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血红素氧合酶1/一氧化碳系统预防兔动脉粥样硬化斑块的形成
目的 探讨血红素氧合酶1(HO-1)/一氧化碳(CO)系统对动脉粥样硬化斑块形成的影响及其机制.方法 新西兰大白兔32只,分为4组;对照组、胆固醇组、血红素组及卟啉锌组,每组8只.其中对照组喂饲普通饲料,胆固醇组喂饲含1.5%胆固醇饲料,血红素组及卟啉锌组在予以高胆固醇饮食的同时,分别经腹腔注射氯化血红素(HO激动剂,15 mg·kg-1·d-1)或锌原卟啉9(HO抑制剂,45 μmol·kg-1·d-1),共12周,12周末处死动物,取出胸、腹主动脉行病理形态学观察和HO-1、内皮素1(ET-1)免疫组织化学及Western blot分析.结果 主动脉大体油红O染色示对照组无斑块形成,胆固醇组斑块所占面积比为(54.0±4.2)%,与胆固醇组比较,卟啉锌组斑块所占面积比[(61.1±3.5)%]显著增大(P<0.01),而血红素组斑块所占面积比[(17.9±3.0)%]显著减小(P<0.01).透射电镜示胆固醇组内皮消失,代之以粥样物质,弹力层及平滑肌层结构紊乱,平滑肌细胞胞质内充满脂质空泡,胶原纤维增生;卟啉锌组上述改变加重,血红素组浅层平滑肌结构略微不整齐,余无明显异常.HE染色示胆固醇组内膜增厚[(74.6±39.0)μm],内皮细胞脱落,泡沫细胞增生明显,中膜萎缩、变薄、平滑肌结构和排列紊乱;卟啉锌组上述改变加重,内膜增厚更显著[(127.2±49.8)μm,P<0.01];血红素组内膜厚度[(48.5±42.3)μm]较胆固醇组显著减少(P<0.01),内皮细胞无脱落,少许泡沫细胞增生,平滑肌结构和排列正常.与对照组比较,胆固醇组主动脉cNOS活性、NO生成量明显降低,HO-1表达、CO生成量明显增高(均P<0.01);与胆固醇组比较,氯化血红素干预显著增高HO-1表达、CO生成量,而显著降低ET-1表达(均P<0.01),锌原卟啉9显著降低HO-1表达、CO生成量,而显著增高ET-1表达(均P<0.01).结论 HO-1/CO系统具有预防动脉粥样硬化斑块形成的作用,其机制可能与该系统代偿和调节NOS/NO系统以及下调ET-1表达从而改善血管内皮功能、抑制平滑肌细胞增殖有关.
关键词： 动脉粥样硬化 一氧化碳 血红素氧化酶(脱环) 模型 动物 -
一氧化碳吸入对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的影响及其机制
目的观察吸入低浓度一氧化碳(CO)对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织细胞凋亡的影响,探讨可能机制.方法18只雄性SD大鼠随机均分为3组.ALI组静脉滴注LPS5 mg/kg,正常对照组注入生理盐水,CO吸入组在LPS诱导肺损伤后持续吸入体积分数为2.5×10.CO.观察3 h后放血处死,取肺组织,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定血红素氧化酶1(HO-1)表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-10的含量;化学比色法测定丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;光镜观察并盲法评分比较肺组织学;流式细胞仪检测细胞凋亡.结果ALI组HO-1 mRNA、TNF-α、IL-6、IL-10、MDA、MPO、SOD、细胞凋亡与正常对照组[1.002±0.004、(0.47±0.06)pg/mg蛋白、(0.49±0.12)pg/mg蛋白、(0.42±0.08)pg/mg蛋白、(0.79±0.14)nmol/mg蛋白、(6.0±1.0)U/mg蛋白、(74±7)U/mg蛋白、(0.12±0.03)%]比较差异均有统计学意义(P＜0.05或＜0.01),肺损伤严重.CO吸入组TNF-α、IL-6、MDA、MPO和细胞凋亡[(0.91±0.25)pg/mg蛋白、(0.64±0.05)pg/mg蛋白、(1.02±0.23)nmol/mg蛋白、(7.2±1.6)U/mg蛋白、(1.60±0.34)%]显著低于ALI组[(1.48±0.23)pg/mg蛋白、(1.16±0.26)pg/mg蛋白、(1.27±0.33)nmol/mg蛋白、(8.2±1.5)U/mg蛋白、(3.18±0.51)%,P均＜0.05];HO-1 mRNA、IL-10和SOD表达[5.433±0.921、(0.26±0.07)pg/mg蛋白、(60±10)U/mg蛋白]显著高于ALI组[3.081±0.823、(0.15±0.03)pg/mg蛋白、(51±7)U/mg蛋白,P均＜0.05],肺损伤减轻.结论吸入CO通过调控氧化/抗氧化、促炎/抗炎反应、抑制过度细胞凋亡和上调HO-1表达,可能对LPS诱导ALI起保护作用.
