首页 > 文献资料
-
ELISA 法检测 HBsAg（CMIA）低值血清样本的结果分析
目的：通过对 HBsAg 低值血清样本的检测，评价 ELISA 方法的检测性能。方法收集化学发光法（CMIA）检测结果为0.05～9.99IU／ml 的 HBsAg 低值血清样本305份，采用 ELISA 方法进行复孔检测。结果 HBsAg 低值样本占HBsAg 阳性样本的18.12％，主要分布于中老年人群。ELISA 方法的总检出率为87.87％，其中0.05～0.11，0.12～0.20，0.21～0.50，0.51～1.00，1.01～5.00 IU／ml 和5.01～9.99 IU／ml 水平的检出率分别为36.00％，61.11％，78.38％，84.62％，99.11％和100.00％，各水平检出率之间差异有明显统计学意义（χ2＝99.84，P ＝0.000）。ELISA 方法检测 HB-sAg 低值样本的 S／CO 结果与 CMIA 方法检测结果存在较高的相关性（r ＝0.874，P ＝0.000）。结论ELISA 方法检测HbsAg 低值血清存在漏检的情况，临床实验室应根据实验目的合理选择实验方法。
-
三种方法检测低浓度乙肝表面抗原的比较与分析
目的：初步探讨三种方法对低浓度乙肝表面抗原（HBsAg）定性与定量检测的结果并进行对比分析。方法分别用酶联免疫吸附法（ELISA）、化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）与时间分辨荧光免疫法（TRFIA）测定2013年10月～2014年4月间于湖南旺旺医院就诊及体检的85例低浓度 HBsAg（ELISA法0.6＜S／CO≤3.0）标本，三种方法测定低浓度 HBsAg定性结果分为0.6＜S／CO≤1.0，0.6＜S／CO≤3.0两组采用检出阳性率进行χ2检验；HBsAg定量结果分为0.6＜S／CO≤1.0，1.0＜S／CO≤2.0，2.0＜S／CO≤3.0，0.6＜S／CO≤3.0四组采用配对样本t检验进行两两比较；HBsAg含量相关性采用相关系数t检验进行两两分析。结果①HBsAg检出阳性率0.6＜S／CO≤1.0组 CMIA法（64.0％）和TRFIA法（54.0％）两者之间差异无统计学意义（χ2值为0.333，P＞0.05），0.6＜S／CO≤3.0组 ELISA 法（70.6％）与CMIA法（89.4％）及TRFIA法（87.1％）之间差异有统计学意义（χ2值分别为9.412，6.907，P均＜0.05），CMIA法和TR-FIA法两者之间差异无统计学意义（χ2值为0.227，P＞0.05）。HBsAg检出阳性率 CMIA＞TRFIA＞ELISA。②HBsAg含量测定0.6＜S／CO≤1.0，1.0＜S／CO≤2.0，2.0＜S／CO≤3.0三组除在2.0＜S／CO≤3.0组 ELISA法与 CMIA法之间，ELISA法与TRFIA法之间差异均有统计学意义（t值1.743～3.671，P均＜0.05），0.6＜S／CO≤3.0组三种方法之间差异均有统计学意义（t值分别为2.053，2.766，4.459，P均＜0.05），总体含量CMIA＞TRFIA＞ELISA。③三种方法测定HBsAg含量之间均呈正相关关系（t值分别为2.928，2.939，60.915，P均＜0.05），其中 CMIA法与 TRFIA法之间相关性好（r＝0.989）。结论低浓度 HBsAg检测应首选 CMIA法，TRFIA法次之。对于 ELISA法检测低浓度 HBsAg标本应向临床建议用CMIA法或TRFIA法复查，避免漏检；并且不建议临床对不同方法测定定量或半定量结果间进行横向比较，避免误诊。
-
HBsAg两步法酶免国产试剂与进口试剂检测结果对比分析
目的 评价国产HBsAg两步法酶免试剂,为实验室选择优质可靠的试剂提供依据.方法 收集550份血清标本用美国伯乐超敏MONOLISA HBsAg ULTRA ELISA试剂检测HBsAg,分成MONOLISA检测阳性组(68例)和MONO-LISA检测阴性组(482例),分别用六种国产HBsAg两步法酶免试剂复检,分析六种国产试剂的灵敏度和特异度.再将2IU/ml HBsAg标准品按1∶2方法系列稀释成5个稀释度,用MONOLISA HBsAg ULTRA ELISA试剂和六种国产试剂检测,考核各试剂的分析灵敏度.结果 MONOLISA检测阳性组(68例)中,国产试剂A,B和E结果相吻合,国产试剂C和D有1例漏检(x2=0.015,P＞0.05)；MONOLISA检测阴性组(482例)中,国产试剂A有1例假阳性(x2=0.002,P＞0.05),国产试剂B和E有3例假阳性(x2=0.002,P＞0.05),国产试剂C和D有4例假阳性(x2=0.002,P＞0.05)；国产试剂F多次出现“花板”现象,实验失败,不作统计.检测2IU/ml HBsAg标准品系列稀释物,MONOLISA HBsAg ULTRA ELISA试剂分析灵敏度可达0.062 5 IU/ml,国产试剂A,C和D分析灵敏度可达0.25 IU/ml,国产试剂B和E可达到0.125 IU/ml.结论 大部分采用两步法的国产HBsAg酶免试剂灵敏度和特异度能满足临床需求,但仍不及进口试剂,个别小品牌试剂性能不佳.
