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不同人群TTV DNA的检测及基因分型研究
目的 检测健康人群及肝病患者TTV感染状况及基因分型.方法 采用TTV(N22)区核苷酸序列设计引物,建立半巢式PCR(nPCR)方法,对314例7种不同人群血清检测TTV DNA,限制性内切酶Pstl、Ndel进行酶切分型.结果 TTV在肝硬化患者、丙型肝炎、急性甲型肝炎、慢性乙型肝炎、急性乙型肝炎、健康人群和乙肝疫苗接种者中感染率分别为72.72%、60.71%、56.52%、48.00%、46.15%、44.21%和34.78%.肝硬化患者感染率明显高于正常人群和乙肝疫苗接种者(P＜0.01),也显著高于急性乙型肝炎及慢性乙型肝炎(P＜0.05).基因分型以G1型为主占(75.32%),G2型占(9.09%),(G1+G2)混合型占(15.58%).慢性乙型肝炎和丙型肝炎G1型阳性率高,分别为83.33%和82.35%,但与其它组无差异(P＞0.05).G1型男性感染率为73.33%,女性感染率为79.59%,不同年龄组G1型感染率高为1～10岁年龄组(83.33%)低是11～20岁年龄组(70.83%).但年龄性别问无统计学意义(P＞0.05).结论 TTV在健康人群及肝病患者中有较高的感染率.基因型以G1型为主,提示G1型对肝脏的致病性较微弱,对乙型肝炎,丙型肝炎的病程及愈后无影响.
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儿童血液病患者输血传播病毒感染的调查
为调查上海地区输血传播病毒(以下简称TTV)在儿童血液病患者中的感染情况及探讨影响.因素,应用半巢式PCR方法检测儿童血液病患者TTV DNA,以68例健康人群的献血员(ALT正常)作为对照,并抽取部分阳性标本的PCR产物(249bp)测定核苷酸序列.检测儿童血液病患者37例,结果TTV DNA阳性率27.03%(10/37),高于献血员阳性率17.64%(12/68),统计学无显著意义.2例儿童血液病患者与2例献血员TTV DNA测序结果核苷酸序列与日本株(N22)比较同源性分别为89.16%、95.18%和96.39%、95.38%.37例儿童血液病患者中输血次数2～15次不等,与TTV阳性有关,临床均未见血液病外的明显症状.提示:儿童血液病患者中存在TTV感染.TTV测序表明与日本株N22基本属于同一亚型.
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湖南衡阳地区TTV的检测及序列分析
目的了解湖南衡阳地区肝炎患者TTV的感染情况及TTV ORF1部分基因序列.方法在TTV ORF1设计引物,采用巢式PCR(RT-PCR)法检测湖南衡阳地区62份肝炎患者血清中TT V DNA,对PCR产物进行分子克隆和测序分析.结果 62份标本中17例TTV DNA阳性(29.3% ),对其中2例ORF1部分基因克隆、测序,并与日本Okamoto等报道的一株(N22)相比较 . 结论本研究结果显示湖南衡阳地区肝炎患者存在TTV感染,与日本发现的TTV DNA序列同源性高于97%.
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佛山地区TTV感染情况调查
目的:调查佛山地区TT病毒(TTV)感染的情况,了解TTV与肝炎的关系.方法:选取非甲-庚肝炎患者、慢性乙型肝炎患者、静脉药瘾者及健康人群(健康义务献血员)血清作TTV-DNA扩增,微板核酸杂交-ELISA技术作TTV检测及TTV基因分型.了解不同人群TTV感染率及TTV的基因分型情况.结果:非甲-庚肝炎患者中检出29例,阳性率7.13%.慢性乙型肝炎患者中检出23例,阳性率6.46%.静脉药瘾者中检出11例,阳性率13.25%.健康人群中检出1例,阳性率0.63%.对64例TTV阳性标本进行基因分型,其中Ⅰ型60例,Ⅱ型4例.64例TTV感染者中6例肝功能检查ALT正常.结论:佛山地区存在TTV感染,基因型以Ⅰ型为主.其中非甲-庚肝炎患者、慢性乙型肝炎患者、静脉药瘾者的感染率较高,为TTV感染的高危人群.TTV为非甲-庚肝炎的病原之一,存在着无症状携带状态.其传播似与血液途径有密切关系,可单独或混合感染致病,其在人群中的感染似与HBV感染存在与否无关.