关键词： 一氧化碳 血红素氧化酶(脱环) 肺损伤 急性 凋亡 -
血红素氧化酶系统:高血压治疗的新靶点
本文介绍了血红素氧化酶系统在高血压中的调节作用,从针对自发高血压大鼠模型的研究和血管紧张素Ⅱ依赖的高血压/肾血管性高血压的研究两个角度分析了血红素氧化酶系统调节血压的机制,认为血红素氧化酶系统可以通过抗氧化、抗炎、抗凋亡、改善内皮功能以及舒张血管等方面降低血压.此外,还介绍了脂联素与血红素氧化酶系统的关系及其在调节血压中的作用,提出针对HO-1-脂联素轴的策略可能是一种有前景的控制高血压的治疗方法.
关键词： 高血压 治疗 血红素氧化酶(脱环) -
血红素氧合酶1与冠心病患者冠状动脉病变及其形态的关系
目的观察血红素氧合酶1(heme oxygenase,HO-1)与冠心病患者冠状动脉病变及其形态的关系. 方法将经冠状动脉造影少有一支主要血管腔狭窄≥50%的冠心病患者136例纳入该研究.并选择冠状动脉造影正常的40例患者作为对照组.按照病变血管数量分为单支病变组(61例)和双支病变组(45例)和三支病变组(30例);再按照病变处斑块的形态分为Ⅰ型病变组(53例)、Ⅱ型病变组(70例)、Ⅲ型病变组(13例).利用免疫组化方法对冠心病患者外周血单个核细胞中HO-1的表达进行定位分析,并通过计算机图像分析系统分析HO-1表达的程度及强度.通过Western blot 对HO-1表达水平进行定量分析.比较冠心病各亚组患者HO-1的表达情况.结果 HO-1表达于胞浆.冠状动脉病变组HO-1表达明显高于冠状动脉正常组( P <0.01);三支病变组HO-1表达明显高于双支病变组及单支病变组( P <0.01),双支病变组HO-1表达也高于单支病变组( P <0.05);Ⅱ型及Ⅲ病变组的HO-1表达水平明显高于Ⅰ型病变组( P <0.01).结论冠心病患者HO-1表达水平升高,其表达水平与冠心病严重程度有关.
关键词： 冠状动脉疾病 冠状血管造影术 血红素氧化酶(脱环) -
多廿烷醇对高脂血症患者血脂谱和血红素氧合酶1的作用
目的 评价多廿烷醇治疗高脂血症的疗效和安全性,并观察其对血红素氧合酶1(HO-1)的作用.方法 72例高脂血症患者随机分为两组:治疗组(n=36):多廿烷醇20 mg/d；安慰剂组(n=36):安慰剂2片/d.两组均随访治疗16周,观察两组治疗前后血脂谱及血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、HO-1水平的变化,同时监测药物不良反应.HO-1采用ELISA法进行检测.结果 (1)经过16周治疗后,治疗组总胆固醇(TC)由(7.01±1.03) mmol/L下降至(5.66±0.83) mmol/L(P＜0.01),均数降低19.4％；低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)由(4.78±0.72) mmol/L下降至(3.70±0.69) mmol/L(P ＜0.01),均数降低22.5％；甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)无显著变化；HO-1由(1.82±1.08) μg/L下降至(1.45±0.81) μg/L(P ＜0.01)；hs-CRP由(3.40±3.64) mg/L下降至(1.86 ±2.02)mg/L(P＜0.01).(2)两组的各项安全性指标在治疗前后均无显著变化(P＞0.05),随访过程中无过敏反应、肌肉痛等不良反应发生.结论 多廿烷醇(20 mg/d)可显著降低血清胆固醇,并降低HO-1、hs-CRP水平,提示其有抗氧化应激的作用.多廿烷醇治疗高脂血症不良反应少,具有较好的安全性.
