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维生素K2对大鼠血管平滑肌细胞钙化及Toll样受体2和4表达的影响
目的 探讨维生素K2对血管平滑肌细胞(VSMC)钙化及Toll样受体(TLR)2和TLR4表达的影响.方法 体外培养A7r5 VSMC分为正常组(基础培养液),钙化组(加入10 mmol/Lβ磷酸甘油),干预组(钙化基础上加入维生素K2 10-6 mmol/L),各组均干预14d.Mon Kossa染色观察VSMC钙化发生情况;检测细胞钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性;实时定量PCR及Western blot检测TLR2和TLR4 mRNA和蛋白表达水平.结果 钙化组细胞钙含量及ALP活性较正常组分别增加11.5倍和9.3倍(P＜0.01);干预组细胞钙含量及ALP活性较钙化组分别减少1.5倍和2.3倍(P＜0.01).与正常组比较,钙化组细胞TLR2、TLR4蛋白及mRNA表达升高;与钙化组比较,干预组细胞TLR2、TLR4蛋白及mRNA表达降低(P＜0.05,P＜0.01).结论 维生素K2抑制细胞钙化的作用可能与TLR2和TLR4表达的下调有关.
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Notch3表达下调的血管平滑肌细胞模型的建立
目的 通过RNA干扰建立Notch3表达下调的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)模型,探讨Notch3在VSMC表型转化中的作用.方法 根据Notch3序列设计siRNA,建立腺病毒表达栽体;VSMC分为空白组、空载体组及试验组；将载体导入VSMC中,通过荧光实时定量PCR检测Notch3表达水平.结果 在感染复数为300时,VSMC的感染效率高.以空白组为基准,试验组Notch3的相对表达量为0.64,下降了36％,而空载体组为0.88,仅下降了12％.结论 成功构建Notch3表达下调的VSMC模型,为后期研究奠定了良好的基础.
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血管紧张素-(1-7)对大鼠血压和血管平滑肌细胞增殖的作用
目的探讨血管紧张素-(1-7)[Ang(1-7)]对大鼠血压和血管平滑肌细胞增殖的作用.方法多导生理记录仪检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和Ang(1-7)所致的大鼠血压变化,免疫细胞化学染色和Western blot方法检测血管平滑肌细胞(VSMC)增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达.结果10-7mol/kg AngⅡ快速静脉注射射致大鼠收缩期血压(SBP)和舒张期血压(DBP)明显升高(P＜0.01);而同等浓度的Ang-(1-7)引起大鼠SBP明显下降(P＜0.01),DBP有下降趋势,但与用药前相比差异无显著性意义.免疫细胞化学染色显示PCNA主要在VSMC核内分布,AngⅡ刺激VSMC后PCNA蛋白表达明显增高(P＜0.05),Ang-(1-7)刺激后PCNA蛋白表达明显减少(P＜0.01).结论Ang(1-7)具有舒张血管和抑制VSMC增殖的作用.
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乐卡地平对老年大鼠血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨大鼠血管平滑肌细胞( VSMCs)发生衰老过程中,乐卡地平对细胞增殖和凋亡的影响和作用机制.方法 取原代培养的4月龄和24月龄Wistar大鼠VSMCs分别为青年组、老年组,青年和老年大鼠加乐卡地平10μmol/L处理24 h分为青年实验组和老年实验组.采用免疫荧光染色、Western blot法、流式细胞分析仪和Realtime共聚焦等技术检测各组细胞核内p21蛋白结构含量的变化、细胞的增殖及凋亡指数和凋亡率.结果 与青年组比较,青年实验组大鼠VSMCs分裂指数明显下降,相差13倍(P＜0.05).与青年组大鼠比较,乐卡地平对老年组大鼠的细胞内钙的抑制作用更强.与老年组比较,老年实验组大鼠细胞分裂指数和凋亡指数降低,差异有统计学意义[(2.08±0.22)％vs(0.7±0.06)％,P＜0.05],凋亡率明显下降,差异有统计学意义[(16.1±2.04)％vs(2.3±0.88)％,P＜0.01].与青年组和老年组比较,老年实验组大鼠细胞核内p21蛋白随乐卡地平剂量增加而增强,蛋白结构发生变化,增殖性核抗原表达减少.结论 乐卡地平通过改变p21蛋白的结构和含量表达,从而抑制增殖性核抗原表达,抑制VSMCs的增殖,降低老年大鼠VSMCs凋亡,减缓衰老.
