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介绍一种大鼠脑中γ-氨基丁酸受体的检测方法
目的:介绍一种大鼠脑中γ-氨基丁酸受体的快速简便的检测方法.方法:用3H-GABA为配体来检测大鼠脑神经末梢微囊中的GABA受体.检测GABA受体的合适条件是1.0×10-3mol/L的脑膜蛋白在37℃下反应30 min.结果:大鼠脑中存在GABA受体,Kd＝(97.3±5.8)×10-9mol/L,Bmax＝0.1061×10-9mol/g蛋白±0.0103×10-9mol/g蛋白,属低亲和力受体.结论:用3H-GABA可以检测大鼠脑中的GABA受体.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecA基因及SCCmec基因分型检测
目的:提供一种快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的mecA基因和SCCmecA基因的分型方法,并与其耐药性关联分析.方法:用VITEK-2全自动微生物分析系统检测122例金黄色葡萄球菌的耐药性,用PCR检测mecA基因和SCCmec基因,统计药敏结果.结果:MRSA携带mecA基因73株,携带率为96.0％,其中SCCmec Ⅰ型4株,SCCmec Ⅱ型15株,SCCmec Ⅲ型50株,SCCmec Ⅳ型3株,未分型1株.MRSA对苯唑西林、红霉素、四环素、左氧氟沙星、莫西沙星、克林霉素的耐药率均在60％以上.对复方新诺明的耐药率小于10％,对呋喃妥因、万古霉素、利奈唑胺、喹努普汀/达福普汀全部敏感.结论:mecA基因可用于MRSA的快速诊断,本院以SCCmec Ⅲ型为主,MRSA对抗菌药物显示多重耐药.
关键词： 实验室诊断 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 SCCmecA基因 多重耐药 -
化学发光法与放射免疫法测定甲状腺激素的相关性研究
目的:比较化学发光法(CLIA)与放射免疫法(RIA)测定甲状腺激素结果的相关性.方法:收集甲亢、甲减患者和正常健康人标本共224份,每份标本同时用RIA和CLIA测定三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH),检测结果进行统计学分析.结果:T3及TSH呈偏态分布,CLIA检测FT4水平明显高于RIA法检测(P＜0.05),但两者在诊断患者高、中、低水平上的阳性率间无明显差异(P＞0.05).两种检测方法明显相关(P＜0.05),且检测结果异常率之间无统计学意义(P＞0.05).结论:RIA和CLIA方法高度相关,建议采用CLIA检测甲状腺激素.
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我院2012～2015年住院患者肠道菌群失调及其临床诊断分析
目的:对2012～2015年住院患者肠道菌群失调调查分析.方法:粪便标本采集用自然排粪便法和直肠拭子法.粪便标本处理:①涂片法:粪便标本经革兰染色观察,根据革兰阳性球菌所占百分比可分为Ⅰ型(正常型)、Ⅱ型(中间型)和Ⅲ型(异常型);②培养法:粪便标本经微生物学培养、分离纯化,鉴定肠道病原微生物.结果:①432份涂片法查球/杆比,住院患者肠道菌群Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型分别占34.72％、13.89％和50.69％.②培养法阳性标本712例,培养阳性前3的临床诊断:胃肠炎、腹泻患者;淋巴细胞白血病等血液系统疾病患者;呼吸道感染、肺部感染等重症患者.培养阳性患者以真菌为主,581/712(81.60％)例,其中白色假丝酵母菌居首位,418/712(58.71％)例;细菌感染主要以肠球菌为主,78/712(10.96％)例.结论:住院患者肠道菌群失调主要以真菌感染和球/杆比菌群失调为主,粪便微生物学检查为临床患者肠道菌群失调诊断提供了实验依据,也为临床患者抗生素的选择以及采取恰当的预防措施提供了参考方案.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因检测的LAMP方法建立
目的:探讨环介导等温扩增技术(LAMP)检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) mecA特异性基因的可行性和可靠性.方法:建立LAMP反应体系,优化反应条件,进行灵敏度和特异性试验.结果:LAMP反应检测mecA基因的佳引物组为引物组2+环引物1,佳反应温度为62℃,LAMP检测mecA基因的低限为14.7 pg/μl,PCR检测mecA基因的低限为147 pg/μl(引物量与LAMP一致),敏感性较PCR高10倍.LAMP检测mecA基因的特异度为100％,假阳性率为15％,假阴性率为0.结论:LAMP是一种操作简单、检测灵敏度和特异度高的扩增方法,仅靠检测mecA基因来鉴别MRSA假阳性率高,需结合金黄色葡萄球菌特异nuc基因同时扩增鉴定效果好.