关键词： 高脂血症 血红素氧化酶(脱环) 多廿烷醇 -
血红素氧合酶-1/一氧化碳系统对胰岛素样生长因子-Ⅰ诱导的兔血管平滑肌细胞增殖的抑制作用
目的研究血红素氧合酶-1/一氧化碳(HO-1/CO)系统对胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响及分子机制.方法体外培养兔主动脉VSMCs,用IGF-Ⅰ诱导其增殖,用氯化血红素和锌原卟啉-9,分别诱导和阻断HO-1的表达,从而促进和抑制CO生成,通过RT-PCR及 Western blot检测HO-1 mRNA和蛋白的表达,采用酶联免疫法测定培养上清液中碳氧血红蛋白含量,应用同位素3H-TdR掺入试验检测VSMCs增殖,采用流式细胞技术检测细胞增殖周期.结果氯化血红素显著诱导VSMCs HO-1 mRNA及蛋白的表达,显著增加VSMCs培养上清液中CO的生成量,呈剂量依赖趋势;梯度浓度的氯化血红素对IGF-Ⅰ增高的VSMCs 3H-TdR掺入量抑制率分别为29.6%、45.0%和54.1%,显著抑制细胞周期进程,导致G0/G1细胞显著增多,S期和G2/M期细胞显著减少(P均<0.01),与加入的氯化血红素及上清液中碳氧血红蛋白含量呈剂量依赖趋势;锌原卟啉-9则导致相反的结果.结论内源性CO通过抑制VSMCs的DNA合成及细胞周期进程直接参与VSMCs的增殖调节;HO-1表达上调是细胞对抗氧化应激和损伤的保护性反应;HO-1 mRNA及蛋白表达增加是内源性CO抑制VSMCs增殖的基础.
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钴卟啉诱导胰岛血红素加氧酶-1过表达的初步研究
目的 探讨钴卟啉腹腔注射诱导大鼠胰岛血红素加氧酶-1(Ho-1)过表达的量/效关系及其对胰岛功能的影响.方法 大鼠分为5组,A、B、C、D 4组分别在提取胰岛前24 h予腹腔注射2.5、5、7.5及10 mg/ks的钴卟啉溶液,对照组给予1.5 Inl生理盐水.改良Goth法提取胰岛,计数胰岛得率、估定纯度,real time-PCR和Western印迹法检测胰岛组织内Ho-1mRNA及蛋白表达,糖刺激试验评价胰岛功能.结果 C、D组大鼠在注射CoPP溶液后出现机体损伤,D组部分大鼠死亡.A、B、C及对照组胰岛得率及纯度差异无统计学意义(P＞0.05),B组Ho-1mRNA及蛋白表达量为4组中高(B组Ho-1mRNA表达量达对照组的84.18倍).A、B及对照组胰岛于低糖刺激时,胰岛素分泌量差异无统计学意义(P＞0.05),而高糖刺激下,胰岛素分泌量以B组高,差异有统计学意义[A、B及对照组分别为:(172.37±16.4)、(187.68±19.93)及(91.25±12.64)μIU·ml-1·10islets-1·45min-1,P＜0.05].结论 腹腔注射5 mg/kg体重钴卟啉相对安全,可大幅提高大鼠胰岛组织中HO-1的表达量,并能增强胰岛功能.
关键词： 胰岛移植 血红素氧化酶(脱环) 大鼠 -
经p38α通路激活的HO-1在乳腺癌发生和耐药中的作用
目的探讨p38α通路和血红素氧合酶(HO-1)在乳腺癌发生和耐药中的作用.方法应用MTT法和流式细胞术检测30例人乳腺癌细胞的增殖和凋亡变化,应用RT-PCR法检测p38α、HO-1 mRNA表达.结果78%的乳腺癌组织标本p38α mRNA表达水平显著高于正常组织的表达,其中有淋巴结转移标本的表达水平高于无淋巴结转移者(P＜0.01).用吡喃阿霉素活化后在乳腺癌MCF-7/ADR细胞中的表达高于MCF-7细胞.结论p38α、HO-1在乳腺癌组织中高表达可能在人乳腺癌的过度增殖、凋亡受阻中起着重要作用;吡喃阿霉素经p38通路诱导乳腺癌细胞HO-1 mRNA表达,可能与乳腺癌细胞的耐药机制有关.
