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乳腺浸润性导管癌组织CUEDC2表达及其分子分型的意义
目的 探讨CUEDC2在乳腺浸润性癌组织中的表达特点及与临床病理特征、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、增殖抗原(Ki-67)和人表皮生长因子受体2(Her-2)基因扩增情况的关系.方法 采用免疫组化检测163例乳腺不同病变组织中CUEDC2、ER、PR、Ki-67和Her-2的表达水平,FISH技术检测Her-2基因扩增情况,结合患者相关资料进行分析.结果 CUEDC2在乳腺浸润性导管癌、乳腺导管内癌的阳性率分别为72.8％、63.3％,明显高于正常乳腺组织的10％,差异显著(P＜0.05).CUEDC2表达水平与浸润性导管癌患者的淋巴结转移、组织学分级有明显相关性(P＜0.05),与年龄、肿瘤大小、临床分期无关(P＞0.05).在浸润性导管癌不同分子亚型中,luminalA型CUEDC2表达率低,三阴型高(P＜0.05).CUEDC2表达水平与ER(r=-0.703,P＜0.05)、PR(r=-0.798,P＜0.05)表达程度呈负相关;与Ki-67(r=0.414,P＜0.05)表达、Her-2基因扩增(r=0.359,P＜0.05)表达程度呈正相关.结论 CUEDC2表达与乳腺癌的发生、发展、转移及分子分型有关,其高表达是预后不良的预测因子.
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CUEDC2在卵巢浆液性癌组织中的表达及与临床病理特征的关系
目的 探讨CUEDC2在卵巢浆液性癌中的表达特点及其与临床病理参数及预后的关系.方法 对47例卵巢浆液性癌手术切除标本,采用两级病理分级系统判定组织学分级;采用免疫组化EnVision二步法检测癌组织中CUEDC2表达,结合病例随访结果分析CUEDC2与卵巢浆液性癌发生、发展的关系.结果 ①47例卵巢浆液性癌病例中,28例CUEDC2呈(+),阳性率为59.6％.②CUEDC2在高级别(HG)组中阳性率(66.7％)明显高于低级别(LG)组(25％),差异显著(P＜0.05);CUEDC2表达与年龄、nG0分期及淋巴结有/无转移无相关性(P＞0.05).③CUEDC2阳性组的肿瘤复发率及死亡率均高于CUEDC2阴性组,但单因素生存分析显示两组患者无瘤生存时间及总生存时间无显著差异(P＞0.05).结论 卵巢浆液性癌的病理级别越高,CUEDC2的阳性率越高,CUEDC2阳性可作为预后不良的预测因子.
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卵巢浆液性癌临床病理特征及Ki-67、CyclinB1、CUEDC2和NAC1的表达
目的 探讨卵巢浆液性癌临床病理特征及Ki-67、CyclinB1、CUEDC2和NAC1表达,为建立早期有效的临床诊断和治疗卵巢浆液性癌方法提供参考.方法 选择2015年3月-2017年10月在台州市第一人民医院病理诊断为卵巢浆液性癌患者79例作为研究对象,采用免疫组化法检测患者的Ki-67、CyclinB1、CUEDC2和NAC1阳性表达,观察卵巢浆液性癌临床病理特征,比较不同病理分级、不同分期和淋巴结转移Ki-67、CyclinB1、CUEDC2和NAC1阳性表达情况.结果 卵巢浆液性癌79例患者中以腹部胀痛和包块为主要症状,病理分级中以高级别为主占75.95％,FIGO分期中以Ⅲ～Ⅳ期为主占70.89％,淋巴结转移中以无淋巴结转移为主占65.82％.高级别Ki-67、CyclinB1、CUEDC2和NAC1阳性率高于低级别,差异有统计学意义(P＜0.05).Ⅲ～Ⅳ期Ki-67、CyclinB1、CUEDC2和NAC1阳性率高于Ⅰ～Ⅱ期,差异有统计学意义(P＜0.05).淋巴结转移Ki-67、CyclinB1、CUEDC2和NAC1阳性率高于无淋巴结转移,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 卵巢浆液性癌临床病理特征以高级别、Ⅲ～Ⅳ期和无淋巴结转移为主,且Ki-67、CyclinB1、CUEDC2和NAC1呈高表达,随着病情进展阳性表达率越高,值得临床研究.
