肺炎链球菌感染与对策

肺炎链球菌是社区获得性肺炎的重要致病菌,同时也是引起中耳炎、副鼻窦炎、脑膜炎的主要致病菌,已知有80多个血清型,其主要致病物质为荚膜和溶血素.肺炎链球菌对β-内酰胺类抗生素的耐药主要与细菌PBP变异有关,对大环内酯类药物的耐药机制主要为核糖体靶位改变和主动外排机制,对氟喹诺酮类药物的耐药则主要与拓扑异构酶Ⅳ或DNA促旋酶的变异有关.目前耐青霉素肺炎链球菌已在世界范围内广泛流行,我国耐青霉素肺炎链球菌的分离率较低,但有逐年上升趋势.除香港等个别地区外,肺炎链球菌对新氟喹诺酮类药物的耐药率目前仍处于较低水平.接种肺炎链球菌多价荚膜多糖疫苗可减少其感染及携带率.在肺炎链球菌感染的治疗方面,大剂量的青霉素或氨苄西林对青霉素低度耐药的肺炎链球菌(PISP)感染仍然有效,对青霉素高度耐药的肺炎链球菌(PRSP)感染则可选用头孢噻肟、头孢曲松、新喹诺酮类药物、万古霉素等.我国肺炎链球菌对大环内酯类抗生素有较高的体外耐药率,但体内疗效尚待进一步研究.

肺炎链球菌抗生素耐药的流行病学及机制的研究进展

肺炎链球菌是儿科社区获得性呼吸道感染常见病原菌,近年来,来自世界各地的多数文献报道肺炎链球菌对常用抗生素耐药性迅速增加,本文综述了肺炎链球菌对青霉素类、大环内酯类、氟喹诺酮类、四环素、氯霉素、及SMZ/TMP耐药和万古霉素的耐受的发生、发展及耐药机制的研究进展.同时,介绍了2000～2001年北京、上海、广州、西安四地急性上呼吸道感染儿童鼻咽部肺炎链球菌分离株对常用抗生素敏感性监测情况.

上海地区儿童肺炎链球菌耐药性研究

目的了解上海地区2001年小儿社区获得性呼吸道感染患儿肺炎链球菌(SP)耐药情况,以指导临床抗生素合理使用.方法用Kirby-Bauer法和E-test法检测100株SP对青霉素等10种抗菌药物敏感性.结果SP总分离率29.1%;SP对青霉素耐药率55%,低抑菌浓度(MIC90)0.75mg/L,MIC均值0.06mg/L;对阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸和头孢曲松呈低耐药率,分别为3%、3%和6%;对头孢克洛耐率15%;对头孢呋辛29%.SP对氯霉素耐药34%,而对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、红霉素和四环素均呈高度耐药,达80%～82%.结论小儿SP耐药率远远高于成人,但阿莫西林和头孢曲松依然敏感,抗生素合理使用是重要的.

成都地区肺炎链球菌对抗菌药物的耐药性调查

目的了解成都地区临床分离的肺炎链球菌的耐药性,为肺炎链球菌感染临床合理应用抗菌药物提供理论依据.方法二倍琼脂稀释法测定11种抗菌药物对肺炎链球菌的低抑菌浓度(MIC).结果 91.94%菌株对青霉素敏感,8.06%中度耐药;88.71%菌株对SMZ/TMP敏感,11.29%中度耐药;肺炎链球菌对头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟、氧氟沙星、司帕沙星、美洛培南、万古霉素敏感率为100%;对红霉素、克林霉素耐药率相当高,分别达到62.90%和74.19%.结论成都地区肺炎链球菌对青霉素耐药率较低,而对大环内酯类和克林霉素类耐药率较高.