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我国肝病病人和健康人群中TTV基因型分析
目的分析我国肝病患者和健康人群TTV基因型.方法用巢式PCR扩增我国不同地区不明病因的急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝癌和自然健康人群TTV DNA片段,并对PCR产物进行克隆,测序分析和同源性比较.结果武汉WH1、WH2、WH3 3个病人血清中TTV DNA序列与N22同源性分别为97% 、97% 和98% ;广州GZ 1、GZ2、GZ3 3例病人血清中TTV DNA 序列与N22同源性分别为98% 、95% 和95% ;山东SD2、SD3 TTV DNA序列与N22同源性分别为94.6% 和95.5% ;广州GZ4、山东SD1、新疆XJ1病人TTV DNA序列与TXO11同源性分别为98% 、98% 和95% .结论根据 Okamoto分类方法,我国TTV属于两个亚型,即基因1型中的a和b亚型.
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海口市吸毒人群TT病毒感染情况的调查
目的了解TT病毒在吸毒人群中的感染情况和传播途径.方法对海口市公安局戒毒所收容的221例吸毒者进行不同因素分析,采用巢式PCR法检测血清中的TTV DNA,同时检测血清中的甲型肝炎病毒(HAV)、庚型肝炎病毒(HGV)、艾滋病(HIV)和梅毒.结果211例吸毒者血清中TFV DNA阳性检出率为31.6%(70/221),HAV、HBV、HCV、HEV、HGV、HIV和梅毒阳性检出率分别为0.4%(1/221)、45.7%(101/221)、11.8%(26/221)、2.2%(5/221)、10.4%(23/221)、0(0/221)、5.9%(13/221).结论吸毒人群是TT病毒感染的高危人群;静脉注射毒品者、有非固定婚外性伴侣等因素与TT病毒感染密切相关;TT病毒与甲-庚型肝炎病毒的存在合并感染,其中乙型及丙型肝炎重叠TT病毒感染较常见;另外,我们在1例HAV阳性的血清中也检出TTV DNA,提示TT病毒除存在血液传播途径外,还可能存在非血源性的感染传播途径.
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海口市吸毒人群TT病毒与肝炎病毒感染状况的调查
目的:研究海口市吸毒人群病毒与甲～庚型肝炎病毒感染状况.方法:对221例吸毒者进行不同因素分析,采用巢式PCR法检测血清中的TTV DNA,对一株TTV部分基因序列进行了测定;用ELISA法检测甲～庚型肝炎病毒.结果:221名吸毒人群中TTV DNA与甲～庚型肝炎病毒感染率分别为HBV45.7%、TTV DNA31.6%、HCV11.8%、HGV10.4%、HEV2.2%、 HAV0.4%;静脉毒瘾者、有非固定婚外性伴侣等因素与TTV、HBV、HCV感染有关;TTV与甲～庚型肝炎病毒均存在合并感染;一株TTV DNA序列与GenBank中主要序列核苷酸同源性大于98 %.结论:吸毒人群是TTV和肝炎病毒感染的高危人群,静脉毒瘾者、有非固定性伴侣是TTV 、HBV、HCV传播的重要因素,TTV还存在非血源性传播途径,TTV与甲～庚型肝炎合并感染后引起的作用尚须作进一步研究.
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河北地区TT病毒感染的血清流行病学调查
目的:了解河北地区TT病毒(TTV)的感染状况以及与其它病毒性肝病的关系.方法:在TTV读码框架1区(ORF1)设计特异性引物,建立半巢式聚合酶链反应(semi-nested PCR)方法,对309例6种不同人群血清进行TTV DNA检测.结果:TTV的总感染率为46.28%,健康人群的感染率为31.94%,其他人群TTV的感染率由高到低依次为非甲-非戊型肝炎(65.00%)、肝硬化患者(58.33%)、丙型肝炎(57.14%)、乙型肝炎(48.06%)、急性甲型肝炎(38.71%).急性甲型肝炎与健康人群的TTV DNA的阳性率,差异无统计学意义(P＞0.05),而健康人群与乙型肝炎、肝硬化患者、丙型肝炎和非甲-非戊型肝炎各组之间TTV DNA的阳性率差异有统计学意义(P＜0.05).TTV感染可表现为单纯携带,也可与乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)合并存在.结论:该地区存在TTV感染,在非甲-非戊型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎组的感染率均较高,与非甲-非戊型肝炎并可能与HBV和HCV的感染有一定联系.
