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胃癌中RhoC、VEGF-C和c-Myc表达的相关性 研究及临床意义
目的 应用免疫组化法检测胃癌组织中RhoC、VEGF-C和c-Myc的表达,观察它们之间的相关性.方法应用免疫组化法检测通辽市医院自2010年9月-2017年6月收集的58例胃癌标本中RhoC、VEGF-C和c-Myc的表达情况.应用SPSS 19.0统计学软件分析RhoC、VEGF-C和c-Myc与胃癌临床病理的关系及三者之间的相关性.结果随着胃癌浸润的加深、 分化程度降低、 淋巴结转移的发生,RhoC阳性表达率依次为34.21％和80.00％、41.30％和83.33％、82.35％和36.59％;VEGF-C阳性表达率依次为55.26％和85.00％、58.70％和91.67％、88.24％和56.10％;c-Myc阳性表达率依次为63.16％和90.00％、65.22％和100.00％、94.12％和63.41％,均逐渐增高;三者在胃癌组织中的表达呈正相关.结论RhoC、VEGF-C和c-Myc在胃癌发展过程中具有协同作用.
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小鼠肝癌细胞肺高转移株的建立及鉴定
目的:建立小鼠肝癌细胞肺高转移株,为研究转移相关分子机制提供合适的模型.方法:将H22肝癌腹水瘤细胞(简称M0)经尾静脉注入昆明小鼠,获取肺转移结节,再制备腹水瘤、尾静脉注射、形成肺转移瘤.重复操作获得第4代肺高转移株(简称M4),检测其小鼠肺转移能力和体外增殖能力、细胞分裂指数、染色体形态及细胞周期比例,并用RTPCR方法测定RhoC基因mRNA的表达来进一步加以验证.结果:经尾静脉注射,M4较早出现肺转移,肺转移结节数多、体积大.M4与M0体外结果比较:倍增时间缩短了38.73％；细胞分裂指数是4.11％±0.11％,明显多于M0的4.70％±0.19％(P=0.014)；S期比例是56.10±4.76％,明显高于M0的46.98±4.49％(P=0.022)；二者染色体数目相同,但M4异型性明显；RhoC基因表达分别是1.011±0.163和0.486±0.045,M4的表达显著增高(P=0.0029).结论:建立了小鼠肝癌细胞肺高转移细胞株,其RhoC基因表达明显上调.
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RhoC和IQGAP1蛋白在原发性肝细胞癌中的表达及意义
目的:探讨RhoC和IQGAP1蛋白在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床病理意义.方法:采用免疫组织化学法分别检测56例原发性肝细胞癌和15例正常肝组织中RhoC及IQGAP1蛋白的表达,并分析两者的相关性及与临床病理因素的关系.结果:RhoC和IQGAP1在原发性肝细胞癌组织中的表达明显高于正常组织(66％ vs 20％;75％ vs 13％,均P＜0.05),且两者的表达呈正相关(r=0.631,P＜0.05),并与肿瘤组织的分化程度及门脉浸润等均密切相关(均P＜0.05).结论:RhoC及IQGAP1在原发性肝细胞癌的发生、发展中发挥重要的促进作用,可考虑作为HCC临床评价肿瘤生物学行为及评估预后的指标.
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自分泌运动因子受体和RhoC基因在肝细胞癌侵袭转移中的作用
目的探讨自分泌运动因子受体(AMF-R)基因和RhoC基因的表达在肝细胞癌(HCC)侵袭转移的作用.方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)在半定量水平检测25例HCC及其相对应的癌旁肝组织中AMF-R和RhoC mRNA的表达.将25例HCC分为AMF-R过表达组和高表达组或RhoC过表达组和高表达组,比较两组在临床病理特征方面的差异;同时对HCC中AMF-R和RhoC基因的表达进行相关性分析.结果 25例HCC中AMF-R和RhoC mRNA的表达量均较癌旁肝组织高(P<0.01);过表达AMF-R mRNA组的HCC更易出现静脉浸润,且以结节性HCC居多(P<0.05);而过表达RhoC mRNA组的HCC分化较差,静脉浸润严重,以结节性HCC居多且多伴有肝外转移灶(P<0.05).HCC中AMF-R和RhoC mRNA的表达呈正相关.结论 AMF-R和RhoC mRNA的过表达促进HCC的侵袭和转移,两者在HCC中的表达具有相关性.