临床分离的肺炎链球菌耐药性分析及多位点序列分型

目的 了解泉州地区临床分离的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)的耐药性特征及多位点序列分型(multilocus sequence type,MLST).方法 针对45株临床分离的SP用E-test法和纸片扩散法检测菌株对14种常用抗菌素的敏感性,以PCR方法检测耐药基因ermB、mefE、mefA及转座子家族intTn916/Tn1545转座酶基因,采用多位点序列分型(MLST)技术分析菌株序列型(ST).结果 SP对红霉素、克林霉素、复方磺胺甲噁唑、四环素、青霉素、头孢噻肟、头孢吡肟、美罗培南、阿莫西林、氯霉素、左氧氟沙星的耐药率分别97.8％、93.3％、73.3％、82.2％、26.7％、44.4％、42.1％、26.7％、24.4％、11.1％和4.4％,未见对替考拉宁、利奈唑胺和万古霉素的耐药性;耐药基因ermB、mefE、mefA及转座子家族intTn916/Tn1545转座酶检出率分别为97.78％、51.11％、44.44％和91.11％;MLST共分出21个ST型,存在一个优势型别ST271,占44.4％(20/45);ST271在mef耐药基因检出率要高于其它散在STs,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 本地区分离的SP耐药较为严重,且更多的表现为多重耐药;耐药机制主要表现为ermB编码的23S rRNA甲基化酶致靶位改变以及intTn916/Tn 1545接合性转座子介导的耐药传播;ST271是本地区分离SP的主要ST型,并且以多重耐药为主.

2009-2014年重庆地区儿童感染肺炎链球菌的耐药性及血清分型研究

目的 了解重庆地区儿童2009-2014年肺炎链球菌对常用抗菌药物的耐药性及血清型分布.方法 分析2009-2014年从临床感染患者标本中检出的11671株肺炎链球菌的分布特征,采用BD Phoenix 100测定肺炎链球菌对18种抗菌药物的药敏试验,按美国临床实验室标准化委员会(CLSI)标准判断结果.荚膜肿胀试验进行血清学分型,并计算疫苗(PCV 7、PCV 11、PCV 13)覆盖率.结果 6年共分离肺炎链球菌11671株,检出率为14.37％;＜2岁组肺炎链球菌分离率为50.7％,2～5岁和＞5岁组的分离率30.8％和18.5％,81.5％的分离株在≤5岁年龄段;未检出耐万古霉素和替考拉宁的肺炎链球菌.肺炎链球菌对利奈唑胺、左氧氟沙星、氧氟沙星、利福平和泰利霉素的耐药率低,分别为:0.02％、0.21％、0.08％、1.13％和3.15％;对四环素、阿奇霉素、红霉素、克林霉素、复方磺胺甲噁唑的耐药率均＞70％以上.2009-2014年肺炎链球菌对美罗培南、左氧氟沙星和利奈唑胺的耐药率无明显改变(P＞0.05),其余受试药物的耐药率均有明显改变(P＜0.05).600株肺炎链球菌共鉴定出20个血清型,常见的肺炎链球菌血清型为19F、19A、6B、23F,PCV 13覆盖率为75.5％.结论 肺炎链球菌是导致重庆地区儿童呼吸道感染的重要病原菌,对不同抗生素的耐药性不同,并随着时间而变化,应重视细菌耐药性监测,根据药敏试验结果合理选用抗菌药物.重庆地区肺炎链球菌临床分离株以19F、19A、6B、23F血清型为主,推荐PCV 13疫苗预防肺炎链球菌感染.