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依折麦布和瑞舒伐他汀通过肝X受体α-三磷酸腺苷结合盒转运体A1对胆固醇的影响
目的 研究瑞舒伐他汀、依折麦布及两者联合是否通过肝X受体α (LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)信号通路影响血管平滑肌细胞(VSMC)来源的泡沫细胞胆固醇水平.方法 取大鼠胸主动脉3～5代VSMC进行实验,分为9组:对照组,不干预,仅单独培养VSMC 48 h;模型组,用氧化型LDL(ox-LDL 50 μg/ml)诱导VSMC,单独培养48 h;依折麦布A组(3.0 μmol/L)、依折麦布B组(10.0μmol/L)、依折麦布C组(30.0 μmol/L)、瑞舒伐他汀A组(0.1 μmol/L)、瑞舒伐他汀B组(1.0 μmol/L)及瑞舒伐他汀C组(5.0 μmol/L)在用ox-LDL 50μg/ml诱导VSMC基础上,分别加入不同剂量的依折麦布或瑞舒伐他汀培养24 h;联合组,在用ox-LDL 50 μg/ml诱导VSMC基础上,加入依折麦布30.0μmol/L和瑞舒伐他汀5.0 μmol/L,培养24 h.检测各组TC、游离胆固醇(FC)及胆固醇酯(CE)水平及各组细胞LXRα、ABCA1 mRNA及蛋白表达水平.结果 与对照组比较,模型组TC、FC、CE水平显著升高,LXRα、ABCA1 mRNA及蛋白表达明显降低(P＜0.05);与模型组比较,瑞舒伐他汀C组、依折麦布C组及联合组TC、FC、CE水平显著减少,LXRα、ABCA1 mRNA及蛋白表达显著增加(P＜0.05);且联合组LXRα、ABCA1 mRNA及蛋白表达水平明显高于依折麦布各组及瑞舒伐他汀各组(P＜0.05).结论 瑞舒伐他汀、依折麦布及2个适浓度的联合均可以通过上调LXRα、ABCA1表达,促进泡沫细胞中ABCA1介导的胆固醇的逆转运,减少胆固醇在细胞中蓄积,且联合组较单药组效果更显著.
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重组腺病毒介导的人p27kip1基因高表达对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移的影响
目的探讨重组腺病毒介导的p27kip1基因及其蛋白产物高表达对血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移的抑制作用.方法将含人p27kip1cDNA的重组腺病毒(Adhp27kip1)及含β-半乳糖苷酶基因的重组腺病毒(AdLacZ)在体外转染原代大鼠主动脉VSMCs,用Western blot及Boyden趋化小室检测外源性p27kip1蛋白在细胞内的表达及对VSMCS迁移的影响.结果转染后24h,Adhp27kip1转染的VSMCs内p27kip1蛋白高表达,而AdLacZ转染的VSMCs内仅显示极低水平的内源性p27kip1蛋白表达;Boyden趋化小室检测显示未转染的VSMCs、AdLacZ及Adhp27kip1转染的VSMCs血清诱导后的迁移细胞数分别为139±26、106±16及68±14.结论外源性p27kip1基因及蛋白产物在VSMCs内高表达可显著抑制VSMCs的迁移.
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肝细胞生长因子受体在血管平滑肌细胞增殖凋亡中的表达
目的 研究球囊扩张术后血管平滑肌细胞(VSMCs)中肝细胞生长因子(HGF)及其受体(c-Met)mRNA表达的变化,明确HGF受体与VSMCs增殖凋亡分子机制的相关性.方法 用逆转录聚合酶链式反应检测36只兔腹主动脉球囊损伤前后不同时间点VSMCs中c-Met的mRNA表达水平;体外实验将选择性c-Met蛋白抑制剂NK-4作用于兔VSMCs,运用MTT分别于0、24、48及72 h检测细胞增殖状态;流式细胞仪观察NK-4对细胞凋亡的影响,进一步采用Western blot检测药物作用前后细胞周期蛋白(Cyclin D1)、凋亡蛋白(Bcl-2)的表达.结果 球囊损伤后VSMCsc-Met mRNA的表达水平明显高于正常VSMCs(P＜0.01),平均为对照组2.42倍;对照组S及G2/M期DNA百分含量与处理组比值分别为1.31,1.62(P＜0.01),NK-4呈时间、剂量依赖性方式抑制VSMCs增殖,促进其凋亡.72 h时对照组与NK-4(1.0 mg/L)处理组Cyclin D1、Bcl-2表达水平比值分别为2.37和3.81(P＜0.01),故两者表达水平随NK-4作用时间延长而下降.结论 c-Met在球囊扩张术后血管平滑肌细胞中高表达可能在VSMCs过度增殖、凋亡受阻中起重要作用.选择性c-Met蛋白抑制剂NK-4可能通过Cyclin D1,Bcl-2影响VSMCs的增殖与凋亡,提示c-Met抑制剂可作为预防血管成形术后再狭窄新的候选药物.