关键词： 乳腺肿瘤 血红素氧化酶(脱环) 细胞周期 药物耐受性 -
次要组织相容性抗原13在胃癌中的表达及其与侵袭转移的关系
目的 探讨次要组织相容性抗原13(minor histocompatibility antigen 13,HM13)蛋白在胃癌组织中的表达情况及其与患者临床病理指标和预后的关系.方法 应用免疫组化法检测90例胃癌及癌旁组织中HM13蛋白的表达,并分析其与胃癌患者临床病理指标及预后的相关性;qRT-PCR检测HM13干扰后下游基因血红素氧化酶1的表达改变.结果 胃癌组织中HM13的表达比癌旁正常组织中的表达降低,二者的高表达率分别为47％和61％,但差异无统计学意义(x2=3.78,P=0.052).HM13蛋白表达与胃癌TNM分期(x2=5.022,P=0.025)及远处转移(P =0.033)有关,而与患者年龄(x2=0.832,P=0.362)、性别(x2=0.779,P=0.378)、肿瘤大小(x2=0.804,P=0.370)、分化程度(x2 =0.430,P=0.512)、大体类型(x2=2.069,P=0.150)、浸润深度(x2=0.167,P=0.683)及有无淋巴转移(x2 =0.396,P=0.529)无关.HM13蛋白低表达的胃癌患者比高表达胃癌患者的预后差(中位总生存期:15个月比54个月,x2=6.456,P=0.011;中位无进展生存期:13个月比48个月,x2=6.742,P=0.009).干扰HM13表达后血红素氧化酶1表达上调(0.532±0.013比0.395±0.011,t=13.93,P＜0.05).结论 HM13低表达与肿瘤的进展、转移及不良预后密切相关.
关键词： 胃肿瘤 次要组织相容性抗原 血红素氧化酶(脱环) 肿瘤转移 预后 -
血红素氧合酶1基因转移对大鼠肾缺血再灌注损伤的防护作用
目的探讨血红素氧合酶1(HO-1)基因转移对大鼠自体移植肾缺血再灌注损伤的保护作用.方法构建HO-1腺病毒表达载体,经肾动脉灌注转染26只大鼠(实验组)移植肾,4℃保存24 h后行自体移植,移植后5 d切除对侧肾脏;以25只大鼠为对照.于移植后3 h、3 d,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学方法检测移植肾HO-1基因及蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定肾组织匀浆中HO-1蛋白的含量(以吸光度值表示).结果移植后3 h及3 d,实验组移植肾HO-1mRNA的表达强度分别为0.65±0.11及0.86±0.17,而对照组分别为0.09±0.01及0.15±0.02,两组相比差异具有统计学意义(t=14.38,11.73,P均<0.05);实验组移植肾HO-1蛋白含量分别为(297±61)及(468±51)ng/g,而对照组分别为(98±30)及(155±31)ng/g,两组相比差异具有统计学意义(t=8.27,14.83,P均<0.05).与对照组相比实验组移植肾病理改变明显减轻(P<0.05),血肌酐水平明显降低(t=8.41,P<0.05).结论腺病毒载体可成功介导HO-1基因对大鼠肾脏的转移,对自体移植肾缺血再灌注损伤具有保护作用.
关键词： 肾移植 血红素氧化酶(脱环) 再灌注损伤 基因 鼠科 -
妊娠高血压综合征患者胎盘组织中血红素氧合酶蛋白表达及其意义
目的探讨妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中血红素氧合酶(HO)活性变化与其同工酶HO-1和HO-2蛋白表达变化的相关性,及其在妊高征发病中的作用.方法采用双波长分光光度法测定30例妊高征患者(妊高征组)及30 例正常晚孕妇女(对照组)胎盘组织中的HO活性;采用免疫印迹法测定两组孕妇胎盘组织中的HO-1和HO-2蛋白相对表达量.结果 (1)妊高征组HO的活性为(0.3±0.2) nmol·mg-1·h-1,与对照组的(0.5±0.3) nmol·mg-1·h-1相比较,差异有极显著性(P＜0.01);(2)对照组HO-1及HO-2蛋白相对表达量分别为0.7±0.4和0.8±0.4,两者相比较,差异无显著性(P＞0.05).妊高征组胎盘组织中HO-1蛋白的相对表达量为0.6±0.4,与对照组比较,差异无显著性(P＞0.05);妊高征组HO-2蛋白的相对表达量为0.6±0.3,其表达明显降低,与对照组比较,差异有极显著性(P＜0.01).HO活性变化与HO-2蛋白表达量结果一致.结论(1)妊高征患者胎盘组织中HO-2的表达降低,HO活性下降,HO-2的表达与HO活性下降密切相关.(2)HO可能在妊高征患者胎盘组织损伤的病理生理中起重要作用.