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献血者中TT病毒检测及其致病性探讨
目的探讨TT病毒(TTV)在输血过程中的传播及其致病性.方法常规酚-氯仿法抽提血清病毒DNA,设计位干TTVORFl保守区的两对引物.套式PCR扩增病毒DNA.ELISA检测血清HBsAg、抗-HAV、抗-HCV和抗-HIV.结果健康献血者血清中TTV-DNA检出率为43.1%(96/223).受血者输血TTV-DNA阳性血后2周,血清TTV-DNA转阳率为63.6%(14/22).8周血清TTC-DNA阳性率仍为46.4%(10/22),其中两对献血者和受血者之间血清TTV DNA同源性达100%.上述22名受血者输血2周后血清ALT、TB和DB正常,血清HBsAg、抗HAV、抗HCV和抗-HIV均阴性.随访其中5例至8周,无肝炎症状及体征,血清肝功能正常.结论TTV可通过血液传播,但无明显致病性.
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TT病毒研究进展
自1997年底日本学者Nishizawa等[1]报道发现一种可能与输血后肝炎相关的新病毒--TT病毒(TTV)以来,国内外学者对TTV的基因序列、流行病学及临床表现作了大量的研究,现将研究进展综述如下.
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鲁西地区TT病毒的实验研究
目的了解鲁西地区TTV存在的基因型及序列变异特点.方法利用PCR技术对TTV感染者血清作TTV序列克隆测定比较.结果在所测得的4株TTV分离株(H1～4H)中,1、H2与TX011序列差异较小,可致感染者ALT值较高;H3、H4序列与TA278、N22、CHN1、TX011、TS003、NA004及H1、H2序列差异均较大,二者之间序列差异亦较大;H3株可使ALT值高度升高;H4株系列之间序列差异较大,亦可使ALT值高度升高,其大幅度下降后序列变化较大.结论 H1、H2属1b型,具有一定毒性;H3、H4为TTV新的基因型或变异株,二者毒性较强,H4株ALT峰值出现后序列亦发生变异.
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孕妇TT病毒感染及基因型的研究
目的:了解孕妇孕期TT病毒感染的状况和基因型分布特征;研究HBV和TT病毒感染传播的相关性;探讨TT病毒经母乳传播的可能性.方法:采用巢式PCR技术检测孕妇血清和乳汁中的TT病毒DNA及基因型.结果:160例孕妇血清和乳汁标本各160份,TT病毒DNA阳性率分别为40.0%和37.5%.其中HBV标志物阳性组和阴性组血清和乳汁中TT病毒DNA的阳性率分别为50.0%、43.0%和13.6%、22.7%.两组比较有显著性差异(x2值分剐为16.09和4.38,P值均＜0.05).124份TT病毒DNA阳性血清或乳汁标本,其病毒核酸基因型均为Ⅰ型.结论:孕妇中存在TT病毒感染,HBV感染孕妇是TT病毒感染的高危人群.提示TT病毒感染途径与HBV传播具有相关性;母乳喂养是传播TT病毒的重要途径;孕妇中TT病毒感染的基因以Ⅰ型为主.
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抗TTV-IgG抗体的检测及临床应用
目的:观察分析不同人群中的TT病毒(TTV)的感染情况及相关意义.方法:使用抗TTV-IgG抗体检测不同人群中的TTV抗体.结果:健康受试者及甲肝、乙肝、丙肝、肝癌、肝硬化和非甲～非庚型肝炎等患者各30例,抗TTV-IgG阳性率分别为10.0%、13.3%,13.3%,10.0%,20.0%和33.3%.结论:TTV在多种病毒性肝炎中均存在感染,其中以非甲～非庚型肝炎患者中感染率高,在健康受试人群中也有较高的感染率,提示在对献血员进行体检时有必要进行TTV的检测.
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107例静注海洛因成瘾者TT病毒感染状况
目的调查贵州地区静注海洛因成瘾者TT病毒感染状况.方法以公布的TTV第1读码区序列设计两对寡核苷酸引物,用套式聚合酶链反应(nPCR)检测107例静注海洛因成瘾者血清中TTVDNA,以62例正常人为对照.同时用酶联免疫法测丙肝病毒抗体(抗HCV),逆转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)测庚肝病毒核糖核酸(HGVRNA).结果正常人TTVDNA阳性率6.45%,海洛因成瘾者25.23%.两组相比,差异有显著意义(P＜0.005).成瘾者TTVDNA阳性率在男、女组间无差异,与注毒时间长短无相关(P＞0.5).27例TTVDNA阳性成瘾者中,11例为单纯TTV感染,16例重叠HCV或HGV感染,其中TTV、HCV、HGV三重感染8例,TTV重叠HCV5例,重叠HGV3例.结论贵州地区静注海洛因成瘾者中有TTV感染存在,感染率高低与性别、注毒时间长短无关.TTV可以单独感染,但与HCV、HGV的重叠感染率较高.