2006-2014年我院1109例肺炎链球菌感染及其耐药模式分析

目的 了解我院分离到的肺炎链球菌的标本来源和耐药模式,为临床经验诊治提供参考.方法 肺炎链球菌的鉴定采用奥普托欣试验和乳胶凝集试验,药物敏感试验采用Kirby-Bauer法或微生物鉴定及药敏分析系统VITEK2,青霉素低抑菌浓度检测采用E-test法.结果 2006年7月1日至2014年6月30日共分离到肺炎链球菌1109株,707株(63.8％)来自男性,402株(36.2％)来自女性.患儿的年龄分布为1d～14岁,平均为(2.12±2.41)岁,其中小于1岁489例(44.1％),1～3岁366例(33.0％).939株(83.5％)菌株来自痰液培养,68株(6.1％)来自血培养,33株(2.9％)来自脑脊液培养,113例(10.2％)患儿有先天性心脏病基础疾病.菌株分离的季节以冬季多,共351株(35.9％),夏季少,共142株(14.5％).菌株(含脑膜炎株)对青霉素的敏感、中介和耐药率分别83.5％、12.5％和4.0％.青霉素MIC范围为0.006～16μg/mL,MIC50为1μg/mL,MIC90为3μg/mL.菌株对头孢曲松、头孢噻肟、左氧氟沙星、利福平和氯霉素的耐药率处于较低水平,分别为3.1％、4.4％、0.5％、2.0％和3.5％,对万古霉素、厄他培南和利奈唑胺的敏感率为100％;菌株对四环素、复方磺胺甲噁唑、克拉霉素、红霉素的耐药率则分别高达76.9％、80.6％、92.6％和93.8％;多重耐药性菌株共725株(65.4％),同时耐红霉素、四环素、复方磺胺甲噁唑和克林霉素占53.4％.结论 我院分离的肺炎链球菌主要来自呼吸道标本,菌株对青霉素的耐药性处于较低水平,青霉素是治疗肺炎链球菌感染价廉而有效的药物.

2012年中国西南地区Whire Union革兰阳性球菌耐药性监测

目的 了解2012年中国西南地区Whire Union监测网络医院临床分离的革兰阳性球菌临床分布及耐药情况.方法 西南地区3家教学医院对临床分离的革兰阳性球菌采用VITEK-2微生物自动鉴定仪(生物梅里埃,法国)或Walkaway 96SI微生物自动鉴定仪(西门子,德国)以及相应复合药敏板卡进行细菌鉴定和药敏试验.采用WHONET 5.5和SPSS16软件进行统计分析.结果 分离革兰阳性球菌4071株,其中葡萄球菌属占67.9％(2764株),肠球菌属占20.2％(822株),链球菌属4.9％(199株).阳性标本3933份,位列前3位的标本分别为分泌物/脓(27.4％),血液(19.3％)和痰液(17.5％).MRSA和MRCNS的分离率分别为38.4％和83.9％.未发现万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌.屎肠球菌总体耐药率高于粪肠球菌.屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素的耐药率分别为5.9％和0.8％;对利柰唑胺的耐药率分别为2.7％和2.1％.青霉素对肺炎链球菌仍具有较高的敏感率(＞95％).结论 革兰阳性球菌引起的感染在临床占有一定的比例,万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌、肠球菌、链球菌仍有很高抗菌活性.治疗粪肠球菌引起的严重感染可选择联合用药方案,以减少糖肽类抗生素的耐药压力.青霉素仍是治疗肺炎链球菌相关肺炎的首选药物.分析革兰阳性球菌耐药信息可为临床提供治疗参考,也有利于控制细菌耐药性蔓延.

肺炎链球菌组氨酸激酶VicK的全长表达及其保守性分析

目的 全长表达肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)VicK蛋白并制备其多克隆抗体,对其进行保守性分析和亚细胞定位,为其作为抗菌药物筛选靶点提供实验依据.方法 利用分子生物学技术构建pET-28a(+)-vicK原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中进行表达,经Ni-NTA亲和纯化后,通过试剂盒检测其激酶活性.将纯化的VicK蛋白免疫Balb/C小鼠,并用ELISA和Western blot方法分别检测其多克隆抗体的效价及特异性.采用流式细胞术对VicK蛋白进行表面定位分析.结果 成功获得VicK全长蛋白,酶活性检测结果提示具有ATP激酶活性.VicK蛋白免疫小鼠获得效价达1:125000以上的多克隆抗体.Western Blot结果显示其能特异地识别1型、2型、3型、4型、6B及19F型S.pn中的VicK蛋白.流式结果表明VicK蛋白主要位于胞内.结论 获得具有ATP激酶活性的S.pn VicK全长蛋白,且该蛋白保守表达于S.pn胞内.