关键词： 妊娠并发症 心血管 高血压 胎盘 血红素氧化酶(脱环) -
血红素氧合酶在正常妊娠绒毛和胎盘组织中的表达及定位
目的探讨血红素氧合酶(HO)的两种同工酶基因及蛋白在正常早期妊娠绒毛和晚期妊娠胎盘组织中的表达.方法选择正常妊娠6～10周的孕妇(早孕组)和妊娠37～41周的孕妇(晚孕组)各20例,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测绒毛和胎盘组织中诱导型HO(HO-1)mRNA及结构型HO(HO-2)mRNA的表达;并采用免疫组织化学(免疫组化)方法,进行HO蛋白定位和半定量分析.结果两组HO-1 mRNA的表达均较弱,早孕组绒毛HO-1 mRNA表达水平为(0.31±0.19),晚孕组胎盘HO-1 mRNA表达水平为(0.28±0.14),两组比较,差异无显著性(P>0.05);而两组HO-2 mRNA的表达均较强,晚孕组胎盘表达水平为(1.12±0.58),早孕组绒毛表达水平为(0.70±0.48),两组比较,差异有显著性(P<0.05).免疫组化定位结果显示,HO-1蛋白主要定位于绒毛间质细胞和胎盘滋养细胞,HO-2蛋白主要定位于胎盘滋养细胞及血管内皮细胞,绒毛间质也有染色.蛋白半定量结果显示,胎盘细胞染色分数为非正态分布,HO-1在早孕组绒毛滋养细胞、间质细胞和血管内皮细胞中的染色分数中位数分别为9.0、2.6和2.8,晚孕组分别为8.7、2.0和1.4,两组比较,差异均无显著性(P>0.05).HO-2在早孕组绒毛血管内皮细胞中的染色分数中位数为5.8,明显低于晚孕组的9.3(P<0.05);而在胎盘滋养细胞中的表达,两组比较,差异无显著性( P>0.05) .结论 HO可能参与了胎盘血管功能的调控,HO-1和HO-2在胎盘血管发育和调节中的作用不同;并在细胞保护及免疫调节中发挥重要作用.
关键词： 妊娠 胎盘 绒毛膜绒毛 血红素氧化酶(脱环) -
内源性血红素氧合酶-一氧化碳体系对反复热性惊厥脑损伤的影响
目的探讨内源性血红素氧合酶(HO)-一氧化碳(CO)系统对反复热性惊厥(febrile seizures,FS)脑损伤的影响.方法 21日龄SD大鼠24只,随机分为3组:对照组、FS组和FS+锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)组.采用热水浴诱导大鼠FS,隔日诱导1次,共诱导10次.用双波长分光光度计间接测定大鼠血浆中CO含量;记录大鼠惊厥强度、潜伏期、持续时间及惊厥时的肛温;HE染色观察海马神经元形态学改变;电镜观察海马神经元超微结构的改变;尼氏染色对海马神经元进行半定量计数分析.结果反复FS后,血浆CO含量明显高于对照组,FS+ZnPPⅨ组血浆CO含量较FS组低,与对照组比较无统计学意义;随着惊厥次数的增加,FS组大鼠惊厥持续时间呈延长趋势,FS+ZnPPⅨ组大鼠惊厥潜伏期呈缩短趋势,惊厥持续时间较FS组长,惊厥强度和惊厥时的肛温两组差异无统计学意义;反复FS后,光镜和电镜下均发现海马神经元出现损伤改变,ZnPPⅨ的干预加重了神经元的损伤;反复FS后未见海马神经元的丢失,ZnPPⅨ的干预导致了神经元的显著丢失.结论内源性HO-CO系统对反复FS脑损伤发挥着重要的保护作用.
关键词： 惊厥 发热性 海马 血红素氧化酶(脱环) 一氧化碳 -
血红素氧合酶1抑制剂锌原卟啉Ⅸ对小鼠急性病毒性心肌炎的作用
目的 探讨血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)对病毒性心肌炎小鼠心肌作用.方法 112只雄性Balb/C小鼠随机分为3组:对照组(C组)32只,心肌炎组(V组)和ZnPPⅨ组(Z组)各40只;通过感染CVB3复制心肌炎模型,每组小鼠分别于第4、8、15、21天处死并留取血清及心脏标本;观察心肌组织病理及细胞超微结构变化,分光光度计法检测血清中COHb含量,化学发光免疫法检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量检测,免疫组织化学法和原位杂交法检测心肌HO-1蛋白及mRNA的表达.结果 (1)心肌病变程度:V组及Z组炎症改变第8天明显,Z组炎症积分在第8天(1.73±0.24)及第15天(1.43±0.23)明显小于V组(P分别＜0.01和0.05);C组无炎症改变.(2)血清cTnI含量:V组及Z组血清cTnI含量在病毒感染后第4、8、15天均明显高于C组(P＜0.01),Z组第4及8天显著低于V组(P＜0.05).(3)血碳氧血红蛋白(COHb)含量变化:Z组及V组血COHb含量与C组比较,除Z组第4天与C组无明显差别外,其余各时间点2组均明显高于C组(P＜0.01);Z组在第4及15天COHb含量均低于V组(P分别＜0.05和0.01),但在第8天却明显高于V组(P＜0.01),第21天两组无差别.(4)HO-1免疫组织化学(IHC)结果:Z组及V组IHC染色阳性表达,C组染色阴性;Z组吸光度(A)值在第4及15天较V组明显降低(P值均小于0.01),第8天Z组却高于V组,但无统计学意义.(5)HO-1原位杂交结果(ISH):Z组及V组ISH染色阳性表达,C组染色阴性;Z组除在第8天高于V组(P＜0.05)外,其余各时间点均明显低于V组(P＜0.05或0.01).结论 HO-1抑制剂ZnPPⅨ在急性病毒性心肌炎的早期具有保护心肌损伤的作用.