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RhoC/ROCK-Ⅰ信号通路封闭对卵巢癌细胞生物学行为影响的研究
目的:探讨 RhoC/ROCK-Ⅰ信号转导通路的封闭对卵巢癌细胞体外生物学行为的影响.方法:RT-PCR及蛋白质印迹法检测RhoC及ROCK-Ⅰ在不同卵巢癌细胞系中mRNA及蛋白的表达水平;将ROCK-Ⅰ反义寡核苷酸(ASODN)转染人卵巢癌细胞系SW626与Caov-3细胞后,检测转染前后ROCK-Ⅰ蛋白的表达,Boyden小室观察各株细胞转染前后侵袭及运动能力的变化,MTT比色法测定转染前后黏附能力的变化.结果:RhoC和ROCK-Ⅰ在4种卵巢癌细胞中呈不同程度表达,其中RhoC的表达水平与癌细胞侵袭力和迁移能力呈正相关,r=0.95,P<0.01,转染ROCK-Ⅰ ASODN后,细胞内ROCK-Ⅰ的表达明显减少;细胞的侵袭能力受到明显的抑制,10 μmol/L组和20 μmol/L组SW626细胞的侵袭能力分别为对照组的(75.6±3.8)%和(54.7±2.9)%,Caov-3为(68.8±4.7)%和(50.0±4.5)%;转染两种浓度ASODN的SW626与Caov-3细胞的随机运动能力分别为对照组的(80.0±1.3)%、(63.7±1.9)%、(72.0±1.3)%和(55.9±2.5)%;定向运动能力分别为对照组的(83.9±1.4)%、(64.1±1.3)%、(72.5±3.4)%和(54.5±1.9)%.结论:RhoC/ROCK-Ⅰ信号转导通路与人卵巢癌细胞的体外侵袭与迁移密切相关,阻断ROCK-Ⅰ的表达可有效地抑制卵巢癌肿瘤细胞的体外侵袭能力.
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RhoC表达与体外乳腺癌细胞系侵袭行为的相关性
目的 研究RhoC在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达及其与乳腺癌侵袭行为的相关性.方法 利用逆转录-聚合酶链反应、Western blot、细胞爬片免疫组织化学和免疫荧光组织化学染色检测乳腺癌低转移细胞系MCF-7和高转移细胞系MDA-MB-231中RhoC mRNA和蛋白表达水平.构建RhoC真核表达载体,并转染乳腺癌低转移细胞系MCF-7;利用Matrigel穿膜侵袭实验检测转染后细胞的体外侵袭能力,划痕修复实验检测运动迁移能力,组织化学染色检测微丝骨架结构的变化,并利用Western blot检测Akt磷酸化水平变化.结果 RhoC在不同转移能力的乳腺癌细胞系中呈不同程度表达,在高转移细胞系MDA-MB-231中高表达,在低转移细胞系MCF-7中低表达,差异有统计学意义(P＜0.01).基因转染过表达RhoC后,乳腺癌细胞的体外侵袭能力明显增强,正义转染组穿膜细胞数(56.88±4.18)与其相应空载体组(23.77±3.64)、反义组(23.12±3.22)和未转染对照组(28.44±2.48)比较,明显增多(P＜0.01);运动迁移能力明显增强,正义转染组24 h划痕修复率(58.28%±2.14%)明显高于转染空载体组(28.23%±2.62%)、反义组(22.36%±2.73%)和未转染对照组(30.18%±2.86%),差异有统计学意义(P＜0.01);组织化学染色显示,正义转染组细胞内肌动蛋白多聚体减少,微丝骨架重构;此外,RboC正义转染组细胞p-Akt水平升高.结论 RhoC过表达促进乳腺癌细胞的体外侵袭能力,并与乳腺癌细胞系转移潜能正相关,有望成为阻断乳腺癌转移的新靶点.
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胃癌组织中RhoC蛋白的表达及其临床意义
目的 探讨胃癌组织中RhoC蛋白的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化S-P法检测45例胃癌组织及其相应的30例癌旁不典型增生组织和30例正常胃黏膜组织中RhoC蛋白的表达.结果 胃癌组织中RhoC蛋白的阳性表达率高于癌旁不典型增生组织和正常胃黏膜组织(P＜0.05)；胃癌组织中RhoC蛋白的阳性表达与临床分期、浸润深度及淋巴结转移有关(均P ＜0.05),而与患者年龄、性别及分化程度无关(均P＞0.05).结论 RhoC蛋白在胃癌组织中的异常表达与胃癌的发生、发展及浸润转移有关.