应用CLSI新的折点值标准判读儿童分离的肺炎链球菌非脑膜炎株的耐药性

目的 应用美国临床和实验室标准化研究所(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)新的折点值标准,比较2001—2002年和2008年儿童分离的肺炎链球菌非脑膜炎株对青霉素及其它抗生素的耐药情况.方法 肺炎链球菌的药物敏感试验采用Kirby-Bauer法,青霉素低抑菌浓度检测采用E-test法,药敏结果参照2010年CLSI M100-S20版指南判读；组间率的比较采用x2检验.结果 2008年度83.7％的菌株对青霉素敏感,15.1％中介,1.2％耐药,青霉素MIC50和MIC90分别为1.0μg/mL和3.0μg/mL; 2001～2002年97.5％的菌株对青霉素敏感,2.5％中介,无耐药株,青霉素MIC50为0.064μg/mL,MIC90为1.5μg/mL,两者耐药率有显著性差异(x2=23.48,P＜0.05).所有菌株对万古霉素敏感.菌株对红霉素的耐药率高,在两个时期分别达92.2％和91.4％.结论 本地区2008年度分离的肺炎链球菌对青霉素的敏感率较2001～2002年明显下降,但总体敏感率仍维持在较高水平,青霉素仍可作为治疗该菌颅外感染的一线有效药物.

重庆地区临床分离肺炎链球菌血清型及耐药分析基因多态性

目的 了解重庆地区的临床分离肺炎链球菌的常见血清型分布及其耐药情况,并对常见血清型菌株和其它血清型菌株的耐药情况进行比较.方法 应用荚膜肿胀实验检测2006年1月～2008年8月临床分离的143株肺炎链球菌的血清型,并采用琼脂稀释法检测常用抗菌药物的低抑菌浓度(MIC).结果 总的常见血清型为型/群为19群、6群、5型、10群、15群,但从成人分离的菌株常见血清型为19群、10群、5型、33群,儿童则以19群、6群、15群和23群血清型为主.143株菌对阿奇霉素、克林霉素、左氧氟沙星、头孢唑林、青霉素的耐药率(耐药+中介)分别是97.9%、95.8%、4.2%、0.7%、58.1%,对于青霉素的敏感率是42%.常见血清型肺炎链球菌对5种抗菌素的耐药率(耐药+中介)分别是:97.7%、97.7%、1.1%、3.4%、72.4%;其它血清型菌的耐药率分别是:98.2%、92.9%、5.4%、0、35.7%.;仅青霉素耐药率有统计学意义差别.结论 重庆地区临床分离的肺炎链球菌的常见血清型与其它地区报道有一定差别.对左氧氟沙星、头孢唑林耐药率低,对青霉素的耐药率与国内报道接近,但对于阿奇霉素及克林霉素的耐药率高.常见血清型肺炎链球菌对青霉素的耐药率明显高于其它血清型.

去甲万古霉素在耐青霉素肺炎链球菌引起的兔脑膜炎中的治疗评价

目的静脉注射不同剂量的去甲万古霉素,了解其在耐青霉素肺炎链球菌引起的兔脑膜炎模型中的脑脊液透过率;比较不同剂量药物的杀菌效果;同时研究去甲万古霉素与磷霉素联合用药在体内、体外是否具有协同作用.方法脑膜炎模型的建立参照Dacey和Sande的方法并做了改进;抗生素浓度的测定采用微生物效价测定法;体外联合药敏实验采用棋盘设定微量肉汤稀释法.以8h内的平均杀菌率评估体内联合用药.结果在兔脑膜炎模型中,去甲万古霉素的脑脊液透过率为19.6%;40mg/kg去甲万古霉素单次静脉注射(0h)平均杀菌率为(-0.93±0.26)△lgCFU/(ml·h);20mg/kg去甲万古霉素两次静脉注射(0,4h)平均杀菌率为(-0.57±0.45)△lgCFU/(ml·h).体外联合药敏实验表明磷霉素与去甲万古霉素联合应用表现为相加作用占25%,无关作用占75%,无协同或拮抗作用.体内三种不同剂量的磷霉素与去甲万古霉素联合应用,三组的平均杀菌率分别为(-0.45±0.21)△lgCFU/(ml·h)、(-0.46±0.25)△lgCFU/(ml·h)、(-0.42±0.28)△lgCFU/(ml·h),三者之间无明显差别.结论在耐青霉素肺炎链球菌致脑膜炎的兔模型中,去甲万古霉素的脑脊液透过率与万古霉素相似,但同等剂量条件下,去甲万古霉素的杀菌效果明显好于万古霉素.磷霉素不适于单独治疗耐青霉素肺炎链球菌所致脑膜炎,体外及体内实验证实磷霉素与去甲万古霉素联合应用分别表现为无关作用和拮抗作用.

