g只按体重随机分为4组:假手术组(SO)、大脑中动脉梗塞组(MCAO)、MCAO+叶酸低剂量组(MCAO+LFA)、MCAO+叶酸高剂量组(MCAO+HFA).除SO组外,其他三组均采用线拴法制作大鼠大脑中动脉栓塞,各组于栓塞处理后第14天处死.补充叶酸前、补充28天后及栓塞处理后第14天,采用化学发光免疫法测定各组大鼠血清叶酸含量;建立MCAO后第14天,应用TUNEL法测定缺血例脑组织内神经细胞的凋亡,荧光原位杂交法检测神经细胞内Notch1 mRNA的表达.结果 补充叶酸后,与MCAO组相比,MCAO+LFA、MCAO+HFA组神经细胞凋亡率明显降低(P＜0.01),血清叶酸浓度及Notch1 mRNA的荧光强度值均明显升高(P＜0.01).结论 叶酸降低脑梗塞大鼠神经细胞凋亡率可能与其促进Notch1 mRNA的表达有关.
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维生素类联合干预在H型高血压患者治疗中的作用
目的 探讨维生素类联合干预在H型高血压患者治疗中的作用.方法 选择80例H型高血压患者为研究对象,随机分为对照组和干预组,各40例.对照组给予降压、阿司匹林及他汀类等基础药物治疗,干预组在对照组的基础上实施维生素联合干预,观察比较两组患者治疗前后收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、血清Hcy水平及一氧化氮(N0)水平.结果 对照组患者治疗后SBP、DBP、血清Hcy水平及NO水平与治疗前相比均无显著差异(P＞0.05).而干预组患者治疗后血清Hey水平相比于治疗前显著降低(P＜0.01),NO水平显著升高(P＜0.01),SBP与DBP均显著降低(P＜0.01).结论 维生素类联合干预能够改善高血压高Hcy血症患者的内皮功能和自主神经功能,具有一定的降压作用.
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96孔板微生物法微量测定血浆和红细胞内叶酸含量
目的了解正常人血浆和红细胞内叶酸含量.方法在96孔细胞培养板中应用L.casie和叶酸培养基对59例健康青年人的血浆和红细胞内叶酸含量进行微量测定.结果血浆叶酸含量为(8.2±2.9)μg/L; 红细胞内叶酸含量为(337.5±91.0)μg/L.批内试验:( 12.4±0.3)μg/L,CV=2.2%;批间试验:(13.3±0.6)μg/L,CV=4.7%.平均回收率100.1%.结论 96孔板微生物法微量测定叶酸其方法准确、灵敏度高、重复性好,操作简便、样本量微,适用于各种生物组织样本的检测.
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替普瑞酮联合叶酸治疗慢性萎缩性胃炎的疗效分析
目的 探讨替普瑞酮联合叶酸治疗慢性萎缩性胃炎的疗效,并比较单用胃复春、叶酸治疗慢性萎缩性胃炎的临床疗效.方法 选取我院2014年1月至2015年3月诊治的慢性萎缩性胃炎患者90例,随机分成胃复春组、叶酸组、替普瑞酮联合叶酸组,每组30例.治疗6个月后比较三组患者的临床治疗效果.结果 治疗后,替普瑞酮联合叶酸组的总有效率明显优于其他两组(P＜0.05);三组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 替普瑞酮联合叶酸治疗慢性萎缩性胃炎临床效果显著,可推广应用.
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叶酸拮抗高同型半胱氨酸血症大鼠Bcl-2基因低甲基化研究
目的 探讨叶酸对蛋氨酸饮食诱导高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠主动脉组织Bcl-2基因甲基化水平影响.方法 健康6周龄雄性wistar大鼠36只,体重(160±10)g,适应性喂养一周后随机分为对照组、高同型半胱氨酸组、叶酸干预组、每组12只.对照组给予AIN-93G配方饲料,高同型半胱氨酸组饲以含1.7％蛋氨酸的AIN-93G配方饲料,叶酸干预组饲以含1.7％蛋氨酸和0.008％叶酸的AIN-93G配方饲料.喂养18周后,全自动生化仪测定血浆Hcy浓度、叶酸浓度和维生素B12浓度;免疫组化检测大鼠主动脉组织Bcl-2表达;巢式降落式PCR联合甲基化特异性PCR检测Bcl-2基因启动子区甲基化水平,荧光RT-PCR检测主动脉组织Bcl-2基因mRNA表达.结果 18周蛋氨酸饮食可以诱导大鼠高同型半胱氨酸血症(P＜0.01),叶酸摄入可以拮抗血浆同型半胱氨酸水平升高(P＜0.01);与对照组比较,高Hcy组大鼠主动脉组织Bcl-2阳性细胞数目增加,Bcl-2基因启动子区甲基化水平降低(P＜0.05),Bcl-2 mRNA表达增加(P＜0.05).叶酸干预后,主动脉组织Bcl-2阳性细胞数目减少,Bcl-2基因启动启动子区甲基化水平高于高Hcy组(P＜0.05),Bcl2 mRNA表达低于高Hcy组(P＜0.05).结论 叶酸摄入可以拮抗高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉组织Bcl-2低甲基化,使Bcl-2表达减弱,可能是其参与抗动脉粥样硬化形成的分子机制之一.