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分化型血管平滑肌细胞的原代培养
目的 建立大鼠主动脉分化表型血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)原代培养,为研究VSMC表型转化的分子机制提供体外研究模型.方法 无菌条件下分离大鼠胸主动脉中膜,组织贴壁法在Ⅳ型胶原蛋白包被培养瓶内培养大鼠胸主动脉VSMC,消化、过滤、离心,收集从组织块分离的单个细胞后,接种于含0.2%小牛血清、胰岛素样生长因子Ⅰ、DMEM培养液的层粘连蛋白包被的培养板上,培养1天后将培养液更换为不合血清及生长因子的DMEM.结果 根据细胞形态观察、免疫组织化学鉴定、兴奋剂刺激引发的收缩反应、分化型VSMC标志基因的检测,证实为分化型VSMC,分化状态可持续1周以上.结论 在组织贴壁法基础上,改变培养环境,可使VSMC较长时间保持于分化状态,是研究VSMC表型转化的分子机制良好的体外研究模型.
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β2-肾上腺素受体亚型激动对于血管平滑肌细胞增殖的影响
目的研究β2-肾上腺素受体亚型(beta2-adrenergic receptor,β2-AR)激动对于血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的调控效应.方法应用携带重组β2-AR片段的腺病毒感染VSMC制备受体过表达模型.分别应用Zinterol(ZIN)以及异丙基肾上腺素(ISO)刺激生理状态和β2-AR过表达的平滑肌细胞后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和细胞计数法检测吸光度(A,曾称光密度OD)值和细胞数目的改变.结果ZIN刺激1天时A值开始下降(P＜0.05),3天时抑制作用达高峰,抑制率为(32.00±1.62)%.细胞计数法测得ZIN激动3天时细胞数为对照组的(69.29±9.26)%.应用CGP20712A阻断β1-AR激活后,非选择性β-AR激动剂ISO刺激细胞后得到结果相似.特异性β2-AR拮抗剂ICI 118,551可逆转此抑制效应.ISO刺激过表达的β2-AR 3天时MTT检测结果相似.结论β2-AR亚型激动可抑制VSMC的增殖.
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白藜芦醇对血管平滑肌细胞增殖的影响
目的观察白藜芦醇(resveratrol,Res)对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖、DNA合成及细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法体外培养大鼠主动脉VSMC,分为不同浓度的Res组及对照组.观察细胞生长曲线;四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应法检测细胞活性;3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入法观察其对DNA合成的影响;HE染色,DNA梯带检测及流式细胞术检测细胞凋亡.结果与对照组比较,本研究各浓度Res组VSMC计数均有不同程度的减少,3H-TdR掺入率明显降低,细胞增殖受抑制,VSMC凋亡增加,并呈浓度依赖性.结论Res对体外培养的大鼠主动脉VSMC增殖有明显的抑制作用,可能是通过抑制细胞DNA合成,诱导细胞凋亡等途径发挥作用.
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线粒体融合素2突变体对血管平滑肌细胞凋亡的影响
目的 研究大鼠线粒体融合素2(mitofusin 2,Mfn2)基因蛋白激酶A(PKA)磷酸化位点的2种突变体对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡及其相关的信号通路的影响.方法 构建4种重组腺病毒,分别携带磷酸化位点突变为丙氨酸(重组1组)、Mfn2基因(重组2组)、突变为天冬酰胺(重组3组)和半乳糖苷酶基因(对照组),感染培养的VSMCs,另设未感染腺病毒的空白组.流式细胞术比较各组细胞的凋亡率,JC-1染色法检测线粒体膜电位变化,Western blot分析各组Mfn2蛋白的表达以及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和活性半胱天冬酶9(caspase-9)表达.结果 与空白组和对照组比较,重组1组、重组2组和重组3组Mfn蛋白显著增加(P<0.01);重组1组和重组2组细胞凋亡率显著增强(P<0.01);线粒体膜电位显著降低(P<0.01);p-Akt表达水平显著降低(P<0.01),活性caspase-9表达水平显著增高(P<0.01);且重组1组作用较重组2组更明显(P<0.01);而重组3组上述指标无显著差异(P>0.05).结论 Mfn2突变为丙氨酸的位点PKA通过Akt信号及线粒体途径诱导VSMCs凋亡的作用较Mfn2更明显,表明PKA磷酸化位点是调控Mfn2诱导VSMCs凋亡的重要功能位点.