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ELISA检测TT病毒及感染状况报告
TT病毒(TTV)是近几年来新发现的一种与输血相关的新型病毒.近年来报道甚多,但在贵州地区至今尚无有关捐血人群TTV感染方面的报道.笔者采用酶联免疫吸附试验(ELISA),对贵阳地区近年来部分捐血人群进行TTV实验检测,旨在了解贵阳地区捐血人群的TTV感染情况,并提供有实用价值的资料.
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TTV研究进展
肝炎病毒学研究表明,肝炎病毒的种类繁多并不断发生变异.目前,国际病毒分类与命名委员会将具有明确的血清学和可靠分子生物学诊断方法的五种肝炎病毒命名为甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒及戊型肝炎病毒.然而,人们在对肝炎进行诊断及治疗过程中发现,除了已明确的五种肝炎病毒所至的肝炎外,还有
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TTV核酸模板快速制备方法
目的寻求建立适合大批量临床标本检测TT病毒(TTV)核酸快速制备方法 ,直接用于PCR扩增. 方法应用蛋白酶K裂解酚氯仿抽取法与直接快速裂解法,分别制备TTV核酸做PCR模板,用于TTV的聚合酶链反应的快速检测. 结果在30例非甲～非庚型肝炎血清和50例慢性乙型肝炎患者血清,应用经典的蛋白酶K裂解酚氯仿抽取法和直接快速裂解法,分别制备TTV核酸模板,在相同条件下进行PCR扩增,结果两种制备方法的符合率为89%. 结论 TTV是一种新发现的肝炎病毒,目前主要以实验室检测病毒核酸的存在为诊断依据,建立了具有快速、简便、适合大批量临床标本中TTV核酸制备方法,对TTV肝炎的快速诊断,具有重要的意义.
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兰州地区静脉毒瘾者TT病毒感染情况的调查
目的了解兰州地区静脉毒瘾者TT病毒(TTV)感染状况及其与肝功能的关系,探讨TTV的流行病学特征及其致病性.方法采用巢式聚合酶链反应(PCR)检测血清TTV DNA,采用酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测谷丙转氨酶(ALT)的含量.结果(1)静脉毒瘾组TTV DNA阳性率显著高于非静脉毒瘾组和对照组(P＜0.01).(2)静脉毒瘾者每日静脉注射毒品次数大于3次者,TTV DNA阳性率显著高于每日静脉注射毒品次数小于3次者(P＜0.01).(3)静脉毒瘾者TTV DNA阳性伴随血清ALT水平异常,二者存在相关关系.(4)不同人群的TTV DNA阳性与TTV DNA阴性的血清ALT阳性率有显著性差异(P＜0.01).结论(1)血液传播是TTV传播的主要途径.(2)TTV感染与ALT异常有密切的关系,可能是非甲一非庚型肝炎病的主要病源.(3)正常人群中存在TTV感染者,类似HBsAg的所谓"慢性携带状态".
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南通地区正常人群中TT病毒感染的初步调查
[目的]为了解TT病毒在南通地区正常人群中的感染状况.[方法]采用巢式PCR法,检测了518例南通地区ALT正常的健康人群和献血员中TT病毒的感染现状,其中献血员143例,正常人375例.[结果]518例正常的健康人群中有52例阳性,阳性率为10.0%;143名献血员中有13例TT病毒阳性,阳性率为9.1%(13/143);正常人群中阳性率为10.4%(39/375).两组比较无显著性差异.[结论]南通地区ALT正常的健康人群亦存在TT病毒感染,并呈健康携带者状态;献血员中也存在一定数量的感染者.
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TT病毒感染病人肝组织中TT病毒分布特点研究
目的探讨TT病毒感染病人肝组织中TT病毒分布特点.方法建立改良原位PCR技术,用以检测血清TT病毒阳性病人的肝组织标本,观察TT病毒在肝组织中分布特点.结果在肝细胞、肝癌细胞及内皮细胞中,TT病毒主要分布在细胞核.结论 TT病毒是一种嗜肝性病毒,肝细胞、肝癌细胞及内皮细胞的细胞核是其复制场所.
