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维生素K2对肝癌细胞株内的肝癌衍生生长因子表达的抑制作用
目的 观察维生素K2对肝癌细胞株内的肝癌衍生生长因子(HDGF)表达的影响.方法 往培养板中加入不同浓度的维生素K2干预肝癌细胞培养,应用免疫组织化学方法检测肝癌细胞HDGF的表达水平.结果 HDGF阳性细胞细胞核和细胞质呈清晰的棕黄色颗粒,未干预组、15、30 μmol/L维生素K2干预组HDGF阳性表达率分别为79％、49％、23％.结论 维生素K2可明显抑制肝癌细胞中的肝癌衍生生长因子的表达,且呈现一定的剂量依赖性.
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维生素K2抑制肝癌细胞增殖及肝癌衍生生长因子表达
目的 检测维生素K2对肝癌细胞增殖及肝癌衍生生长因子表达的作用.方法 采用3种肝癌源性细胞株(HepG2、HuH-7和SK-Hep-1)进行细胞增殖实验.噻唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度的维生素K2(0、10、30、100 μmol/L)干预后肝癌细胞数量.以半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测0、100 μmol/L维生素K2干预后3种肝癌源性细胞株(HepG2、HuH-7和SK-Hep-1)中的HDGF的mRNA表达.结果 肝癌细胞株HepG2、HuH-7、SK-Hep-1细胞在10 μmol/L浓度维生素K2组存活率分别为(88.3±4.8)％、(94.2±4.3)％、(82.2±6.6)％;30 μmol/L浓度维生素K2组存活率为(75.4±4.3)％、(63.7±3.5)％、(58.1±7.5)％;100 μmol/L浓度维生素K2组存活率为(53.0±4.0)％、(21.2±3.6)％、(25.3±6.3)％.维生素K2呈剂量依赖性抑制3个肝癌细胞株的生长.同时,维生素K2显著性抑制3种细胞株的HDGF mRNA的表达.结论 维生素K2抑制肝癌细胞增殖,并抑制肝癌细胞内HDGF基因表达.
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维生素K2对肝癌细胞株内的肝癌衍生生长因子表达的抑制作用
目的 检测维生素K2对肝癌细胞株内的肝癌衍生生长因子(HDGF)表达的作用。方法 半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测0、10、30μm维生素K2干预后肝癌细胞中HDGF的mRNA表达,Western blot法检测不同浓度维生素处理后的肝癌细胞中HDGF蛋白表达。结果 RT-PCR结果示96 h后10、30μm维生素K2干预组能呈剂量依赖性抑制肝癌细胞中HDGF的mRNA表达。Western blot法检测结果示96 h后的10、30 μm维生素K2干预组中HDGF的蛋白表达分别为无药对照组的(0.915±0.025)倍和(0.530±0.030)倍,差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 维生素K2可下调肝癌细胞中的HDGF表达。
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肝癌衍生生长因子在乳腺癌中的表达及其临床意义
目的 探讨肝癌衍生生长因子(HDGF)在乳腺癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测113例乳腺癌和32例乳腺良性增生性病变中HDGF表达及乳腺癌中人类表皮生长因子受体2(HER-2)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达.比较HDGF与ER、PR、HER-2表达以及其与临床病理因素之间的关系.采用Kaplan-Meier法对不同HDGF表达水平乳腺癌患者进行单因素生存分析,利用Cox模型进行多因素生存分析.结果 腺癌组织中HDGF高表达率显著高于乳腺良性增生性痛变组织(P<0.01).HDGF表达与患者的年龄、绝经状况及病理类型、ER、PR表达无明显相关性(P>0.05).但与患者瘤体大小,淋巴结转移,远处转移、临床分期及HER-2表达显著相关(P<0.01或0.05).5年生存率HDGF低表达组明显高于高表达组(P<0.01).HDGF是乳腺癌预后的一项重要因素(RR=1.263,P<0.05).结论 HDGF高表达与乳腺癌的预后不良有关,可作为一个新的判断乳腺癌预后的参考指标.