-
HCV核心抗原检测在血液筛查中的初步研究
目的 探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV cAg)醇免检测试剂用于血液筛查的应用价值.方法 同时用抗HCV抗体和HCV cAg酶免检测试剂平行筛查血液,对HCV抗体阴性样本用Chiron Procleixa TMA系统检测HCV RNA.结果 1 762份无偿献血者样本中,抗HCV阳性12份(0.68％),HCV cAg阳性10份(0.57％),阳性检出率差异无统计学显著性意义(P＞0.05),抗HCV及HCV cAg同时阳性4份(0.23％).1 750份抗HCV阴性样本中,其中HCV cAg阳性样本6份,HCV RNA全为阴性.结论 在血液筛查中增加HCV cAg检测,对降低HCV的输血传播危险具有一定价值.
-
用ELISA法AB显色剂测定粪便隐血分析
本文介绍笔者在临床试验中利用弃物-酶联免疫吸附试验(ELISA)法的A、B显色剂来测定粪便隐血,效果甚佳.现介绍如下:
-
HBsAg ELISA定性检测S/CO值与TRFIA定量检测关系
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)酶联免疫吸附试验(ELISA)定性检测S/CO值与时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)定量检测的关系.方法 分别采用ELISA定性和TRFIA定量测定325例HBV感染者血清HBsAg.结果 325例患者HBsAg ELISA定性检测S/CO值与TRFIA定量检测分别为22.37±6.66,151.00±94.14 mg/ml,两者间具有显著相关性(r=0.139,P＜0.05);不同批次、不同HBV标志物模式、不同DNA含量其相关性不尽相同.结论 HBsAg ELISA定性检测S/CO值与其TRFIA定量检测间相关性良好.
关键词： 乙型肝炎病毒 表面抗原 酶联免疫吸附试验 时间分辨荧光免疫分析技术 -
斑点酶免疫法的技术关键
斑点酶免疫法(Dot-ELISA)是70年代末由Western-blot演变而来的,它是以微孔滤膜为载体的酶联免疫吸附试验,又称斑点免疫试验,抗原斑点试验(antigen-Spot test)[1],斑点免疫结合试验(Dot-immunobinding assay)[2]及斑点免疫测定(Spot immunodetection)[3]等.它具有简单、快速、特异性强与敏感度高等优点.自1982年Haukes等[2]首次建立免疫结合试验法以来,该技术迅速发展,目前已广泛应用于免疫生化与单克隆抗体的筛选等基础实验研究,并已用于病毒性疾病、细菌性感染、真菌病及寄生虫病等传染病的血清诊断.本文对进行该法的操作过程中需要把握的技术关键作一综述介绍.
-
化学发光酶免疫分析法与酶联免疫吸附试验在丙型肝炎抗体检测中应用比较
目的:对比化学发光酶免疫分析法与酶联免疫吸附试验在丙型肝炎抗体检测中的应用效果.方法:选取周口市人民医院检验科2014年3月至2016年5月收治的丙型肝炎患者60例,对患者给予化学发光酶免疫分析法与酶联免疫吸附试验分别检测其丙型肝炎抗体.观察比较两种方法丙型肝炎抗体阳性检出率及各相关抗体阳性检出情况.结果:化学发光酶免疫分析法检测抗-HCV总阳性率(98.33％)高于ELSA(86.67％),差异显著(P＜0.05);化学发光酶免疫分析法对抗SP100抗体、抗AMA-M2、抗3E抗体及PML抗体阳性检出率分别为38.33％、80％、73.33％、55.00％,均高于ELISA法的13.33％、11.67％、11.67％、10％,差异显著(P＜0.05).结论:相较于酶联免疫吸附试验,化学发光酶免疫分析法对HCV抗体阳性检出率更高,对相关抗体阳性检测敏感性高.
