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填精补脑方对老年痴呆大鼠行为学及海马胆碱能神经递质的影响
目的：观察填精补脑方对老年痴呆大鼠行为学及海马胆碱能神经递质的影响。方法健康成年SD大鼠随机分为对照组、模型组、脑复康组、填精补脑方组，每组10只。双侧海马注射Aβ25－35构建老年痴呆大鼠模型，各组给予相应药物灌胃治疗20 d。用药结束后，测定大鼠的学习记忆能力及海马ChAT、AChE的酶学活性。结果与模型组相比，用药组达标所需训练次数、错误反应次数明显减少（ P＜0．01）；ChAT活性升高，AChE活性降低（ P＜0．01）。结论填精补脑方可以改善老年痴呆模型大鼠学习记忆功能，其机制可能与改善海马中胆碱能神经递质的代谢有关。
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嗅三针对老年痴呆大鼠学习记忆功能及海马胆碱乙酰化酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响
目的:探讨嗅三针对老年痴呆大鼠学习记忆功能影响的作用机制.方法:成年SD雄性大鼠随机分为正常对照组、阿尔茨海默病(AD,又称老年痴呆)模型组、嗅球损毁电针组、单纯AD电针组,每组10只.Aβ1-40注射法造大鼠AD模型,电凝法损毁嗅球.嗅三针为两侧"迎香"穴及"印堂"穴,电针10 min,每日1次,5次为1个疗程,共进行8个疗程.Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,比色法检测大鼠海马区胆破乙酰化酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性.结果:定位航行试验显示,平均逃避潜伏期比较,AD模型组明显长于正常对照组(P＜0.01),单纯AD电针组明显短于AD模型组和嗅球损毁电针组(P＜0.01),嗅球损毁电针组与AD模型组之差异无统计学意义(P＞0.05).空间探索试验显示,原平台象限跨越相应平台的次数比较,AD模型组明显少于正常对照组(P＜0.01),单纯AD电针组明显多于AD模型组和嗅球损毁电针组(P＜0.01),AD模型组与嗅球损毁电针组之差异无统计学意义(P＞0.05).海马ChAT、AChE活性比较,AD模型组低于正常对照组(P＜0.05),单纯AD电针组高于AD模型组和嗅球损毁电针组(P＜0.05),AD模型组与嗅球损毁电针组之差异无统计学意义(P＞0.05).结论:嗅三针能够显著增强痴呆大鼠学习记忆功能,并且能提高海马ChAT和AChE活性,其治疗效应的发挥依赖于嗅觉传导通路的完整性.
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旱莲草对老年痴呆模型大鼠学习记忆及海马神经递质的影响
目的:观察旱莲草对老年痴呆模型大鼠学习记忆能力及海马神经递质的影响.方法:健康成年SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、药物低、高剂量组.皮下注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ25-35构建老年痴呆大鼠模型,各组给予相应药物灌胃治疗8周.用药结束后,观察各组大鼠学习记忆能力、海马神经元形态变化及海马中NE、DA、5-HT的含量和ChAT、AChE的酶学活性.结果:与模型组比较,药物高剂量组潜伏期延长,错误次数降低;海马中锥体细胞形态结构基本正常,细胞脱失现象较少;NE、DA和5-HT含量增高,ChAT活性升高,AChE活性降低.结论:旱莲草可改善老年痴呆模型大鼠学习记忆功能,其机制可能与改善海马神经元形态结构、减少神经元细胞丢失、改善海马中神经递质的代谢有关.
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半夏泻心汤及其拆方对应激性胃溃疡大鼠胆碱能神经元的影响
半夏泻心汤是历代医家治疗脾胃病的有效复方,也是一首适合于中药复方研究的经方.近10年来关于半夏泻心汤的实验研究不断取得进展[1],目前多采用慢性胃溃疡的动物模型探讨半夏泻心汤的配伍规律[2].由于导致溃疡的原因是多源的,各种溃疡的发病机制不一,植物神经功能紊乱在应激性胃黏膜损伤的发生中具有重要作用.CHAT是胆碱能神经的标志酶.本实验以CHAT为指标,运用免疫组织化学方法观察各组脑及胃中CHAT表达的变化,研究半夏泻心汤全方及拆方各组的治疗作用.探讨半夏泻心汤配伍规律的生物学基础.