关键词： 乳腺癌 肝癌衍生生长因子 人类表皮生长因子受体2 -
siRNA靶向HDGF抑制大肠癌细胞SW480的生长
目的 肝癌衍生生长因子(HDGF)是近年来逐渐引起重视的一种细胞生长因子,在许多肿瘤细胞中高表达.本研究拟构建PNAi干扰慢病毒载体,沉默HDGF基因在大肠癌SW480细胞中的表达,观察细胞的增殖状态.方法 RT-PCR方法 检测HDGF基因在大肠癌中的表达.利用Invitrogen公司在线网站设计HDGF干扰序列,片段合成后构建慢病毒RNAi表达载体,随后利用293FT细胞将其包装成成熟慢病毒颗粒去感染SW480细胞,经Biasticidin抗性选择培养后,建立了稳定表达HDGF siRNA的SW480细胞株.实时荧光定量PCR和Western Blot检测HDGF基因在mRNA和蛋白水平表达变化;生长曲线和MTT法观察细胞增值情况的改变.结果 HDGF基因在大肠癌SW480细胞中表达较高.成功的构建了HDGF慢病毒KNAi表达载体,并建立了稳定表达靶向干扰HDGF基因表达的siRNA SW480细胞株.沉默HDGF基因在表达后,能明显体外抑制细胞的增殖.结论 针对HDGF基因的慢病毒RNAi载体能明显下调HDGF基因的表达,并在体外显著抑制大肠癌细胞增殖能力.
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人脑胶质瘤中肝癌衍生生长因子及细胞周期素D1的表达及意义
目的 探讨肝癌衍生生长因子(hepatoma-derived growth factor,HDGF)与细胞周期素D1(cyclin D1)在人脑胶质瘤中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学法检测9例脑外伤内减压切除的正常脑组织和55例不同级别脑胶质瘤组织中HDGF和cyclin D1的表达强度.结果 在55例胶质瘤组织中,HDGF及cyclin D1的表达阳性率分别为74.5%(41/55)和63.6%(35/55),显著高于正常对照脑组织中的表达水平(3/9和2/9,P=0.008和P=0.024).胶质瘤组织恶性程度越高.HDGF及cyclin D1表达越强(P=0.006和P＜0.001).胶质瘤组织中HDGF与cyclin D1的表达水平呈正相关性(r=0.728,P＜0.001).结论 HDGF与cyclin D1蛋白在脑胶质瘤的发生发展中起重要作用.
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肝癌衍生生长因子在Ewing肉瘤细胞增殖和体外肿瘤发生中的作用
目的 研究人肝癌衍生生长因子(HDGF)对Ewing肉瘤细胞生物学功能的影响.方法 HDGF-siRNAs沉默Ewing肉瘤细胞系RD-ES细胞中HDGF蛋白的表达,Western blotting检测蛋白表达的变化,克隆形成实验、细胞周期检测、EdU细胞增殖实验和软琼脂克隆形成实验等方法用于分析内源性HDGF表达对Ewing肉瘤细胞增殖能力、细胞生长周期和体外肿瘤发生的影响.结果 沉默内源性HDGF表达显著降低了Ewing肉瘤细胞的增殖能力,使细胞周期进程阻滞,并抑制了Ewing肉瘤细胞体外成瘤能力.结论 HDGF是Ewing肉瘤中重要的致瘤基因,在Ewing肉瘤细胞体外生长和肿瘤发生中发挥重要功能.
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SiRNA稳定靶向干扰HDGF肺腺癌细胞株的建立及干扰效率检测
目的 构建针对肝癌衍生生长因子(HDGF)基因的siRNA表达载体,建立稳定干扰HDGF基因表达的肺腺癌细胞株,检测干扰效率.方法 实时荧光定量PCR比较肺腺癌细胞株SPC-A-1、10例肺腺癌组织和其配对的癌旁肺组织HDGF基因表达差异.构建shRNA-HDGF慢病毒表达载体,测序鉴定序列的正确性.随后用脂质体的方法将载体转染入肺腺癌细胞株SPC-A-1中,经杀稻瘟菌素筛选后,稳定表达siRNA-HDGF的细胞株单克隆细胞株建立.实时荧光定量PCR检测干扰效率,筛选干扰效率高的细胞株.结果 HDGF基因在腺癌细胞株SPC-A-1和肺腺癌组织明显高表达.测序证实,构人慢病毒载体中shRNA序列正确.一共筛选了5个siRNA-HDGF细胞株.与对照载体和单纯细胞株相比,高干扰HDGF表达的效率为75%.结论 HDGF基因在肺腺癌细胞株及肺癌组织中高表达;针对HDGF的siRNA慢病毒表达载体成功构建;在其导人肺腺癌细胞株后能稳定干扰HDGF基因的表达.
