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生物芯片、生物信息学与高通量中药活性筛选
药物筛选是一个采用适当方法与分析手段对候选物质药理活性评价的主动寻找药物的过程.高通量筛选技术是20世纪80年代后期形成的寻找新药的高新技术,其有3大技术支持,即组合化学、遗传学和高通量筛选,分别为新药开发提供新化合物源,新的作用靶标和大规模的筛选方法.后两者相辅相成,构成较为完整的筛选体系,即基于疾病机理,选择特定生物分子作为靶标的高通量筛选.目前机理筛选一般有两种模式,一种是直接检测化合物对生物大分子如受体、酶、离子通道、抗体等的结合及作用;另一种是检测化合物作用于细胞后基因表达(尤其是mRNA)的变化.不论何种筛选模式,其关键问题是药物靶标的确定和筛选效率的提高,生物芯片及相关技术的出现将在药物筛选的关键问题上发挥巨大的作用,不仅可促进药物基因组学的发展,尤其是对中药活性物质的筛选和方剂作用原理的研究提供有力的技术支撑.
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抗ALT抗体间接ELISA检测方法的建立
目的 建立免疫小鼠体内抗人丙氨酸氨基转移酶(ALT)抗体的间接ELISA检测方法,以期作为融合后杂交瘤细胞株的筛选体系.方法 利用人ALT为包被抗原,以1:40 000稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG为二抗,采用棋盘滴定法确定抗原和对照血清(阴性、阳性)佳工作浓度及ELISA封闭液的浓度建立ELISA体系.结果 包被抗原和血清的适宜浓度或稀释度分别为1:5 000和1:1 000;用4%BSA封闭18 h~z4 h效果好.结论 建立的ELISA方法稳定,简便易行,能准确检测免疫小鼠血清抗体的效价,并可用于抗ALT单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选.
关键词: 丙氨酸氨基转移酶(ALT) 单克隆抗体 间接ELISA 筛选体系 -
遗传性息肉病的分子遗传学及临床病理学研究进展
结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,近年来发病率上升显著.分子生物学的研究表明,结直肠癌发生、发展受环境、生活习惯及遗传因素三者的共同作用.约15%的结直肠癌为家族性,以遗传性非息肉病性结直肠癌(hereditary non-polyposis colorectal cancer,HNPCC)及家族性腺瘤性息肉病(familial adenomatous polyposis,FAP)常见.近年来,还陆续发现了一些新的家族性结直肠癌.家族性结直肠癌多伴肠道多发性息肉(息肉病,polyposis).加深对息肉病的认识,对于结直肠癌的筛查、防治意义深远.我们介绍结直肠息肉病的分子遗传学及临床病理学研究进展,旨在引起大家的关注和深入研究,以期建立适合我国国情的家族性结直肠癌分子遗传学及临床病理诊断、筛选体系,采取切实、有效的防治措施.
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人骨肉瘤组织血管特异性亲和肽的筛选和测序分析
噬菌体呈现技术是一种高效的筛选体系.本研究旨在以人骨肉瘤组织血管为靶,对噬菌体随机肽库进行淘筛,阳性克隆经过测序分析,得到保守短肽序列,为骨肉瘤的靶向化疗打下基础.
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现代新药筛选体系和高通量筛选技术的研究及应用
随着分子生物学技术的不断发展,新的药物作用靶点不断涌现,新药研究与开发的竞争日趋激烈,发达国家竞相发展高效筛选的技术,并将机器人等自动化技术应用到新药筛选领域产生了通常所说的高通量药物筛选.高通量筛选具有快速、微量、高效、经济的特点,是近年来各大制药公司和药物研究机构在药物研究早期阶段的重中之重.