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健脾补肾中药对衰老脑组织中胆碱乙酰转移酶/乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶B影响的研究
目的:观察健脾补肾中药对衰老大鼠脑组织单胺氧化酶B(MAO-B)、胆碱乙酰转移酶/乙酰胆碱酯酶(ChAT/AchE)活性表达的影响.方法:受试动物随机分组并建立亚急性衰老大鼠模型,经健脾补肾中药干预后测定各组大鼠脑组织MAO-B、ChAT/AchE活性变化.结果:与空白组比较,模型组大鼠MAO-B、AchE表达显著升高(P＜0.05),ChAT表达显著降低(P＜0.01),应用健脾补肾中药治疗后,治疗组大鼠MAO-B、AchE表达显著降低(P＜0.05),ChAT表达显著升高(P＜0.05).结论:键脾补肾中药具有调节脑组织单胺类神经递质和胆碱类神经递质代谢而发挥脑功能保护作用.
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不同强度运动对去卵巢大鼠心内神经节细胞中胆碱乙酰化酶和一氧化氮合酶表达的影响
目的:探讨不同强度运动对去卵巢大鼠心内神经节细胞中胆碱乙酰化酶(ChAT)和一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响.方法:将40只Wistar大鼠随机分为去卵巢对照组,去卵巢+低强度运动组,去卵巢+中等强度运动组及去卵巢+大强度运动组.8周实验后,采用免疫组化法结合图像分析比较大鼠心内神经节细胞中ChAT和nNOS积分光密度值(IOD)的变化.结果:去卵巢+中等强度运动组ChAT和nNOS的IOD值与去卵巢对照组相比显著增高(P＜0.01);去卵巢+低强度运动组ChAT和nNOS的IOD值与去卵巢对照组相比无显著差异(P＞0.05);去卵巢+大强度运动组ChAT和nNOS的IOD值与去卵巢对照组相比显著下降(P＜0.05).结果表明,中等强度运动可上调卵巢摘除大鼠心内神经节细胞中ChAT和nNOS表达.
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聪圣胶囊对去皮层血管大鼠行为学及前脑AchE、ChAT的影响
采用去大鼠脑皮层血管建立模型，AchE组化及ChAT免疫组化方法，研究聪圣 胶囊对此模型皮质、海马以及大细胞基底核胆碱能神经元的影响。发现去脑皮层血管大鼠 出现了明显的学习、记忆功能的损害。大鼠皮层损伤侧扣带皮质、海马CA1区AchE阳性纤维 的分布明显稀疏，着色浅。损伤侧的大细胞基底核的AchE、ChAT阳性胆碱能神经元出现了明 显萎缩。聪圣胶囊治疗组大鼠的学习、记忆功能明显改善，皮质、海马AchE阳性纤维分布较 密集，着色加深。大细胞基底核AchE、ChAT阳性神经元的变性、萎缩明显减轻。说明聪圣胶 囊对去皮层血管后造成的皮质、海马、大细胞基底核的损害具有明显的保护和治疗作用。通 过上调胆碱能系统的功能改善学习、记忆功能。
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成年中缅树鼩大脑 BDNF、trkB、ChAT mRNA 与蛋白的表达
目的：观察成年中缅树鼩大脑BDNF、trkB、ChAT mRNA 及蛋白的表达。方法利用q－PCR和Western blotting方法检测成年中缅树鼩大脑海马、基底核和皮层BDNF、trkB、ChAT mRNA及蛋白的表达。结果成年树鼩大脑BDNF mRNA在海马高，与基底核和皮层差异具有显著性（ P ＜0．01）；trkB mRNA在海马低，额叶皮层高，二者间差异显著（ P＜0．05）；ChAT mRNA 在海马、基底核和额叶皮层的表达差异无显著性（ P＞0．05）。成年树鼩大脑BDNF蛋白表达在基底核高，与海马或皮层有显著性差异（ P＜0．01）；树鼩大脑3个部位trkB、ChAT蛋白表达差异无显著性（ P＞0．05）。结论成年树鼩大脑海马、基底核和皮层ChAT mRNA表达与蛋白表达具有一致性；而BDNF、trkB mRNA表达与蛋白表达不对应。推测树鼩大脑BDNF／trkB比ChAT具有更为复杂的转录水平调控模式，树鼩可能是研究BDNF／trkB基因表达的影响机制的良好动物。
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补肝养髓方对自发老年性痴呆模型中枢胆碱能系统活性的影响
目的观察补肝养髓方对自发老年性痴呆模型学习记忆功能及中枢胆碱能活性的影响.方法用跳台实验(step-down test)从21月龄昆明种小鼠筛选出自发老年性痴呆(记忆障碍)鼠,随机分为4组,即空白对照组、西药对照组、补肝养髓小剂量组、补肝养髓大剂量组,另设老年学习记忆正常组(老年正常组).西药对照组给予喜得镇(Hydergine)0.6 mg/kg,补肝养髓小剂量、大剂量组分别予补肝养髓方6.80 g/kg及20.41 g/kg,连续60 d,正常对照和痴呆对照组均灌以等量双蒸馏水(DW).观察结束后取脑组织冰冻切片,Hedreen法示AChE纤维, Burt及Silver法示ChAT,全自动显微图像分析系统定量检测相关脑区AChE纤维及ChAT活性.结果补肝养髓方能显著增强中枢ChAT活性,增高大脑皮质和海马胆碱能纤维密度,而且其作用呈现出量效相关关系.结论补肝养髓方可显著增强其中枢胆碱能系统活性.