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肝癌衍生生长因子(HDGF)在子宫内膜癌中的表达及临床意义
目的 观察肝癌衍生生长因子(HDGF)在子宫内膜癌中的表达状态,并探讨其与子宫内膜癌临床病理参数之间的关系.方法 采用SP免疫组织化学方法检测82例子宫内膜癌、22例子宫内膜不典型增生、20例正常子宫内膜组织的HDGF表达情况.结果 正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生及子宫内膜癌组织中的HDGF阳性表达率逐渐升高,分别为13.0%(3/20) 、22.7%(5/22)、37.8 (31/82),3组间差异有统计学意义(χ2=92.447,P<0.001).HDGF蛋白阳性表达率与子宫内膜癌的FIGO分期正相关(P<0.001),与患者生存时间负相关(P=0.017).结论 HDGF蛋白的阳性表达可能与子宫内膜癌的预后不良相关.
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肝癌生长因子与血管内皮生长因子在肺癌患者血清和组织中的表达及意义
[目的]探讨肝癌衍生生长因子(HDGF)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平与肺癌的关系.[方法]用酶联免疫吸附法(ELISA)检测健康对照组(14例)、良性肺病组(14例)、肺癌组(56例)血清中HDGF和VEGF表达水平.用免疫组织化学(IHC)的方法检测患者肺癌组织及肺癌旁正常肺组织中HDGF和VEGF的表达.[结果]肺鳞癌患者与肺腺癌患者相比,肺鳞癌患者血清HDGF水平显著增高(P＜0.01).未分化+低分化肺癌患者与中分化+高分化肺癌患者相比,未分化+低分化肺癌患者血清HDGF水平显著增高(P＜0.01);Ⅱ～Ⅳ期NSCLC患者血清HDGF和VEGF水平显著高于Ⅰ期患者(P＜0.05)；有淋巴结转移者比无淋巴结转移的肺癌患者血清VEGF水平显著增高(P＜0.05)；血清HDGF水平与血清VEGF水平呈显著的正相关关系(r=0.35,P＜0.01)；肺癌组织中HDGF的表达水平显著高于肺癌旁正常肺组织(P＜0.01)；肺癌组织中VEGF的表达水平也显著高于肺癌旁正常肺组织(P＜0.05)；肺癌组织中HDGF的表达水平与VEGF的表达水平呈显著的正相关关系(r=0.75 P＜ 0.05).[结论]HDGF和VEGF可能与肺癌的生长、转移有关,并且两者之间可能存在着相互联系.
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肝癌衍生生长因子HDGF在乳腺癌中的表达
目的 探讨肝癌衍生生长因子(Hepatoma-derived growth factor,HDGF)在乳腺癌组织中的表达及其意义.方法 应用逆转录聚合酶链反应(Reverse-transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测24例乳腺癌及其配对正常乳腺组织中HDGF mRNA的表达;应用免疫组织化学SP法检测75例乳腺癌及其配对正常乳腺组织中HDGF蛋白的表达水平.结果 乳腺癌组织和正常乳腺组织中HDGF基因的表达强度分别是看家基因β-actin的(2.00±0.85)和(0.67,0.37)倍,正常乳腺组织中HDGF mRNA表达明显低于乳腺癌组织中的表达(P<0.001);HDGF蛋白在乳腺癌组织的表达水平明显高于正常乳腺组织(P<0.001);乳腺癌临床分期越高,HDGF的表达水平越高;淋巴结转移阳性的乳腺癌病例中HDGF的表达水平明显高于淋巴结转移阴性组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 HDGF高表达可能促进了乳腺癌的发病过程,并与乳腺癌淋巴结转移相关.