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人Cuedc2启动子区的克隆与鉴定
目的:克隆并鉴定和分析人Cuedc2启动子,为进一步研究其转录调控机制和功能提供实验基础.方法:对Cuedc2基因翻译起始位点上游约2000bp的序列进行在线生物信息学分析,使用PCR技术扩增该序列并测序,将扩增获得的该片段定向克隆入PGL-3basic载体中,构建荧光素酶报告基因质粒Cuedc2-1uc.荧光素酶分析检测启动子的活性.结果:本实验成功构建了含有Cuedc2基因启动子序列的荧光报告系统,经体外验证该报告基因重组载体具有转录活性.结论:本实验所构建的Cuedc2基因启动子报告基因载体,为进一步研究Cuedc2基因的转录调控及其功能奠定了基础.
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人Cuedc2真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达
目的:构建人Cuedc2的真核表达载体,并进行体外验证.方法:提取人卵巢癌细胞总RNA,通过RT-PCR的方法其反转录为cDNA;以之为模板,利用PCR获得Cuedc2的编码区,纯化后克隆入pcDNA3.1 myc-his(-),利用菌落PCR及DNA测序进行鉴定.后,采用瞬时转染的方法,将所构建的重组CUEDC2真核表达载体通过脂质体转染HEK293细胞,48h后通过western blot检测Cuedc2蛋白的表达.结果:Cuedc2编码区cDNA正确地插入真核表达载体pcDNA3.1 myc-his(-)中,western blot检测证实其在HEK293细胞中表达,而空载体转染的细胞为阴性,表明所构建的pcDNA3.1 myc-his(-)-Cuedc2能够在体外有效表达.结论:本研究成功地克隆了人Cuedc2 cDNA,构建了重组真核表达载体,并在HEK293细胞中有效表达,为进一步研究人Cuedc2的功能及其与肿瘤的关系奠定了实验基础.
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CUEDC2在不同侵袭迁移能力结直肠癌细胞系中的表达
目的 探讨CUEDC2(CUE domain containing 2)在不同侵袭、迁移能力结直肠癌细胞系中的表达.方法培养结直肠癌细胞系SW480、SW620和LOVO,Transwell小室实验检测结直肠癌细胞系的侵袭、迁移能力,Real-Time PCR与Western Blot分别检测CUEDC2的mRNA及蛋白水平的表达.结果 结直肠癌细胞系SW480、SW620、LOVO侵袭、迁移能力逐渐增强,差异具有统计学意义(均P<0.05).结直肠癌细胞系SW480、SW620、LOVO表达CUEDC2mRNA依次增加,LOVO、SW620表达量明显高于SW480,差异具有统计学意义(P<0.05).结直肠癌细胞系SW480、SW620、LOVO的CUEDC2蛋白表达量依次增加,LOVO、SW620表达量明显高于SW480,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 随着结直肠癌细胞侵袭迁移能力的增加,CUEDC2的表达水平具有增加的趋势.CUEDC2可能具有促进结直肠癌细胞系侵袭迁移的作用,有望成为潜在的预测结直肠癌侵袭转移的标识蛋白.