关键词： 病毒性疾病 心肌炎 血红素氧化酶(脱环) 原卟啉类 一氧化碳 -
莲房原花青素改善老化大鼠学习记忆功能的机制
目的 观察莲房原花青素(LSPC)对老年脑老化大鼠学习记忆能力的影响,并探讨血红素氧合酶(HO)系统在其中的可能作用机制.方法 以40只4月龄年轻雌性SD大鼠Morris水迷宫实验第3～5天的平均潜伏期为基础,从100只18月龄雌性SD大鼠中筛选出老年认知功能正常(aged unimpaired,AU)大鼠(其平均潜伏期小于年轻大鼠平均潜伏期3个标准差)和老年认知障碍(aged impaired,AI)大鼠(其平均潜伏期大于年轻大鼠0.5个标准差).随机选取12只4月龄大鼠为年轻对照组,随机选取12只AU大鼠为AU组,随机选取36只AI大鼠并随机分为AI组、低剂量LSPC(L-LSPC,50 mg/kg)干预组、高剂量LSPC(H-LSPC,100 mg/kg)干预组.采用Morris水迷宫试验评估各组大鼠的学习记忆能力,采用ELISA法检测各组大鼠皮质、海马中HO-1及HO-2表达水平.结果 AI组大鼠Morris水迷宫实验平均潜伏期较年轻对照组大鼠明显延长(P＜0.05),L-LSPC和H-LSPC干预组大鼠第3～5天平均潜伏期和游泳距离均明显短于AI组(P＜0.05或P＜0.01).各组大鼠皮质HO-1和HO-2表达水平组间比较差异无统计学意义(均P＞0.05).各组大鼠海马组织HO-1和HO-2表达存在统计学差异(均P＜0.01),与年轻对照组和AU组比较,AI组大鼠海马HO-1水平明显升高(均P＜0.01),而海马HO-2水平降低(均P＜0.05);与AI组比较,L-HSPC和H-LSPC组海马HO-1水平降低(均P＜0.01),而海马HO-2表达水平升高(P＜0.01),且H-LSPC组升高海马HO-2水平较L-LSPC组更明显(P＜0.01).结论 LSPC可明显改善老年脑老化大鼠的记忆功能,其机制可能通过降低大脑海马组织HO-1水平、上调HO-2表达水平来发挥神经保护作用.
关键词： 记忆 原花青素类 认知障碍 血红素氧化酶(脱环) 水迷宫实验 -
血红素氧合酶-1/一氧化碳系统的变化对兔动脉粥样硬化进程的影响
目的研究食饵性动脉粥样硬化(AS)形成中,主动脉壁内血红素氧合酶-1(HO-1)活性及一氧化碳(CO)生成的变化及对AS进程的影响,以探讨HO-1/CO系统在AS进程中的作用.方法 32只新西兰大白兔,随机均分为4组.对照组:喂饲普通饲料;胆固醇组:喂饲含1.5%胆固醇饲料;卟啉锌组及血红素组:在予以高胆固醇饮食的同时,分别经腹腔注射氯化血红素(15mg*kg-1*d-1)或锌原卟啉-9(45μmol*kg-1*d-1),共12周.采血测定血脂、血清总胆红素(TBil)水平;取主动脉,测定CO生成量及HO-1活性,采用油红O染色及图像分析软件检测主动脉斑块面积.结果与对照组比较,胆固醇组主动脉CO生成量及HO-1活性显著增高(P均<0.01),实验结束时主动脉斑块面积达54.00%±4.16%;锌原卟啉-9显著降低了主动脉CO生成量及HO-1活性(P均<0.01),主动脉斑块面积达61.13%±3.50%;与胆固醇组比较,氯化血红素显著增高了血清TBil水平、主动脉CO生成量及HO-1活性(P均<0.01),主动脉斑块面积仅17.88%±3.01%(P<0.05).结论 HO-1/CO系统具有延缓AS的作用,HO-1活性增高可能是HO-1/CO系统发挥抗AS作用的基础.