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大鼠局灶性脑缺血再灌注小动脉血管平滑肌细胞表型转化的实验研究
目的观察大脑中动脉缺血再灌注大鼠模型小动脉血管平滑肌细胞(VSMC)中两种血管舒缩功能相关蛋白(α-平滑肌肌动蛋白和细丝蛋白)的免疫组织化学表达变化,以期了解脑小动脉病变中VSMC的表型转化及细丝蛋白在表型转化中的意义,指导临床小动脉硬化型脑卒中的准确防治.方法缺血再灌注组依照再灌注时间的不同分为2、6、12、24h、3 d及7 d共6个亚组,另设正常对照组及大脑中动脉持续缺血组.按时相点取材,免疫组织化学染色,图像分析.结果α-平滑肌肌动蛋白在再灌注6 h后表达明显下降,在24h时表达低,在3 d时表达有所升高,7 d时表达高;细丝蛋白缺血2 h后表达稍有下降,以12 h时的表达低,24h时表达升高,在3 d时表达高.结论再灌注损伤可引起小动脉VSMC表型的变化;细丝蛋白也可作为VSMC表型变化的指标之一,与α-平滑肌肌动蛋白相比意义更大;细丝蛋白和α-平滑肌肌动蛋白可能在再灌注中起下调炎症反应及保护细胞的作用.
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骨髓基质干细胞种植体外修复内皮及对血管平滑肌细胞增生的影响
目的探讨骨髓基质干细胞(MSCs)种植体外修复内皮的可行性及对血管平滑肌细胞增生的影响.方法培养兔血管内皮、平滑肌和人MSCs,通过细胞共培养模拟血管内皮修复过程,用流式细胞仪分析MSCs分子表型特征,免疫荧光细胞化学法观察与内皮共培养的MSCs Flk-1和vWF蛋白表达,根据下室内皮生长状态及是否接种MSCs将其分为对照组、单纯MSCs组、融合内皮组、对数内皮组和MSCs种植组.氚-胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入检测平滑肌细胞DNA合成,Western blot检测平滑肌细胞中增殖细胞核抗原蛋白表达.结果分离的MSCs表达基质细胞标志CD105和CD166,不表达造血干祖细胞和内皮细胞标志CD34、Flk-1、vWF;与内皮共培养5天时,vWF染色仍为阴性,但约25.71%MSCs开始表达Flk-1;MSCs种植组平滑肌细胞3H-TdR掺入虽高于融合内皮组,但与对数内皮组比较显著降低;MSCs种植组平滑肌细胞PCNA蛋白吸光度相对值虽高于融合内皮组,但与对数内皮组比较明显减少.结论MSCs种植能抑制平滑肌细胞增生,种植在成熟内皮中的MSCs具有微环境依赖向内皮分化的能力.
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莪术组分涂层支架预防猪冠状动脉再狭窄的研究
目的 通过中华实验用小型猪冠状动脉再狭窄模型,观察中药莪术组分涂层支架抑制内膜增殖的有效性.方法 将18只小型猪随机分为莪术组分涂层支架组(ZES组)、雷帕霉素涂层支架组(SES组)及金属裸支架组(BMS组),每组6只,分别在左前降支、左回旋支及右冠状动脉置入同一种支架各1枚.术后30 d冠状动脉造影后将猪处死,观察支架血管段的病理形态及影像学变化.结果 30 d时,与BMS组比较,ZES组和SES组平均管腔直径和平均管腔面积均明显增大(P＜0.05),直径狭窄率和面积狭窄率明显减小(P＜0.05);与SES组比较,ZES组和BMS组炎症积分明显降低,内皮化积分明显升高(P＜0.05);3组损伤积分比较,差异无统计学意义(P＞0.05);光学相干断层扫描及扫描电镜观察,SES支架组30 d时可见部分支架节段内皮化不全及炎性细胞浸润.结论 ZES支架可有效地抑制血管内膜增殖,具有良好的生物相容性.