关键词： 化学发光酶免疫分析法 酶联免疫吸附试验 HCV抗体检测 -
血浆氧化低密度脂蛋白水平是冠心病严重程度的独立预报因素
目的研究血浆氧化低密度脂蛋白(OxLDL)水平与冠心病严重程度的关系.方法134例怀疑为冠心病的住院患者,进行选择性冠状动脉造影.根据冠脉造影结果,将患者分为冠心病组(113例,至少有1支冠脉狭窄≥50%)和对照组(21例,所有冠脉分支狭窄均＜50%).冠心病组按照冠脉病变支数进一步分为4个亚组(1支病变26例,2支病变26例,3支病变53例,4支病变8例);按照发病症状分为稳定型心绞痛组(51例)、不稳定型心绞痛组(22例)和急性心肌梗死组(40例).血浆OxLDL水平采用ELISA试剂盒检测.其他冠心病危险因素如年龄、性别、体质量指数、血脂等数据也一并收集.结果在冠心病组和对照组之间,除了高血压病史有显著升高外(46%vs 19%,P＜0.05),其他指标没有显著差别.冠心病患者血浆OxLDL水平显著高于对照组(1.15±0.32)μkat/ml vs (0.68±0.30)μkat/ml,P＜0.01).1～4支病变冠心病患者,其血浆OxLDL含量均显著高于对照组(1.10±0.32)μkat/ml、(1.12±0.27)μkat/ml、(1.17±0.32)μkat/ml和(1.33±0.37)μkat/ml vs (0.68±0.30)μkat/ml,P＜0.01);但不同支数病变患者亚组间无显著性差异.稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛和急性心肌梗死患者血浆OxLDL含量均显著高于对照组(1.13±0.30)μkat/ml,(1.23±0.33)μkat/ml和(1.15±0.32)μkat/ml vs(0.68±0.30)μkat/ml,P＜0.01);但是各分组之间无显著性差异.以血浆OxLDL水平为因变量进行多元回归分析,发现冠脉病变支数是血浆OxLDL水平升高的独立危险因素(P＜0.01).结论血浆OxLDL水平是冠心病严重程度独立预报因素.
-
三种方法检测梅毒患者阳性率的比较分析
目的：比较梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验（TP -ELISA）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）三种梅毒检测方法，评价三种方法的临床使用价值。方法：以 TP -ELISA、TPPA 做特异性抗体定性检测，RPR 做非特异性抗体定性检测。结果：TP -ELISA 法检测出梅毒阳性49例；用 TPPA 法检测出阳性49例；用 RPR 检测出阳性为45例；TP -ELISA 法检测出一期梅毒（30例）的阳性29例；二期梅毒（17例）的阳性17例。三期梅毒（3例）阳性为3例。用 TPPA 法检测一期（30例）的阳性有28例，阳性率为93．3％，二期（17例）的阳性有17例。三期梅毒（3例）的阳性为3例，阳性率为100％。用 RPR 法检测出一期（30例）的阳性有24例，阳性率为80％，二期（17例）的阳性有17例，阳性检出率为100％。三期（3例）的阳性为2例，阳性率为66．6％；通过 TP -ELISA 法检出愈后的全为阳性，TPPA 的阳性11例，RPR 法的阳性为3例，9例为阴性；结论：对梅毒患者同时采用 TP -ELISA 和 TPPA 或 RPR 法进行血清学联合检测，可提高阳性检出率和判断疗效。
-
大肠癌患者血清可溶性P-选择素和细胞间黏附分子-1的表达及意义
目的 探讨大肠癌患者手术前后血清可溶性P选择素(sP-selectm)、细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的表达及临床意义.方法 采用ELISA检测30例大肠癌患者术前、术后15日、术后30日及20例对照组血清sP-selectin、sICAM-1的表达水平.结果 ①大肠癌患者血清sP-selectin、sICAM-1的表达水平均显著高于对照组,P＜0.05;术后15日下降,仍高于对照组水平,P＜0.05;术后30日降至对照组水平,P＞0.05;②大肠癌患者血清sP-selectm、sICAM-1的表达水平与淋巴结转移和临床分期相关,P＜0.05,与年龄、性别、肿瘤大小及组织学分级无明显相关,P＞0.05.结论 sP-selectin、sICAM-1参与了大肠癌侵袭转移过程,是反映大肠癌的发生、发展及预后的一个重要指标.