广东东莞地区儿童肺炎链球菌和流感嗜血菌携带和耐药性研究

目的 总结和分析东莞地区学龄前健康儿童鼻咽部携带肺炎链球菌和流感嗜血菌情况和对常用抗生素耐药特点,为预防儿童肺炎链球菌和流感嗜血菌感染和合理利用抗生素提供参考.方法 采用专用巧克力和血平板培养基对采集的400名3～5岁儿童鼻咽分泌物培养并鉴定,对鉴定明确的肺炎链球菌和流感嗜血菌进行不同抗生素检测.结果 该地区儿童肺炎链球菌和流感嗜血菌携带率分别是34.5%和26.8%;药敏检测显示,肺炎链球菌对万古霉素、左氧氟沙星、氯霉素、复方磺胺甲(噁)唑、苯唑西林、四环素、红霉素耐药率分别为0、2%、24%、42%、64%、74%和78%;流感嗜血菌对头孢噻肟、环丙沙星、左氧氟沙星耐药率均为2%,氨苄西林和四环素耐药率均为8%,亚胺培南为10%,复方磺胺甲(噁)唑耐药率为12%,氯霉素和氨曲南耐药率均为28%,利福平为90%,对头孢呋辛和头孢克洛敏感.结论 本地区健康学龄前儿童鼻咽部肺炎链球菌和流感嗜血菌携带率高于国内许多地区,对常用抗生素耐药性严重,并存在多重耐药现象.

抗生素诱导的细胞感受态与肺炎链球菌的耐药性

针对环境中的压力,细菌会采取不同的响应以维持自身的稳定.某些抗生素能够诱导肺炎链球菌转变为感受态细胞,提高细胞转化率,从而产生更适宜生存的耐药突变株.本文根据近年来有关感受态的研究,重点阐述肺炎链球菌中抗生素诱导的感受态与耐药性之间的关系.

β-内酰胺类和大环内酯类药物联合应用治疗社区获得性肺炎

社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)仍然是威胁人群健康的重要疾病.目前肺炎链球菌可能仍是CAP重要的病原体,且耐药肺炎链球菌在全世界范围内的流行持续增长,与此同时非典型病原体发生率和多重感染率逐渐升高,这些都给社区获得性肺炎的经验性治疗带来很大的困扰.各国CAP的诊断和治疗指南中几乎都提到了联合应用β-内酰胺类和大环内酯类药物对社区获得性肺炎进行经验性治疗,并且世界各地的临床研究报道也表明,依据指南迟早做经验性治疗,可减少患者的护理费用、住院时间、可能产生的抗菌药物的耐药倾向,降低死亡率.虽然β-内酰胺类与大环内酯类抗生素联合应用可以扩大抗菌谱,但与传统的快速杀菌剂和快速抑菌剂不能联合应用的理论有矛盾,且国内、外的一些关于β-内酰胺类与大环内酯类抗生索联合应用的体内、外抗菌活性研究并未得出一致的结论,因此还有待更多的实验研究来验证.

成都地区肺炎链球菌对抗菌药物的耐药性调查

阿奇霉素治疗小儿肺炎疗效观察

肺炎是小儿时期常见的四大疾病之一,从病原学中细菌感染以肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、卡他莫拉氏菌等较常见.但近年来,通过临床检测支原体的致病率有上升趋势.特别学龄儿童多见、婴幼儿发病增加.2002年10月-2004年1月,我科设定诸多条件而入围65例住院患儿,采用连续静脉滴注射阿奇霉素治疗[7],现报告如下.