关键词： 实验室诊断 环介导等温扩增技术 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 快速检测 -
不同条件对人游离毛囊培养的影响
目的：研究不同培养基对游离毛囊培养的影响。方法：将美容手术后取下的头皮在无菌条件下分离成游离的毛 囊培养于含血清或无血清的DMEM培训基、Williams E培养基中，观测毛囊的生长速度及形态 学改变。结果：在含血清DMEM培养 基中毛囊生长速度较慢，扭曲变形早；而无血清DMEM培养基毛囊的生长天数明显延长，毛 囊的层次结构及形态可长时间保持不变，但前3天生长速度与有血清培养时无明显差异；使 用Wlliams E培养基毛囊在前3天生长速度明显加快。结论：含血清的DMEM培养基不利于毛囊的生长，而Williams E培养基较适用于游离毛囊的培养。
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不同条件对人游离毛囊培养的影响
目的：研究不同培养基对游离毛囊培养的影响。方法：将美容手术后取下的头皮在无菌条件下分离成游离的毛 囊培养于含血清或无血清的DMEM培训基、Williams E培养基中，观测毛囊的生长速度及形态 学改变。结果：在含血清DMEM培养 基中毛囊生长速度较慢，扭曲变形早；而无血清DMEM培养基毛囊的生长天数明显延长，毛 囊的层次结构及形态可长时间保持不变，但前3天生长速度与有血清培养时无明显差异；使 用Wlliams E培养基毛囊在前3天生长速度明显加快。结论：含血清的DMEM培养基不利于毛囊的生长，而Williams E培养基较适用于游离毛囊的培养。
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荧光法对胸水肿瘤细胞的鉴别诊断
目的:探讨荧光法检测胸水肿瘤细胞对恶性及良性肿瘤的鉴别诊断.方法:采用吖啶橙荧光法(AOF)、免疫荧光法(IGF)、血卟啉荧光法(HOF)检测胸水肿瘤细胞.结果: 11例乳腺癌中三种方法的阳性率均为100%;42例肺癌阳性率分别为95.2%、95.2%、92.8 %;68例肺结核阳性检出率分别为4.41%、2.94%、1.47%;18例肺部感染阳性检出率分别为1.11%、0.55%、0;5例自发性液气胸和5例慢性肺源性心脏病均为阴性. 结论:三种荧光法均可用于胸水肿瘤细胞的鉴别诊断.
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骨软骨组织中Ⅰ、Ⅱ型胶原基因表达的检测
目的:用原位杂交法研究骨和软骨组织中Ⅰ、Ⅱ型胶原基因的表达.方法:以与Ⅰ型、ⅡA型和ⅡB型胶原mRNA特异性互补的寡核苷酸序列为探针,用末端转移酶将地高辛标记于3′-末端,在兔胫骨近端组织切片上进行Northen原位杂交,检测关节软骨、骺板和新生骨小梁区三种胶原基因的表达情况.结果:关节软骨和骺板区均检测到软骨细胞中有ⅡB型胶原基因表达,新生骨小梁区检测到成骨细胞中有Ⅰ型胶原基因表达.结论:本实验方法灵敏度高,结果可靠,是研究与骨病和骨发生发育相关的胶原基因表达的有力工具.
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兰州地区部分献血员肝炎病毒血清标志物检测结果分析
乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和丙型肝炎病毒抗体(anti-HCV)已作为常规指标筛选献血者[1].以酶联免疫吸附试验(ELISA)对门诊病人的检测结果发现,在受检病人中双重及三重感染多见,合计可达47%[2].单一感染者的主要病原为乙型、甲型、丙型三种,急性黄疸肝炎占1/3,主要为HAV感染.本文分析我科1995～1997年在献血员中检测的结果,探讨肝炎病毒(HV)在献血员中的阳性检出率.
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应用免疫组化SP法检测ER、PR在乳腺增生病组织中的表达及意义
自1968年以来,在乳腺癌组织中检测到雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)已有大量报道.但对乳腺增生病组织中的ER和PR情况的了解甚少[1,2].我们应用免疫组织化学技术,对30例乳腺增生病手术标本和30例其他乳腺病手术时在远处切取正常组织标本,检测了ER和PR表达,并结合乳腺增生病的临床表现探讨ER、PR在乳腺增生病中的意义.
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唾液生物标记物作为临床诊断工具的研究进展
口腔是一个复杂的环境,它包括多种共同作用的结构组织.每一种组织行使其独特的功能,唾液主要通过内源性酶类降解脂类和淀粉.大量研究表明:唾液包含一系列分子和微生物n].唾液中的成分可能对地方性和系统性疾病具有重要的指示作用[2].