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肝癌衍生生长因子和血管内皮生长因子在对 肝外胆管癌患者血清中的诊断价值
目的 研究血清中肝癌衍生生长因子(HDGF)及血管内皮生长因子(VEGF)对肝外胆管癌的诊断价值.方法 选取该院2015年6月至2016年3月收治的50例肝外胆管癌患者作为肝外胆管癌组,另选取50例健康人作为对照组,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测2组血清中HDGF和VEGF的表达水平,并通过受试者特征曲线(ROC曲线)分析两者对肝外胆管癌患者的诊断价值.结果 肝外胆管癌组血清中HDGF表达水平显著高于对照组,VEGF表达水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).血清中HDGF和VEGF诊断肝外胆管癌敏感性分别为65.89%和81.13%,特异性分别为87.66%和44.67%.结论 HDGF和VEGF联合检测可优势互补,提高对肝外胆管癌的诊断价值.
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下调肝癌衍生生长因子表达水平对胶质瘤U373细胞增殖及凋亡的影响
目的:研究下调肝癌衍生生长因子(Hepatoma-derived growth factor,HDGF)的表达水平对胶质瘤细胞U373增殖及凋亡能力的影响.方法:设计并合成HDGF靶向siRNA,以脂质体为介质瞬时转染入U373细胞,采用RT-PCR及Western blot检测HDGF基因及蛋白表达水平的变化,判断RNA干扰的效果、流式及MTT法检测细胞凋亡及增殖变化.结果:用脂质体瞬时转染siRNA至U373细胞中,RT-PCR及Western blot实验结果证实转染48h后,U373细胞中HDGF基因及蛋白表达水平明显下调.MTT结果显示,RNAi下调HDGF后的U373细胞相对于空白和阴性对照组,细胞在体外增殖能力明显减弱(P＜0.01),U373细胞凋亡率明显上升(P＜0.05).结论:HDGF蛋白在胶质瘤的发生发展过程中起着促进作用,可能成为一个新的肿瘤分子治疗靶点.
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HDGF、VEGF在人肝细胞癌中的表达及其与肿瘤血管生成的关系
目的 探讨肝癌衍生生长因子(hepatoma-derived growth factor,HDGF)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在人肝细胞癌组织中的表达与肿瘤组织微血管形成过程之间的关系和临床意义.方法 对108例人肝细胞肝癌及相应的癌旁肝组织标本进行了HDGF、VEGF和CD34免疫组织化学EnVision~(TM)法检测,并初步分析结果.结果 HDGF、VEGF在肝癌组织中阳性表达率分别为63.2%、69.1%;癌旁组织中阳性率分别为16.7%、20.3%.肝癌组织中HDGF、VEGF的表达呈正相关(P<0.05),且两者共同阳性表达与肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)值之间呈正相关(r=0.728,P<0.01;r=0.608,P<0.05).结论 肝癌组织中异常表达增高的HDGF、VEGF与肝癌微血管形成过程相关,可作为判断肝细胞癌侵袭能力、血管生成、判断患者预后的参考标志.
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HDGF在手术切除非小细胞肺癌中的异常表达及其在预测预后中的意义
背景与目的 在前期研究中发现肝癌衍生生长因子(hepatoma-derived growth factor,HDGF)在A549、H226等非小细胞肺癌( non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞中明显高表达,在促进NSCLC细胞侵袭、生长、迁移过程中起重要作用.本研究旨在进一步检测HDGF在NSCLC组织标本中的表达情况,探讨其临床意义.方法 应用SP法.检测158例手术切除NSCLC及12例正常对照肺组织中HDGF蛋白表达情况,进行生存分析、预后判定.结果 与12例正常对照肺组织比较,HDGF蛋白在158例NSCLC中明显高表达(P<0.001).158例NSCLC中,HDGF高表达组(78例,占49.4%)的5年生存率为38.2%,明显低于HDGF低表达组(80例,占50.6%)的5年生存率63.1%(P=0.009).直线相关分析表明HDGF表达水平与术后生存时间呈负相关(r=0.183,P=0.022).多因素生存分析表明术后病理分期和HDGF表达水平是手术切除NSCLC预后判定的独立因素.结论 HDGF在NSCLC中呈现高表达;HDGF高表达代表预后不良,HDGF可以作为手术切除NSCLC预后判定的新的分子标志物.