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逍遥散防治阿尔茨海默病的作用及配伍机制
目的：探讨逍遥散对 D－半乳糖致阿尔茨海默病（ AD）小鼠模型记忆能力及血清超氧化物歧化酶（ SOD）、胆碱乙酰转移酶（ ChAT）、乙酰胆碱酯酶（AchE）活性与丙二醛（MDA）水平的影响。方法60只 KM 种 SPF 级小鼠随机分为空白组、模型组、逍遥散全方组、疏肝健脾组、疏肝养血组、健脾养血组，每组10只。腹腔注射 D－半乳糖复制拟 AD 小鼠模型并以逍遥散全方及各配伍药组进行干预，给药第41天进行学习能力训练，第42天进行记忆功能测试，然后股动脉取血测定血清 SOD、ChAT、AchE 活性及 MDA 水平。结果逍遥散全方及各配伍药组皆可延长小鼠记忆潜伏时间，减少错误次数，提高血清 SOD、ChAT 活性，降低 AchE 活性与 MDA 水平，但记忆功能及血清 SOD、MDA、ChAT、AchE 的改善皆以逍遥散全方组明显。结论逍遥散能较好地改善拟 AD 模型小鼠记忆功能、抗氧化能力及中枢神经递质活性。疏肝、健脾、养血是有效防治 AD 的统一体，缺一不可。
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灵芝孢子粉对戊四氮慢性点燃大鼠学习记忆及胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响
目的 观察灵芝孢子粉对戊四氮点燃大鼠学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶(CHAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响,进一步探讨癫痫的发病机制及灵芝孢子粉对神经细胞保护的作用机制.方法 将60只成年SD大鼠随机分为空白对照组、癫痫模型组、灵芝孢子粉用药高、中、低剂量组共5组.癫痫模型组和灵芝孢子粉用药各组大鼠腹腔注射阈下剂量的PTA35 mg·kg-1·d-1,直至达到点燃标准.点燃后,用药组以灵芝孢子粉灌胃.采用Moms水迷宫测试大鼠空间记忆能力,制备海马10％组织匀浆,化学比色法检测其ChAT、AChE的活性.结果 水迷宫逃避潜伏期,模型组明显高于用药高剂量组和对照组(均P＜0.01)；跨过原平台次数,模型组明显少于用药高剂量组(P＜0.05)和对照组(P＜0.01)；与模型组相比,用药中、高剂量组呈剂量依赖性显著抑制海马AChE的活性、增强ChAT的活性(均为P＜0.05).结论 灵芝孢子粉可通过抑制功能脑区AChE活性、增加ChAT的活性,以增强中枢胆碱能神经系统的功能,改善癫痫大鼠认知能力,从而对脑组织起保护作用.
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参归煎剂对双侧NBM损伤痴呆大鼠海马Ach含量及ChAT活性的影响
目的探讨参归煎剂改善实验性痴呆动物模型学习记忆障碍的作用机制.方法向大鼠基底前脑Meynert基底核(NBM)注入鹅蕈氨酸(Ib),造成中枢胆碱能系统障碍性的阿尔茨海默病(AD)动物模型.通过放射免疫分析方法,观察参归煎剂对该模型大鼠海马内乙酰胆碱(Ach)含量和胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性的影响.结果给药组大鼠海马Ach含量及ChAT活性均明显高于模型组.结论参归煎剂对AD模型大鼠学习记忆功能障碍的改善作用,可能与其对中枢胆碱能系统的保护作用或者说与其增强中枢胆碱能系统的功能活动有关.
关键词： 参归煎剂 阿尔茨海默病(AD) Ach ChAT -
不同年龄组抑郁症模型鼠Meynert基底核形态学研究
目的 探讨不同年龄组抑郁症模型鼠中枢胆碱能系统神经毡突触超微结构及胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫组化变化情况,并探讨二者之间的关系.方法 选择中枢胆碱能系统发源地Meynert基底核为观察对象,采用透射电镜从形态学上观察Meynert基底核神经毡突触的变化,应用ChAT免疫组化观察胆碱能神经元的变化.结果 透射电镜观察显示,模型组突触囊泡数量较对照明显减少,且与年龄呈正相关.突触囊泡分布不均匀,聚集于激活的突触带附近,各年龄模型组ChAT免疫反应与对照组相比明显增强,且与年龄呈正相关.结论 抑郁症模型鼠中枢胆碱能系统发源地Meynert基底核神经毡突触囊泡明显减少,而ChAT免疫反应阳性细胞明显增多,差异有统计学意义(P<0.01).