-
定性酶标测定与定量检测对乙肝两对半结果的影响分析
目的:分析定性酶标测定与定量检测对乙肝两对半结果的影响.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),分别检测病人的乙肝两对半各项标志物的浓度变化.结果:在180例病人中,用ELISA法测得120例HBsAg阳性,32例HBsAb阳性,45例BeAg阳性,53例HBeAb阳性,131例HBcAb阳性;用TRFIA法测得HBsAg125例阳性,36例HBsAb阳性,47例HBeAg阳性,49例HBeAb阳性,128例HBcAb阳性.二者差异经统计学分析无统计学意义(P>0.05).结论:乙肝两对半型定性检测可以作为患者的预防性筛查,时间分辨荧光免疫技术能为乙肝患者的临床诊断、疗效观察提供动态数据.
关键词： 乙肝两对半 酶联免疫吸附试验 时间分辨荧光免疫分析 -
ELISA法筛查临床样本中梅毒螺旋体抗体假阳性结果分析
目的:分析酶联免疫吸附试验(ELISA)从临床样本中检测出梅毒阳性结果中的假阳性及应对措施.方法:把5886例分为老年组和中青年组,用TP-ELISA从检出阳性91例,再用蛋白印迹法(WB)进行确认.结果:TP-ELISA法从老年组的梅毒抗体检出53例(2.64%),WB法确证45例,假阳性率15.09%;TP-ELISA法从中青年组的梅毒抗体检出38例(0.98%),WB法确证37例,假阳性率2.63%.且出假阳性时TP-ELISA法的S/CO值与真阳性时的S/CO值无显著性意义. 结论:为提高老年人梅毒检测准确性,实验室使用WB法对有疑问的TP-ELISA法检测阳性样本进行确认是较好的选择.
-
人CIDE-3蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备
目的:制备人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子-3(CIDE-3)蛋白兔抗人多克隆抗体并进行鉴定.方法:将原核表达载体pET28a(+)/CIDE-3转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达CIDE-3蛋白,经Ni-NTA Agarose纯化后免疫新西兰白兔,获得人CIDE-3蛋白兔抗血清,并通过免疫印迹(Western blot)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫组织化学法对抗体进行鉴定.结果:成功地表达、纯化了人CIDE-3蛋白,与弗氏佐剂乳化后,免疫新西兰白兔,获得高效价的人CIDE-3蛋白兔抗血清,ELISA结果证实该抗体具有较高的亲和性,Western blot及免疫组织化学染色显示证实该抗体能够与人CIDE-3蛋白特异性结合,是一种细胞质蛋白.结论:获得了效价高、特异性较强的人CIDE-3蛋白兔抗血清,为进一步研究人CIDE-3奠定了实验基础.
-
急性白血病患者血浆vWF含量检测及其临床意义
目的:探讨恶性肿瘤患者血浆vWF水平与疗效、预后的关系.方法:早晨空腹抽取静脉血.采用ELISA双抗体夹心法测定.结果:急性白血病患者血浆vWF含量明显升高,与对照组比较有显著差别；治疗缓解组血vWF含量有不同程度下降,但仍高于正常水平.结论:vWF水平变化与急性白血病的病情严重程度及预后有明显关系,其检测方法简便、快速、敏感性高,可作为急性白血病的辅助诊断及判断病情变化的参考指标之一.
-
神经细胞黏附分子在老年乳腺癌中表达的研究
目的:研究神经细胞黏附分子(neural cell adhesion molecules,NCAM)在乳腺肿瘤中的表达并讨论其临床意义.方法:选择老年(60～72岁)乳腺癌组织25例(神经侵袭的8例,无神经侵袭的17例)、癌旁组织25例,乳腺良性病变26例(乳腺纤维腺瘤16例,乳腺腺病4例,囊性乳腺病6例),用免疫组织化学方法检测NCAM在这些组织中的表达.用酶联免疫吸附法(ELISA)测定NCAM在乳腺癌、乳腺良性病病和正常对照(n=30,61～ 68岁)血清中含量.结果经统计学处理.结果:NCAM在部分乳腺癌细胞质和细胞膜呈宗黄色阳性表达,癌旁组织和良性病变表达很少.乳腺癌组、癌旁组及乳腺良性病变NCAM阳性率分别为28.0％(7/25),4.0％(1/25)和3.8％ (1/26),腺癌组织明显高于癌旁组和乳腺良性病变(P＜0.05).NCAM阳性表达在乳腺癌有神经侵袭病例阳性率50.o％ (4/8)明显高于无神经侵袭病例23.5％ (4/17,P＜0.05).血清NCAM浓度(pg/ml)结果,乳腺癌(69.8±29.4)显著高于乳腺良性病变(16.7±6.3)和正常对照(14.9±3.1),具有明显统计学差异(P＜0.05).结论:NCAM在老年乳腺癌有明显表达,且伴发神经侵袭和转移时表达更为明显,表明NCAM表达影响乳腺癌发生发展,这为临床防治老年乳腺癌提供重要的参考依据.