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CUEDC2对梗阻性肾病小鼠肾组织炎症反应及间质纤维化的作用
目的：研究CUEDC2对单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾组织炎症反应及间质纤维化的作用。方法：Balb／c 小鼠30只，随机分为假手术组、UUO组和CUEDC2治疗组。 HE 及Masson 染色观察肾脏病理改变；ELISA法检测炎症因子表达；免疫组化法检测肾组织CUEDC2表达；Western Blot检测CUEDC2、纤连蛋白（Fibronectin）、钙黏蛋白（E-cadherin）、胶原蛋白I型（Collagen I）表达。结果：术后7、14 d，CUEDC2治疗组的肾间质纤维化相对面积、炎症因子 ICAM1、MCP1、IL-1、IL-8表达及 Fibronectin、Collagen I 表达均较 UUO 组明显减少（P ＜0．05），E-cadherin 表达明显增加（P ＜0．05）。结论： CUEDC2可以抑制多种炎症因子表达，减少间质胶原沉积，减轻肾脏纤维化。
关键词： CUEDC2 Collagen I 炎症因子肾间质纤维化 -
CUEDC2在糖尿病肾病小鼠肾脏中表达及其与24h尿白蛋白、血肌酐的相关性
目的:研究CUEDC2在糖尿病肾病小鼠肾脏中的表达、定位及与肾功能相关性.方法:选用db/db小鼠为实验组,db/m小鼠为对照组,相同饲养条件下,24周时取组织样本;采用PAS,HE及Masson染色观察肾脏病理改变;Western Blot,免疫组织化学法,Real time PCR检测肾组织CUEDC2的表达、定位;由本院检验科测定血肌酐、24 h尿白蛋白.结果:CUEDC2蛋白表达定位于肾小管上皮细胞中.24周时,db/db小鼠出现肾小球硬化,肾间质增宽、炎症细胞浸润;较同期db/m小鼠,系膜基质明显扩张,肾小球及肾小管间质胶原染色增多,肾组织CUEDC2蛋白及mRNA均下调(P＜0.05).db/db小鼠肾脏中CUEDC2含量分别与24 h尿白蛋白与血肌酐呈明显负相关(P＜0.05).结论:CUEDC2在糖尿病小鼠肾脏中下调,并与尿白蛋白、血肌酐含量呈负相关.
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CUEDC2蛋白研究进展
CUEDC2是由国内学者张学敏于2007年首次报道的一种蛋白分子,由于其能够促进孕激素受体发生降解,引起了研究者的极大兴趣。随着研究的不断深入,CUEDC2在一些细胞重要的生理调控活动中发挥的关键性作用被相继阐明。目前发现,CUEDC2参与了细胞周期调控和细胞信号转导,并与某些肿瘤的发生发展密切相关。根据现有相关文献,对CUEDC2的结构以及有关功能的研究进展进行综述。
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CUEDC2通过活化 PI3K／Akt 信号通路促进乳腺癌细胞的生长
目的：探讨 CUE 结构域2（CUE domain －containing 2，CUEDC2）蛋白在人乳腺癌细胞中的生物学作用。方法：人乳腺肿瘤细胞 MCF －7转染的 Myc －CUEDC2真核表达载体，提取转染细胞的总蛋白检测磷酸化 Akt 和总 Akt 的表达变化。利用 CCK －8检测过表达 CUEDC2后 MCF －7细胞的生长。结果：CUEDC2能够活化 Akt，使磷酸化 Akt 表达增加，能够促进人乳腺癌细胞生长。结论：当乳腺癌中 CUEDC2表达增高时，能够引起 PI3K／Akt 信号通路活化，促进肿瘤细胞生长。
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抗CUEDC2单克隆抗体的制备及小鼠组织CUEDC2表达谱的检测
目的 制备特异性识别CUE结构域蛋白2(CUE domain containing 2, CUEDC2)的单克隆抗体(mAb),并检测CUEDC2蛋白在小鼠组织中的表达.方法 在大肠杆菌中融合表达GST-hCUEDC2蛋白,纯化后免疫小鼠,制备mAb.采用Western blot方法检测mAb的特异性以及小鼠组织中CUEDC2蛋白的表达.结果 获得了可同时识别人源和鼠源CUEDC2 mAb,利用此mAb检测小鼠组织CUEDC2蛋白的表达水平,发现该蛋白的表达在不同小鼠组织中存在差异.结论 制备的CUEDC2 mAb特异性好,并可检测CUEDC2蛋白在小鼠组织中的表达,该mAb的制备为进一步研究CUEDC2的功能奠定了基础.