关键词： 动脉硬化 一氧化碳 内源性 血红素氧化酶(脱环) -
血红素加氧酶-1/一氧化碳系统对急性肝损伤大鼠的防治作用
目的:研究血红素加氧酶-1/一氧化碳(HO-1/CO)系统对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠急性肝损伤的保护作用及其机制.方法: 随机将30只SD大鼠分成6组,即正常对照组、四氯化碳染毒组(CCl4)、hemin组、hemin+CCl4组、CO组和CO+CCl4组,每组5只大鼠.采用Western blot法测定HO-1蛋白的表达情况;测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,肝组织丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及caspase-3活性和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平变化;以HE染色观察肝组织病理形态学改变以及采用TUNEL法观察肝细胞凋亡情况.结果:CCl4成功诱导了大鼠急性肝损伤,表现为染毒24 h后血清ALT,AST水平(2 136.3±163.4 U,1 422.7±221.7 U)以及肝组织MDA浓度(5.28±0.93 μmol/g)、肝组织caspase-3活性(光密度值4.69±1.02)和TNF-α水平(256.3±27.3 ng/L)均显著升高,肝组织SOD活性(45.9±14.8 U/mg)下降,和正常对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01);病理学和TUNEL法检测结果均显示肝有严重损伤,大量肝细胞发生凋亡.给予hemin预处理能显著诱导大鼠肝HO-1的表达,并对肝产生明显的保护作用,表现为大鼠血清ALT,AST水平(287.1±24.3 U,246.2±21.7 U)和肝组织MDA浓度(3.27±1.34 μmol/g)明显降低,肝组织SOD活性(71.4±22.6 U/mg)升高,肝组织TNF-α水平(132.6±19.5 ng/L)和caspase-3活性(光密度值2.49±1.47)明显低于CCl4组;此外,hemin预处理亦使染毒大鼠的病理学指标得到明显改善,细胞凋亡的数目显著减少.腹腔注射低浓度CO亦能降低染毒大鼠ALT,AST水平和MDA浓度,抑制caspase-3活性和TNF-α水平,并使组织SOD活性升高,同时改善肝损伤程度,对肝产生明显保护作用.结论: HO-1诱导表达和给予外源性CO均对急性肝损伤大鼠产生明显的保护作用,提示HO-1/CO系统在防护急性肝损伤的病理生理过程中占有重要地位;HO-1/CO系统的保护机制可能与其减轻脂质过氧化反应,抑制caspase-3活性和降低TNF-α水平有关.
关键词： 血红素氧化酶(脱环) 一氧化碳 肝疾病 四氯化碳 -
硫化氢供体对实验性高肺血流性肺动脉高压及内源性一氧化碳/血红素氧合酶体系的影响
目的:探讨硫化氢供体--硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)对大鼠高肺血流性肺动脉高压及内源性一氧化碳(carbon monoxide,CO)/血红素氧合酶(heme oxygenase,HO)体系的影响.方法:将32只雄性SD大鼠随机分为分流组(n=8)、分流+NaHS组(n=8)、假手术组(n=8)和假手术+NaHS组(n=8).对分流组和分流+NaHS组大鼠行腹主动脉-下腔静脉穿刺建立高肺血流动物模型.分流11周后,测定肺动脉收缩压(systolic pulmonary artery pressure,SPAP)和肺组织CO含量;光镜下计算肺血管中肌型动脉(muscularized artery,MA)、部分肌型动脉(partially muscularized artery,PMA)和非肌型动脉(non-muscularized artery,NMA)百分比,以及肌型动脉的相对中膜厚度(relative medial thickness,RMT)和相对中膜面积(relative medial areas,RMA);电镜下观察其超微结构变化;应用蛋白质免疫印迹技术(Western blot)检测大鼠肺组织HO-1含量.结果:术后11周,分流组与假手术组比较,大鼠SPAP增高48.6%;肺MA和PMA百分比分别升高74.2%和90.9%,NMA百分比降低32.2%,在中型MA和小型MA中RMT分别升高83.6%和86.9%,RMA分别升高74.4%和39.9%;大鼠肺腺泡水平肌型动脉内皮细胞变性明显,内外弹力层不规则,平滑肌细胞体积增大,呈合成表型;大鼠肺组织CO和HO-1含量变化不明显.而分流+NaHS组与分流组比较,大鼠SPAP降低19.8%;肺MA和PMA百分比分别降低14.4%和12.2%,NMA百分比升高13.9%,在中型MA和小型MA中RMT分别升高16.2%和14.3%,RMA分别升高26.9%和14.3%;大鼠肺腺泡水平肌型动脉内皮细胞变性减轻;内弹力层比较规则;平滑肌细胞呈收缩表型;大鼠肺组织CO含量升高25.5%,HO-1蛋白表达升高114.3%.结论:NaHS可以缓解高肺血流性肺动脉高压形成和肺血管结构重建,其作用机制可能与调节内源性CO/HO-1体系变化有关.