关键词： 神经细胞黏附分子(NCAM) 乳腺癌 免疫组织化学 酶联免疫吸附试验 老年 -
促性腺激素释放激素类似物对大鼠中缝核簇5-HT样阳性物质表达的影响
研究促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对大鼠中缝核簇5-HT样阳性物质表达的影响,采用酶联免疫吸附试验测定血清激素水平,用免疫组织化学方法和图像分析技术观察大鼠中缝核簇5-HT样阳性物质的表达.结果证明:(1)GnRH-A组大鼠血清17β-雌二醇(E 2)、LH及FSH水平较正常对照组下降,差异显著(P＜0.05);与去卵巢组(OVX)比较,E2相似,差异不显著(P＞0.05),但LH、FSH较低(P＜0.05);与GnRH A+E2组比较E2浓度较低,差异显著(P＜0.05),LH、FSH相似(P＞0.05).(2)5-HT样阳性物质在大鼠中缝背核,中缝正中核表达较多,GnRH-A组大鼠中缝背核,中缝正中核5-HT样阳性细胞数及光密度值都低于正常对照组(P＜0.05),与去卵巢组相似(P＞0.05).(3)GnRH-A、17p-雌二醇联合用药后,大鼠中缝背核,中缝正中核5-HT样阳性细胞数及光密度值都与正常对照组相似,无显著差异(P＞0.05).结论:GnRH～A可改变大鼠中缝背核,中缝正中核5 HT样阳性物质表达,从而影响其神经元的功能,此点可能与其副作用类似绝经综合征有关.
-
皮肤病患者1 176例HIV的检测
1临床资料1996年7月～2003年12月本科对1 176例不同皮肤病患者进行HIV抗体检测,以酶联免疫吸附试验(ELISA)作初筛,蛋白印迹试验(WB)作确证试验.结果42例确证为HIV-1抗体阳性.其中男33例(79%),女9例(21%),年龄20～35岁;维吾尔族35例(83%),哈萨克族5例(12%),汉族2例(5%);有静脉吸毒史36例(86%),性传播6例占14%.
-
寻常疣患者外周血Th17细胞相关因子的表达及意义
目的 探讨Th17细胞相关因子在寻常疣患者外周血中的表达情况及意义.方法 采用ELISA法检测30例寻常疣患者外周血血清中IL-17,IL-23和TGF-β1的表达水平,并以30例健康人群作为对照.结果 寻常疣患者血清中IL-17及IL-23水平[分别为(206.77±48.96) pg/mL,(248.53±51.45) pg/mL]均高于正常对照组[分别为(165.49±51.84) pg/mL,(109.22±52.81) pg/mL],差异均有统计学意义(P均＜0.05)；寻常疣患者外周血清中TGF-β1表达水平(148.34±36.91) ng/L与正常对照组(143.64±24.36) ng/L差异无统计学意义(P＞0.05).寻常疣患者的病程、疣体数量与血清中IL-17,IL-23和TGF-β1水平均无相关性(P均＞0.05).结论 Th17细胞相关因子IL-17,IL-23及TGF-β1在寻常疣患者体内存在变化,可能与寻常疣的发病有关.
-
过敏性紫癜患者血清中TRANCE和BLys的检测
目的 了解TRANCE和BLys在过敏性紫癜发病中的作用.方法 通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测过敏性紫癜患者血清中TRANCE和BLys的表达水平.结果 过敏性紫癜患者血清中TRANCE和BLys的表达水平(2.83±0.96,90.48±2.64)与正常对照组(0.85±0.35,82.02±4.04)相比均升高(P＜0.01),伴有肾脏损害患者血清中TRANCE,BLys的表达水平(4.09±0.45,93.92±2.07)与单纯型患者(2.44±0.70,89.42±1.75)相比显著增高(P＜0.01).患者血清中TRANCE与BLys的表达水平呈显著正相关(r =0.515,P＜0.01).结论 过敏性紫癜患者血清中TRANCE,BLys的表达异常增高,可能与其发病有关.