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人参皂甙Rg3对血管平滑肌细胞衰老的影响及机制
目的 探讨人参皂甙Rg3对D-半乳糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)衰老的影响及机制.方法 取SD大鼠胸主动脉中层,分离并原代培养VSMC,选取3～6代VSMC,通过D-半乳糖共孵育的方法诱导细胞衰老,β-半乳糖苷酶染色和透射电镜鉴定衰老VSMC;VSMC随机分成对照组、D-半乳糖组、Rg3高浓度组、Rg3低浓度组,Western blot方法检测p16、p21和p53蛋白的表达水平,流式细胞术检测细胞周期.结果 与对照组比较,D-半乳糖组％-半乳糖苷酶阳性细胞明显升高[(58.67±2.52)％ vs (4.67±0.58)％,P＜0.05].电镜下表现为细胞核膜内折,细胞线粒体肿胀,脂褐素堆积;p16、p21和p53蛋白表达水平明显升高(P＜0.05),细胞周期停滞在G0/G1期.与D-半乳糖组比较,Rg3低浓度组和Rg3高浓度组β-半乳糖苷酶阳性细胞明显减少,p16、p21和p53蛋白表达水平明显降低,G0/G1期细胞数明显减少(P＜0.05).结论人参皂甙Rg3可抑制VSMC衰老,其机制可能部分通过抑制细胞生长周期p16INK4a/Rb、p53-p21Cip1/Wan信号通路来实现.
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降压药物对高血压大鼠血管平滑肌细胞离子泵活性及分泌血管紧张素Ⅱ的影响
目的 观察不同类型的降压药物对自发性高血压大鼠(SHR)动脉血管平滑肌细胞钠泵、钙泵活性及分泌血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)的影响.方法 采用组织块种植法培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞24 h后,分为WKY大鼠组、SHR组、赖诺普利组、氨氯地平组、伊贝沙坦组、氢氯噻嗪组和美托洛尔组.分别用不同药物对SHR动脉血管平滑肌细胞进行干预.采用生化酶学方法、放射免疫分析法分别测定细胞膜离子泵活性和Ang Ⅱ浓度.结果 与WKY大鼠组比较,SHR组大鼠钠泵和钙泵活性明显降低(P<0.01),Ang Ⅱ浓度明显升高(P< 0.05);与SHR组比较,赖诺普利组、伊贝沙坦组钠泵和钙泵活性明显增高(P<0.05,P<0.01);氨氯地平组钠泵活性明显增高(P< 0.01);氢氯噻嗪组和美托洛尔组钠泵、钙泵活性及Ang Ⅱ浓度差异无统计学意义.与SHR组比较,赖诺普利组、氨氯地平组Ang Ⅱ浓度明显降低(P< 0.05),伊贝沙坦组Ang Ⅱ浓度明显升高(P< 0.05).结论 赖诺普利、伊贝沙坦和氨氯地平能提高SHR动脉血管平滑肌细胞膜离子泵活性,并影响其分泌Ang Ⅱ.
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溶血磷脂酸受体3介导溶血磷脂酸诱导的血管平滑肌细胞表型转化
目的 探讨溶血磷脂酸(LPA)受体在LPA诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用及相关信号传导通路.方法 培养SD大鼠分化表型VSMC,培养液加胰岛素样生长因子(IGF-1)为IGF-1组,加溶剂载体为空白组,以不同浓度水平LPA(0.1～10 μmol/L)刺激,依次为LPA 0.1组、LPA 1组和LPA 10组,并在LPA(1μmol/L)条件下,以LPA受体1,3拮抗荆二辛烷甘油焦磷酸盐(DGPP 8:0)为DGPP 1组,RT-PCR法检测平滑肌肌动蛋白α(SMA-α)和骨桥蛋白mRNA表达,Western blot法检测p38分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK),细胞外信号调节激酶(ERK)及其磷酸化蛋白水平.结果 与空白组和IGF-1组比较,LPA 0.1组、LPA 1组和LPA 10组呈剂量依赖促进骨桥蛋白mRNA表达上升,SMA-α mRNA表达下降(P＜0.01);与空白组比较,LPA 1组p38MAPK和ERK激活(P＜0.01),DGPP 1组p38MAPK和ERK无明显变化(P＞0.05).结论 与Gq蛋白偶联的LPA受体3介导了LPA诱导的VSMC表型转化,阻滞上述通路有可能成为控制与动脉粥样硬化和再狭窄等血管疾病相关的VSMC表型转化潜在的治疗干预靶点.