152株肺炎链球菌的分离鉴定与耐药性分析

目的肺炎链球菌分离鉴定和对青霉素敏感性测定及耐药性分析:方法所分离鉴定的肺炎链球菌,其对青霉素敏感性的测定采用苯唑西林纸片扩散法作初筛,抑菌环直径≥20mm,判断为对青霉素敏感,抑菌环直径≤19mm,再进一步用Etest法检测MIC来确定是否青霉素耐药;结果 152林肺炎链球菌中50株为青霉素耐药林,占32.9%(50/152).纸片扩散法44.7%(68/152)的肺炎链球菌抑菌环直径≥20mm,判定为青霉素敏感,Etest法32.9%的肺炎链球菌对青霉素耐药.青霉素敏感菌株对头抱类抗生素普遍敏感,对红霉素、氯霉素有较强的耐药性,尚未见对万古霉素耐药的菌株;结论本地区PNSP的发生率占32.9%,这类菌株所致感染应避免选用青霉素类抗菌药.可首选第三代头孢,严重感染者可选用万古霉素其治疗效果较理想.

73株婴幼儿呼吸道肺炎链球菌分离株耐药性研究

目的 通过对73株婴幼儿呼吸道肺炎链球菌耐药表型和基因的测定,初步探讨本地区肺炎链球菌耐药机制.方法 采用K-B药敏纸片扩散法和微量肉汤稀释法对73株婴幼儿呼吸道肺炎链球菌进行药敏试验,分析其对青霉素、左氧氟沙星等12种抗生素的耐药情况;通过PCR方法检测73株肺炎链球菌携带四环素耐药基因tetM,大环内酯-林可酰胺-链阳菌素B(MLSB)类抗生素耐药基因mefA、erm A和erm B,转座子整合酶基因int Tn的情况.结果 纸片扩散法结果显示73株肺炎链球菌对红霉素、克林霉素及四环素的耐药率较高,分别达到95.9％、94.5％、87.7％;没有检出耐万古霉素肺炎链球菌;微量肉汤稀释法结果显示73株肺炎链球菌对青霉素、头孢噻肟、头孢曲松3种抗生素敏感率比较一致,分别为45.2％、47.9％、46.6％;73株肺炎链球菌tet M、me f A、erm A、erm B、int Tn基因携带率分别为91.8％、63.0％、58.9％、39.7％、61.6％.结论 成都市婴幼儿呼吸道肺炎链球菌分离株对青霉素、四环素、红霉素及头孢菌素类临床常用抗生素的耐药率较高,对左氧氟沙星、氯霉素的耐药率则保持在较低水平;肺炎链球菌分离株四环素耐药与tetM携带关系密切;对大环内酯类药物的耐药由主动外排泵和靶位改变造成,其中以前者为主;int Tn与tet M、erm B基因关系密切.

下呼吸道标本苛养菌的分离培养及耐药性研究

目的:了解呼吸道感染住院病人流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌及肺炎链球菌的感染和耐药性以及流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌β-内酰胺酶的产生率.方法:收集呼吸道感染患者的痰标本共1263份,按细菌学常规方法进行分离培养、鉴定和药敏试验,以Ni trocefin 纸片法测定β-内酰胺酶的产生率.结果:1263份痰标本中共分离出流感嗜血杆菌139株,副流感嗜血杆菌85株,肺炎链球菌228株.139株流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶51株(36.69%),85株副流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶32株(37.65%).139株流感嗜血杆菌对氨苄西林、四环素、SMZ 高度耐药,对利福平和阿奇霉素的耐药率为0.00%.85株副流感嗜血杆菌对氨苄西林、四环素和氧氟沙星耐药严重,对利福平的耐药率为0.00%.228株肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、四环素、SMZ 耐药率相当高,对青霉素中介率高达23.25% .结论:呼吸道苛养菌对多种抗生素具有较明显的耐药性,临床微生物室应加强对呼吸道标本中苛养菌的常规分离培养及药敏试验,指导临床医生合理使用抗生素以延缓耐药率的快速上升.