关键词： 硫化氢 局部血流 肺 一氧化碳 血红素氧化酶(脱环) -
血红素氧化酶1与糖尿病的关联研究
目的 探讨血红素氧化酶1(HO-1)与2型糖尿病(T2DM)及其前期的关联性.方法 收集2010年6月至2012年6月行口服糖耐量试验可疑的T2DM患者384例,其中T2DM患者216例(T2DM组),糖尿病前期(HDM)患者168例(HDM组),T2DM患者分为单支病变组(122例)、双支病变组(54例)和多支病变组(40例).另选取健康体检者60例作为对照组.彩色多普勒超声诊断仪检测颈动脉内膜-中层厚度(IMT),酶联免疫吸附试验法检测血清HO-1表达水平.结果 对照组、HDM组和T2DM组血清HO-1表达水平分别为(1.24±0.53)、(2.12±0.84)、(3.46±1.23) μg/L,其中T2DM组显著高于HDM组和对照组(P＜0.05),HDM组又显著高于对照组(P＜0.05).单支病变组、双支病变组和多支病变组血清HO-1表达水平和颈动脉IMT比较差异有统计学意义[(2.94±1.14)、(3.72±1.36)、(4.64±1.58)μg/L和(1.21±0.16)、(1.44±0.20)、(1.62±0.27) mm](P＜ 0.05),其中双支病变组显著高于单支病变组(P＜0.05),多支病变组显著高于双支病变组和单支病变组(P＜0.05或＜0.01).相关性分析显示血清HO-1表达水平与颈动脉IMT呈显著正相关(r=0.512,P＜0.01).结论 HDM和T2DM患者中存在血清HO-1高表达,监测血清HO-1水平有利于T2DM的早期诊断.
关键词： 糖尿病 2型 血红素氧化酶(脱环) 糖尿病前期 -
血红素氧化酶-1在鼠异种肝移植中的抗排斥作用及其机制研究
目的探讨血红素氧化酶-1(HO-1)在异种肝移植中的作用及其机制方法采用豚鼠对大鼠肝移植模型,实验动物分为3组,每组10对鼠.A组供体鼠术前24 h腹腔注射5 ml/kg生理盐水作为对照;B组供体术前24 h腹腔注射HO-1诱导剂钴原卟啉(CoPP),C组供体注射CoPP 的同时给予HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPP).每组受体均接受眼镜蛇毒因子(CVF).分别以RT-PCR和western印迹法观察HO-1 mRNA及蛋白表达.通过凝胶电泳迁移率改变法(EMSA)检测移植肝核转录因子(NF)-κB的活化,免疫组化观察E-选择素表达,来评价HO-1对内皮细胞活化的抑制作用.并比较各组受体鼠存活时间.结果各组均未发生超急性排斥反应.CoPP 预处理可以诱导HO-1 mRNA和蛋白过度表达,进而显著抑制移植肝内NF-κB的活化和内皮细胞E-选择素表达;B组与(0.112±0.039) A组(0.211±0.030)、C组(0.283±0.075)相比差异有统计学意义(P<0.05).HO-1过度表达组与其它组相比,移植肝内皮细胞肿胀减轻,浸润细胞数减少,肝脏功能改善,而且受体鼠存活时间显著延长;B组(15.5 h±3.8 h)比A组(7.3 h±2.1 h)差异有统计学意义(P<0.01).这种保护效应可被同时给予HO-1抑制剂ZnPP所取消;B组比C组(6.7 h±2.9 h)差异有统计学意义(P<0.01).结论 HO-1通过抑制内皮细胞活化,延缓异种移植肝排斥反应发生.
关键词： 肝移植 移植 异种 移植物排斥 血红素氧化酶(脱环)