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血清叶酸和VB2水平与食管癌关系的研究
目的 研究血清叶酸和VB2水平与食管癌的关系.方法 采用酶联免疫吸附法测定1:1:1配对的106例食管癌患者、106例食管癌前病变患者和106例正常对照组血清叶酸和VB2水平.结果 食管癌组与食管癌前病变组的血清叶酸、VB2水平均低于正常组(P＜0.05)；食管癌组的血清叶酸水平均低于食管癌前病变组(P＜0.05),而食管癌组与食管癌前病变组的血清VB2水平的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 叶酸和VB2的缺乏与食管癌的发生、发展有关.
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叶酸代谢过程相关的四个单核苷酸多态性位点与先天性心脏病发病风险的病例-对照研究
目的 研究5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T和A1298C位点,蛋氨酸合成酶(MS) A2756G位点,以及蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G位点的单核苷酸多态性(SNPs)和先天性心脏病(CHD)的关联.方法 采用病例-对照研究,限制相应条件于2016年1月-2017年4月在河北省儿童医院心脏外科收集了200名CHD患儿作为病例组,200名正常体检儿童作为对照组.通过聚合酶链式反应(PCR)后Sanger测序的分析方法检测两组儿童的MTHFR C677T和A1298C位点、MS A2756G位点以及MTRR A66G位点的基因型及其分布,分析上述4个SNP位点与整体CHD和单一以及多发畸形型CHD发病风险之间的关系.结果 MTHFRC677T位点等位基因T携带者相对于等位基因C携带者发生CHD的OR=2.47(95％ CI1.86～3.29,P＜0.001).与纯合子CC型比较,杂合子CT个体患CHD的OR =2.32(95％ CIl.35～3.98,P＜0.05),而突变型纯合子TT个体患CHD的风险是CC个体的5.37倍(95％ CI3.01 ～9.60,P＜0.001);MTHFR A1298C位点等位基因C携带者相比于等位基因A携带者发生CHD的OR=0.53(95％ CI0.36～0.77,P＜0.05).杂合子AC个体患病风险低于野生型纯合子AA个体(OR =0.41,95％ CI0.26～ 0.64,P＜0.001);在分类后的单一及多发畸形型CHD中,以上两个位点的等位基因频率及基因型频率依然具有统计学意义(P＜0.05).以上两位点的组合基因型分析显示:相比于携带双野生型CC/AA的个体,携带CT/AA个体的患病风险增加到了4.65倍(95％CI2.16～10.02),TT/AA型个体增加到了7.05倍(95％ CI3.37 ～ 14.79).统计结果表明MS A2756G和MTRR A66G位点对整体CHD以及对分类后的单一及多发畸形型CHD的发生均无影响(P＞0.05).结论 MTHFR C677T位点的突变型等位基因T可能为CHD的危险因素,A1298C位点的突变型等位基因C可能是CHD的保护因素,这两个位点对CHD的发生可能存在联合作用.