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脱氢表雄酮对氧化应激诱导的血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1 mRNA表达的影响
目的 观察脱氢表雄酮(DHEA)对氧化应激诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA达的影响.方法 贴块法培养雄性Wistar大鼠胸主动脉VSMC,实验分A组(对照组)、B组(50 μmol/L H2O2处理6 h)、C组(50 μmol/L H2O2+1 nmol/L DHEA处理6 h)和D组(50 μmol/L H2O2+10 nmol/L DHEA处理6 h).逆转录聚合酶链式反应检测MCP-1的mRNA表达;比色法检测细胞丙二醛(MDA)含量.结果 B组VSMC的MCP-1mRNA表达及细胞MDA的含量显著高于A组;与B组比较,C组和D组VSMC的MCP-1 mRNA表达及细胞MDA含量显著降低,其中D组降低更为明显.结论 DHEA能显著抑制H2O2引起VSMC的MCP-1 mRNA表达的上调,从而减轻氧化应激对VSMC的损伤,这部分是通过DHEA的直接抗氧化作用达到的.
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卡维地洛对兔颈动脉易损斑块与血管平滑肌细胞凋亡及基因表达的影响
目的 探讨动脉易损斑块(VP)与血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的关系及卡维地洛稳定斑块的作用机制.方法 将45只雄性日本大耳白兔随机分成5组,分别为正常对照组、卡维地洛组、美托洛尔组、单纯转染组和单纯拉伤组,每组9只.正常对照组给予普通饲料,其他组给予球囊损伤颈总动脉加高脂喂养,8周后,除单纯拉伤组,其他3组给予野生型p53基因转染颈总动脉,卡维地洛组和美托洛尔组分别加喂卡维地洛和美托洛尔,继续高脂饲料喂养4周;实验前、实验后8、12周分别测定血脂;实验结束后检测斑块VSMC凋亡率及bc1-2、bax、α平滑肌肌动蛋白(α-actin)的局部表达情况,并分析血管病理形态学.结果 球囊损伤组均出现典型动脉粥样硬化斑块,与单纯转染组比较,美托洛尔组及卡维地洛组纤维帽厚度均明显增加,卡维地洛组更显著(P＜0.01);卡维地洛和美托洛尔对血脂均无明显影响;卡维地洛组斑块中VSMC凋亡率、bax及bax/bc1-2比值下降,上调α-actin、bc1-2阳性表达(P＜0.01).结论 卡维地洛稳定斑块作用优于美托洛尔,其机制可能在于卡维地洛除β受体阻断作用外还具有抑制VSMC凋亡的作用.
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齐墩果酸对过氧化氢诱导血管平滑肌细胞凋亡的影响
目的 研究齐墩果酸(OA)对H2O2诱导血管平滑肌细胞( VSMCs)凋亡的影响.方法 采用贴块法培养大鼠主动脉VSMCs,随机分为对照组、H2O2组、H2O2 +OA组、阻断荆组.采用Hoechst 33342染色和Annexin V/FITC染色检测各组细胞凋亡情况；Western blot检测各组细胞中磷酸化Akt蛋白表达变化.结果 与对照组比较,H2O2组细胞凋亡率明显升高,p-Akt蛋白表达明显降低(P＜0.05)；与H2O2组比较,H2O2+OA组细胞凋亡率明显降低,p-Akt蛋白表达明显升高(P＜0.05)；与H2O2 +OA组比较,阻断剂组细胞凋亡率明显升高,p-Akt蛋白表达明显降低(P＜0.05).荧光显微镜显示,对照组细胞核呈蓝色,H2O2组细胞核呈致密浓染,H2O2+ OA组细胞核呈蓝染,有少量细胞核致密浓染,阻断刺组细胞核呈致密浓染.结论 OA能减轻H2O2导致的VSMCs凋亡,其机制可能与激活细胞内磷脂酰肌醇-3激酶/Akt信号通路引起下游促生存基因的表达有关.