关键词： 年龄 抑郁症 Meynert基底核 ChAT -
针药合用刺激嗅觉系统对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及大脑边缘叶ChAT、AchE活性的影响
目的 探讨针药合用刺激嗅觉系统对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及大脑边缘叶ChAT、AchE活性的影响作用.方法 制作VD大鼠模型和VD并损毁嗅球大鼠模型,分别通过嗅三针电刺激、丁香酚刺激、针药合用方法,测试大鼠水迷宫学习记忆能力及大脑边缘叶胆碱乙酰化酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性.结果 定位航行试验显示,平均逃避潜伏期和平均游泳路程比较,正常对照组明显短于VD模型组(P<0.01);嗅三针组、丁香酚刺激组和针药合用组均明显短于VD模型组(P<0.01);针药合用组短于嗅三针组、丁香酚刺激组(P<0.05);噢三针组与丁香酚刺激组相比较,其差异无显著性意义(P>0.05);VD模型组与VD嗅球损毁模型组相比较,其差异无显著性意义(P>0.05).大脑边缘叶ChAT、AchE活性比较,VD模型组明显低于正常对照组(P<0.01);嗅三针组、丁香酚刺激组和针药合用组明显高于VD模型组(P<0.01);针药合用组高于嗅三针组和丁香酚刺激组(P<0.05);嗅三针组与丁香酚刺激组之差异无显著性意义(P>0.05).VD模型组与VD嗅球损毁模型组之差异无显著性意义(P>0.05).结论 嗅三针和丁香酚均能够显著增强VD大鼠学习记忆功能、提高大脑边缘叶ChAT和AchE活性、针药合用效果更佳,其治疗效应的发挥依赖于嗅觉传导通路的完整性.
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六味地黄丸对老年大鼠学习记忆及基底前脑ChAT阳性神经元的影响
目的:观察六味地黄丸对老年大鼠学习记忆及基底前脑乙酰胆碱转移酶(ChAT)阳性神经元的影响.方法:将清洁级雄性SD大鼠分为青年对照组(3月龄)、老年对照组(24月龄)和老年用药组(24月龄),通过Morris水迷宫实验,比较其学习记忆能力,并运用免疫组织化学方法,检测基底前脑ChAT阳性神经元变化.结果:老年用药组平均逃避潜伏期自第3d起较老年对照组明显缩短,有极显著性差异(P＜0.01).老年用药组基底前脑ChAT阳性细胞数目与老年对照组相比,MSN内有显著性差异(P＜0.05)；NBM内有极显著性差异(P＜0.01)；VDB内两组之间无明显差异.结论:六味地黄丸可以改善自然衰老大鼠的空间学习记忆能力,机制可能与其保护基底前脑ChAT阳性神经元,增强中枢胆碱能系统功能有关.
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右美托咪定对喹啉酸引发的成年大鼠空间记忆损害的影响作用
目的 探讨右美托咪定对喹啉酸引发的成年大鼠空间记忆损害的影响作用及其可能机制. 方法 选择健康成年Wistar雄性大鼠30只,随机数字法分为生理盐水组( NS组)、喹啉酸组( QA组)、右美托咪定+喹啉酸组(D+Q组). 八臂迷宫实验、旷场实验方法测定各组大鼠的空间记忆能力、探究行为的变化. 实验完成后立即处死大鼠,提取海马组织,应用Western Blotting法测定海马内胆碱乙酰转移酶( choline acetyltransferase , ChAT)蛋白的表达水平. 结果 与NS组比较,QA组、D+Q组的空间记忆功能明显减退,自发性活动减少,ChAT蛋白表达明显下降(P<0.05). 与QA组比较,D+Q组的空间记忆功能有所改善(P<0.05). 但自发性活动无明显改变(P>0.05),ChAT表达有所增加(P<0.05). 结论 QA所致空间记忆障碍可能与海马内ChAT表达下调有关系,右美托咪定可部分逆转ChAT表达下调.