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2014-2015年新疆喀什维吾尔族孕妇膳食、叶酸和铁营养状况
目的 了解喀什维吾尔族孕妇膳食营养摄入状况,探讨其体内叶酸水平及其影响因素.方法 于2014-2015年,以喀什地区358例维吾尔族孕妇为研究对象,采取3天24小时膳食回顾法进行膳食营养调查并采集血液标本;采用氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白(Hb),使用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测体内叶酸.将资料用V2.7.13营养计算器软件处理,与2013版《中国居民膳食营养素参考摄入量(DRIs)》进行比较.结果 粮谷类、畜禽类和油脂摄入量基本达标,蔬菜水果类、蛋类、奶及奶制品和大豆及坚果类摄入偏低,鱼虾类摄入为(0.18±3.95)g,盐摄入偏高(9.03±3.97).孕早期能量(101.19％)、蛋白质(107.87％)、钙(32.48％)、铁(195.30％)、锌(106.63％)、硒(55.77％)、碘(15.54％),维生素B1(87.50％)、维生素B2(60.00％)、维生素C(65.69％)、叶酸(13.21％);孕晚期能量(84.29％)、蛋白质(72.44％)、钙(27.77％)、铁(180.38％)、锌(121.16％)、硒(53.11％)、碘(11.26％),维生素B1 (75.33％)、维生素B2 (49.33％)、维生素C(57.37％)、叶酸(13.15％).孕妇贫血总检出率为18.89％,血红蛋白平均值为(119.42±13.90) g/L.孕妇在早期与晚期的Hb水平和贫血检出率差异均有统计学意义(P＜0.05);叶酸总缺乏检出率为75.42％,平均叶酸水平为(9.15±4.22)nmol/L,孕妇在早期和晚期的叶酸水平和叶酸缺乏检出率比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 喀什维吾尔族孕妇的膳食构成欠合理,蔬菜水果摄入不足,鱼虾类摄入严重缺乏,盐类摄入偏高.三大营养素供能比在适宜比例范围内;孕晚期的能量和蛋白质摄入低于DRIs,孕妇铁、锌摄入偏高,硒、维生素B2和C摄入不足,钙、碘和叶酸严重缺乏;孕妇贫血晚期较早期严重,孕期叶酸水平低、孕晚期低于早期.
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氨氯地平联合依那普利/叶酸片治疗H型高血压的临床疗效
目的 研究氨氯地平联合依那普利/叶酸片对H型高血压的临床疗效.方法 选取我院2014年6月至2016年6月收治的50例H型高血压患者,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组25例,患者均在试验前一周停止使用其他降压药,观察组患者使用氨氯地平联合依那普利/叶酸片治疗,对照组患者使用氨氯地平片治疗,比较两组患者治疗效果和不良反应发生情况.结果 观察组治疗总有效率为92.00%(23/25),明显高于对照组的76.00%(19/25)(P<0.05);观察组的不良反应总发生率为8.00%(2/25),明显低于对照组的24.00%(6/25),差异具有统计学意义(P<0.05).结论 与单一使用氨氯地平片治疗比较,采用氨氯地平联合依那普利/叶酸片对H型高血压患者进行治疗,效果更好,不良反应发生率更低,值得临床推广.
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叶酸相关基因多态性与NTDs发生的关联研究
神经管畸形是常见的出生缺陷,孕期服用叶酸能降低神经管畸形(NTDs)发生的危险.叶酸缺乏是神经管畸形发生的主要环境因素,但其机制尚不清楚,通过对与叶酸代谢有关的酶基因:5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)、丝氨酸羟甲基转移酶( SHMT)、蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)、β胱硫醚合酶(CBS)、尼克酰胺-腺嘌呤-二核氨酸磷酸依赖的细胞质多功能酶(MTHFD)、甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)的结构功能、调控、表达及其与叶酸水平、高半胱氨酸( Hcy)水平和神经管畸形的关系等研究进展加以综述.
关键词： 神经管畸形(NTDs) 叶酸 基因多态性 -
母乳中叶酸与维生素B12研究进展
作为合成DNA、RNA重要辅酶的叶酸和维生素B12对生命早期的生长发育非常重要.母乳中叶酸、维生素B12缺乏可能会造成新生儿出现相应的营养素缺乏症状,引起生长发育迟缓、巨幼红细胞贫血、血液或神经系统异常等多种症状.母乳叶酸、维生素B12的检测方法目前仍不明确.本文综述了母乳叶酸、维生素B12的存在形式、功能及检测方法的研究进展,为今后的研究提供依据.
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食物中维生素A、叶酸和维生物E的生物利用和表达方式
概括了食物中的三种重要维生素:即维生素A、叶酸和维生素E的生物吸收、生物利用、生物转化、生物效力和表达方式.并指出了不同表达方式各自的优缺点以及它们之间的转换关系.阐明了三种维生素的生物利用和表达方式对于分析方法、食物营养标签、食物成分数据库以及DRIs制定的重要意义,并提出了今后研究方向.
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不同人群叶酸营养状况的研究进展
作为一种辅因子,叶酸参加了多种细胞间重要的反应.随着研究的进展,叶酸对人体的营养作用也越来越为人们重视.虽然叶酸和贫血的关系很早以前就已明确得到证实,但不同人群、不同地区的叶酸营养状况及在防治贫血中应用还不十分明确.半个世纪以来人们一直在加强对不同人群叶酸营养状况的监测并积极的探讨一些切实、有效、科学的防治措施.本文拟对近年来的监测状况和防治措施作以综述,并积极的建议加强对我国高危人群叶酸营养状况的调查并采取及时有效改善措施.