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生物蛋白芯片在结核病诊断中的应用
由于诊断技术落后,全国约有50％的肺结核排菌患者未被发现,给人群造成巨大威胁.目前国内结核病诊断存在着金标准局限性大,主要原因在于痰培养结核杆菌生长缓慢、培养期长、阳性率低,这在一定程度上影响结核病的诊断和治疗.本研究主要评价生物蛋白芯片在结核病诊断中的应用以及在提高诊断能力方面的价值.
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外周血涂片中出现异型淋巴细胞761例统计与分析
血液中淋巴细胞可以发生一些变化,如原始细胞化和幼稚细胞化(俗称“返祖现象”).在显微镜下可以看到细胞体积变大,细胞核体积也增大,细胞浆颜色加深,出现空泡等.这与正常淋巴细胞形态有明显不同.这时候,就应报告发现异型淋巴细胞.异型淋巴细胞是血液中由于各种因素刺激而出现的异常淋巴细胞,常见于传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、水痘、麻疹、流感、以及结核、药物过敏、慢性感染、放射病、免疫异常及应激状态等多种疾病[1].
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脑脊液中神经递质测定的临床意义及测定方法的研究进展
人类的神经系统可分为中枢神经系统(CNS)和周围神经系统(PNS)两大部分.神经病学专门研究神经系统及骨骼肌疾病的病因、发病机制、临床表现、诊断、治疗及预防,作为神经科学的一部分,它的发展与现代检测技术的发展息息相关.近年来,随着科学技术的长足进步、许多先进的检测仪器的问世和检测方法的出现,为临床诊断提供了有力的手段和极大的便利,不断发展的色谱技术用于脑脊液中神经递质的测定就是其中之一.
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胱抑素C的生物学特性及其测定的临床应用
胱抑素C(Cystatin C)又称γ-微量(γ-trace)蛋白,属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CPIs)家族,是广泛存在于植物、细菌、病毒、原生动物和哺乳动物组织中的一类重要的蛋白酶.临床应用中血Cystatin C被作为反映肾小球滤过率(Glomerular Filtration Rate,GFR)的灵敏指标受到重视,此外Cystatin C还可能参与了一些神经性疾病、心脑血管疾病等的病理过程.本文就Cystatin C的生物学特性、测定方法、临床应用及其研究进展作一概述.
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肾小球滤过功能检查的方法学进展
肾小球滤过率(Glomerular filtration rate,GFR)和肾血浆清除率(Clearance)测定是两个在概念上既有联系但又有区别的临床试验.前者表示单位时间(s或min)内从双肾滤过的血浆毫升数,为测定总肾和分肾肾小球滤过功能的重要指标;后者系指双肾于单位时间内,能将若干毫升血浆中所含的某物质全部加以清除,它既可以用来测定肾小球滤过率,又可以检测肾血流量、肾小管对各种物质的重吸收和排泌功能.
关键词： 实验室诊断 肾小球功能 肾小球滤过率(GFR) 方法学 -
高效毛细管电泳在临床疾病诊断上的应用进展
几十年来,医学遗传学在疾病的诊断中发挥了重要的作用,研究发现疾病的发生与患者基因组中的基因突变或多态性有直接或间接的关系,相应的诊断技术也发展到对DNA分子进行直接分析的基因诊断技术阶段[1,2],通过对疾病相关基因的分析进行疾病诊断或预警,对于那些尚未确定致病基因的疾病也可利用DNA遗传标志进行遗传连锁分析,对某些遗传病可有效地进行胎儿出生前基因诊断、致病基因的寻找及肿瘤杂合性丢失的检测等.另外,通过癌基因、抑癌基因及有关代谢产物的检测,可对癌症进行诊断、治疗效果的监测及发生机制的研究.
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肌酐测定的酶学方法
血清和尿中肌酐测定可为临床评价肾小球滤过功能提供客观指标,因而是临床常做的生化检验项目.肌酐测定方法可分为化学法和酶法两大类.化学法有多种,但大都以1886年Jaffe氏建立的碱性苦味酸法(Jaffe反应)为基础,其主要缺点是反应的特异性差.
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β2微球蛋白与临床
β2-microglobulin是人血清中的一种小分子蛋白.是100个氨基酸残基组成的单链多肽,分子量为11 800,由于分子量小、电泳在β2区带而得名.所有有核细胞都能产生,以间皮细胞和上皮细胞合成较多,主要是由淋巴细胞产生,存在于有核细胞的细胞膜上,是细胞中完整HLA分子的一部分,与HLA分子分离释放到体液中的β2MG经血液及淋巴循环到肾小球被自由滤过,进入原尿中的β2MG 99%被近曲肾小管上皮细胞重吸收,在细胞内分解,释放出氨基酸供机体再利用.正常人体内β2MG生成速率较为恒定,昼夜变化较小.经尿排出的量仅为 1%,所以正常人尿β2MG含量极微.