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褪黑素对阿尔茨海默病大鼠Chat表达特征的影响
目的：研究褪黑素（melatonin ，MT）对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease ，AD）的胆碱乙酰基转移酶（Chat）表达特征的影响。方法大鼠随机分为 AD组、假 AD组、AD-M T 大剂量干预组和 AD-M T 小剂量干预组，应用β-淀粉样蛋白（Aβ）注入大鼠海马CA1区，建立大鼠AD模型，AD-M T干预组以M T灌胃，1次/d ，直至试验结束。应用电迷宫检测大鼠学习记忆情况，用免疫组织化学SABC法检测海马Chat表达特征。结果 M T可以明显改善AD大鼠的学习记忆能力，同时抑制因Aβ在脑内的沉积所导致的海马Chat表达减少。结论 M T对AD有显著的脑保护作用。
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大鼠慢性脑缺血后Chat表达特征及丁基苯酞的影响
目的 研究大鼠慢性脑缺血后大脑皮质和海马中胆碱乙酰基转移酶(Chat)表达特征及丁基苯酞(dl-butyphthalide,NBP)的影响.方法 健康wistar大鼠60只,雌雄不拘,随机分为4组,每组15只.A组:对照组(假手术+溶剂);B组:单纯缺血组(手术+溶剂);C组:缺血低剂量治疗组(手术+低剂量NBP+溶剂);D组:缺血高剂量治疗组(手术+高剂量NBP+溶剂).对照组除不结扎双侧颈总动脉外,其他的处理同模型组.C组和D组造模2月后分别按60mg/kg、120 mg/kg给予丁基苯酞每日灌胃,丁基苯酞用花生油稀释至2ml,A组和B组每日给予花生油2ml,各组皆连续灌胃一个月,用免疫组织化学SABC法在光镜下观察各组皮层和海马chat的表达.结果 B组皮质和海马chat表达与A组相比明显减少.C组、D组和B组相比chat表达增多,D组和C组相比chat表达明显增多,差异有统计学意义.结论 慢性脑缺血后大鼠皮层和海马chat表达减少,丁基苯酞通过对慢性脑缺血大鼠神经细胞凋亡有明显的抑制作用使chat表达增多.
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拆方研究逍遥散对阿尔茨海默病模型小鼠记忆功能及血清SOD、 MDA、 ChAT、 AchE活性的影响
目的 研究逍遥散对氢溴酸东莨菪碱致阿尔茨海默病模型小鼠记忆功能及血清SOD、MDA、ChAT、AchE活性的影响,探讨逍遥散防治阿尔茨海默病的作用及其机制,阐释疏肝、养血、健脾三者结合防治阿尔茨海默病的配伍意义.方法 60只SPF级KM小鼠随机分为空白组、模型组、逍遥散全方组、疏肝养血组、疏肝健脾组、养血健脾组等6组,每组10只.腹腔注射氢溴酸东莨菪碱复制阿尔茨海默病小鼠模型并分别以逍遥散全方及各配伍药组进行干预防治,给药第6、8天进行学习能力训练,第10天进行记忆功能测试,然后股动脉取血测定血清SOD、MDA、ChAT、AchE活性.结果 逍遥散全方组、疏肝养血组、疏肝健脾组、养血健脾组皆可提高小鼠记忆潜伏时间,降低错误次数,提高血清SOD、ChAT活性,降低MDA、AchE活性,但记忆功能及血清SOD、MDA、ChAT、AchE的改善皆以逍遥散全方组为明显.结论 逍遥散能较好的改善阿尔茨海默病模型小鼠记忆功能、抗氧化能力及中枢神经递质活性,对阿尔茨海默病具有较好的防治作用,其疏肝、养血、健脾的结合配伍是有效防治阿尔茨海默病的组方结构.
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补肾益智方对Alzheimer病模型大鼠脑内ChAT和AchE水平的影响
目的 观察补肾益智方对AD模型大鼠脑内ChAT和AchE水平的影响及可能的量效关系.方法 将Wistar大鼠随机分为5组,并制备AD大鼠模型,应用放射性化学法和微量羟胺比色法分别对大鼠脑内组织的CHAT(前额皮质、中隔、海马)、AchE(前额皮质、海马)活性进行检测,并设立石杉碱甲组和正常老年组进行对比研究.结果 与模型组比较,补肾益智方两个组对前额皮质、海马两个酶的活性均有不同程度的调节作用,尤其低剂量组效果为优.说明补肾益智方可明显改善该模型的胆碱能功能低下状态,且存在着一定的量效关系,其中低剂量组治疗效果优于石杉碱甲组.结论 研究提示本方对AD模型大鼠海马ChAT和AchE的活性的调节作用,可能是其治疗AD作用的机制之一.
关键词： Alzheimer病 醒脑益智方 ChAT AChE
