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siRNA腺病毒体内抑制Survivin基因表达诱导裸鼠肿瘤细胞凋亡的研究
目的 利用腺病毒siRNA载体介导的RNA干扰技术,在免疫缺陷鼠肝癌肿瘤动物模型中通过靶向沉默细胞凋亡因子Survivin的表达,探讨其在活体动物肿瘤组织中的作用.方法 利用肝癌细胞株HepG2构建裸鼠肝癌肿瘤细胞动物模型,并按照病毒注射剂量分组,将已构建的Survivin-siRNA重组腺病毒注射入裸鼠肿瘤内,观察肿瘤生长状况并绘制肿瘤生长曲线,利用TUNEL反应测定肿瘤组织细胞内DNA的片段化观察细胞凋亡.结果 注射AdsiRNA-Survivin高、低剂量组肿瘤生长明显受到抑制,且抑制程度与注射的腺病毒浓度呈正相关;TUNEL实验表明注射AdsiRNA-Survivin高、低剂量组的肿瘤组织标本可见大量细胞核呈黄褐色、核质浓缩、细胞形态不规则的凋亡细胞.高剂量组、低剂量组、AdsiRNA-U6组、PBS组凋亡细胞数依次减少.结论 腺病毒siRNA载体系统可应用于活体动物试验中;AdsiRNA-Survivin对裸鼠人肝癌移植瘤有明显抑制作用,与肿瘤感染数或浓度成正比,且能促进人肝癌肿瘤细胞的凋亡.
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人类前列腺癌LNCaP细胞株荷瘤裸鼠模型的建立及紫杉醇治疗的实验研究
我们选用人类前列腺癌LNCaP细胞株建立了人类前列腺癌裸鼠动物模型,观察紫杉醇对雄激素非依赖性前列腺癌细胞LNCaP-C4-2荷瘤裸鼠肿瘤的影响,探讨其可能的作用机理.材料与方法动物模型的建立:LNCaP人前列腺癌细胞株来源于北京市卫生局泌尿外科研究所实验室,包括雄激素依赖性LNCaP-C4细胞和雄激素非依赖LNCaP-C4-2细胞.
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氧自由基对体内生长胆管癌细胞增殖的影响
为探讨胆管癌细胞内氧自由基浓度与体内培养胆管癌细胞增殖的关系,我们利用体外培养的胆管癌细胞QB,建立裸鼠动物模型,检测不同浓度的氧自由基对动物体内生长胆管癌细胞增殖的影响.
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乙型肝炎病毒X基因促进肝癌组织血管内皮生长因子的表达
乙型肝炎病毒(HBV)感染与肝癌的发生密切相关,而乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)在肝癌的发生和进展中起重要作用.血管内皮生长因子(VEGF)在肝癌细胞中普遍表达,与肝癌的生长和浸润有关.本研究通过建立表达HBx的肝癌动物模型,探讨HBx与肝癌组织VEGF表达的关系.
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乳腺癌反义基因治疗动物模型建立的研究
目的建立一种简便、可靠的荷人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤裸鼠动物模型,以供survivin反义寡核苷酸对乳癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用研究.方法常规培养MCF-7人乳腺癌细胞株细胞,注射于30只雌性裸鼠右前肢腋下皮下,以移植后肿瘤体积生长到直径为0.5cm为成瘤,并将这些实验动物分成3组分别以阳离子脂质体、硫化反义寡核苷酸(ASODN)或无义寡核苷酸在不同时间对荷瘤裸鼠的瘤体及瘤周注射3次.观察肿瘤抑制率、细胞凋亡率及细胞凋亡情况.结果成功建立了荷人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤裸鼠动物模型,应用Survivin反义核酸技术实验治疗发现ASODN/Lip组抑瘤率达70.1%,细胞凋亡率为38.6%,与其他两组比较有显著性差异(P<0.05).结论应用裸鼠前肢腋下皮下注射法建立的荷人乳腺癌MCF-7细胞移植动物模型方法简便,成瘤率高,可用于对人乳腺癌反义基因治疗的动物实验研究.