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Ⅰ期非小细胞肺癌中肝癌衍生生长因子的表达及其临床意义
背景与目的 肝癌衍生生长因子(hepatoma-derived growth factor,HDGF)是近年来逐渐引起重视的一种细胞生长因子.研究表明HDGF在多种正常细胞和肿瘤存在高表达,能够促进细胞增殖、组织分化以及血管生成,与多种恶性肿瘤的侵袭、转移及其预后相关.本研究旨在分析HDGF在Ⅰ期非小细胞肺癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测118例Ⅰ期非小细胞肺癌以及30例正常肺组织中HDGF的表达.结果 HDGF在胞浆和胞核均有表达,在肺癌组织中表达普遍上调,正常肺组织HDGF评分52.23±10.35,肺癌组织评分为156.73±70.95,差异有显著性(P＜0.01);HDGF表达与病理类型显著相关,而与其他临床病理因素均无明显相关性(P＞0.05),腺癌HDGF评分明显高于鳞癌,差异有显著性(P=0.001);HDGF高表达组5年生存率较低表达组明显降低,分别为40.0%和77.5%,差异有显著性(P=0.008).多因素生存分析结果表明HDGF为Ⅰ期非小细胞肺癌的独立预后指标(RR=1.011,P=0.002).结论 HDGF可以作为Ⅰ期非小细胞肺癌患者的独立预后指标,对HDGF的深入研究可能为Ⅰ期非小细胞肺癌的发生、发展提供新的视角.
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siRNA下调表达HDGF对HepG2细胞增殖能力及ADAM9表达的影响
目的:探讨HDGF基因特异性siRNA对肝癌细胞系HepG2的增殖能力及ADAM9基因表达的影响.方法:设计并合成HDGF基因特异性的siRNA干扰序列,瞬时转染HepG2细胞.实时荧光定量PCR检测HDGF和ADAM9 mRNA的表达变化;MTT法观察细胞增殖能力的变化.结果:转染48h时HDGF和ADAM9的基因表达抑制为明显,分别为阴性对照组表达量的7％和5％(P＜0.05).转染48h时HepG2细胞增殖能力受到明显抑制(P＜0.05).结论:HDGF siRNA能够显著抑制HDGF和ADAM9基因的表达,降低HepG2细胞的增殖能力.
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肝癌衍生生长因子和细胞外基质蛋白－1对原发性肝内胆管细胞癌的鉴别诊断和预后意义
目的：研究肝癌衍生生长因子（HDGF）和细胞外基质蛋白－1（ECM1）对原发性肝内胆管细胞癌（PICC）和结直肠癌（CRC）的鉴别诊断价值。方法：对55例 PICC、60例肝脏转移性 CRC 以及60例原发性CRC 标本行免疫组织化学（IHC）染色和统计学处理。结果：32例（58．2％）PICC 归为肿块型，13例（23．6％）为导管内乳头状型，10例（18．2％）为周围导管浸润型。PICC 中 ECM1表达与男性（P ＝0．033）、肝门区（P ＝0．027）、导管内乳头黏液腺瘤（P ＝0．000）和肠型上皮细胞（P ＜0．001）显著相关。HDGF ＋／ECM1－免疫表型诊断 PICC 有100％的阳性预测值（PPV）。HDGF －／ECM1＋免疫表型诊断转移性 CRC 有84．2％的 PPV 值。HDGF ＋／ECM1＋免疫表型诊断 PICC 和转移性 CRC 分别有86．7％和13．3％的 PPV 值。单变量 Cox 生存分析55例 PICC 标本，确认浸润深度（P ＝0．005）、淋巴结转移（P ＝0．012）、肿瘤阶段（P ＝0．004）以及血管浸润（P＝0．023）与病人不良预后显著相关。多变量 Cox 生存分析认为：肿瘤阶段（P ＝0．002）与病人生存期差有关。结论：PICC 中的 ECM1表达与性别、肿瘤位置、导管内乳头状生长型及肠表型呈统计学相关。HDGF 和 ECM1联合可作为鉴别 PICC 和转移性 CRC 的有用指标。
关键词： 肝癌衍生生长因子 细胞外基质蛋白-1 原发性肝内胆管细胞癌 鉴别诊断