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RhoC在大肠腺癌中的表达及临床意义
招生处大肠癌是消化道常见的恶性肿瘤之一,死亡率较高.研究表明其生物学行为与某些分子指标有关.本研究运用免疫组化SP法检测62例大肠腺癌组织、25例结肠腺瘤及15例正常肠粘膜中Rho基因家族的一个小分子量G蛋白成员RhoC的表达情况,目的 在于探讨它们在大肠癌的发生发展及浸润转移中所起的作用,为大肠癌的诊断、治疗及预后判断提供新的思路和理论依据.
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胃癌组织中VEGF-C、CD105和RhoC mRNA的表达及意义
目的 探讨血管内皮生长因子C(VEGF-C)、CD105和Ras同源蛋白C(RhoC)mRNA在胃癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法 采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Real-time PCR)检测62例胃癌组织及62例癌旁周围组织中VEGF-C、CD105和RhoC的表达.结果 VEGF-C mRNA在胃癌组织中的表达量(0.367±0.073)显著高于癌旁正常胃组织(0.121 ±0.058),P＜0.01.胃癌组织中VEGF-C蛋白阳性表达率为53.2％ (33/62)显著高于癌旁正常胃组织中阳性表达率8.1％ (5/62),P＜0.01.胃癌组织中VEGF-C mRNA及蛋白的表达与有无淋巴结转移、TNM不同分期差异有统计学意义(P＜0.01),而与性别、年龄、肿瘤直径、分化程度、浸润深度差异无统计学意义(P＞0.05).CD105 mRNA在胃癌组织中的表达量(0.419±0.072)显著高于癌旁正常胃组织(0.214 ±0.058),P＜0.01.胃癌组织中CD105蛋白的阳性表达率为88.1％ (52/62)显著高于癌旁正常胃组织中的阳性表达率11.3％ (7/62),P＜0.01.胃癌组织中CD105 mRNA及蛋白的表达与浸润深度、有无淋巴结转移、TNM不同分期差异有统计学意义(P＜0.01),而与性别、年龄、肿瘤直径、分化程度差异无统计学意义(P＞0.05).RhoC mRNA在胃癌组织中的表达量(1.122 ±0.211)显著高于癌旁正常组织(0.868 ±0.199),P＜0.01.胃癌组织中RhoC蛋白阳性表达率为75.8％ (47/62)显著高于癌旁正常胃组织中阳性表达率22.6％(14/62),P＜0.01.胃癌组织中RhoC mRNA及蛋白的表达与浸润深度、有无淋巴结转移、TNM不同分期差异有统计学意义(P＜0.01),而与性别、年龄、肿瘤直径、分化程度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 VEGF-C、CD105和RhoC可能在胃癌的发生、发展和淋巴结转移中发挥重要作用.
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RhoC、IQGAP1在肿瘤研究中的进展
肿瘤的发生和发展是一个长期的、分阶段的、多种基因突变积累的复杂过程,是由多个激活的原癌基因、失活的抑癌基因、变化的有关融合基因,以及一系列信号转导通路参与完成的.其中任何一个因素的改变都可以引起细胞增殖和凋亡失去控制从而导致肿瘤的发生.癌细胞的无限增殖和转移是重要的肿瘤恶性生物学行为,且血管、淋巴管形成是癌细胞增殖和转移的基础,大多数癌症患者死于肿瘤的复发和转移,导致死亡的原因主要是肿瘤转移直接侵犯器官,副肿瘤综合征,和或治疗引起的并发症,因此明确肿瘤的复发,尤其是转移机制,可以为肿瘤的预防和治疗提供一些新的思考方向和治疗策略.Rho蛋白家族作为小G蛋白,是Ras蛋白超家族的一员,具有GTP酶活性,其参与多种重要的细胞生命活动,如肌动蛋白细胞骨架的重构、细胞的粘附和迁移,细胞周期的调控等[1].
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RhoC及其效应分子ROCK2在人喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义
目的 探讨RhoC及其效应分子ROCK2在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中的表达及临床意义.方法 运用免疫组化技术检测50例LSCC标本RhoC和ROCK2蛋白的表达,并检测22例正常鳞状上皮中ROCK2蛋白的表达.结果 RhoC在不同LSCC组织中的差异表达与相应患者的淋巴结转移(P=0.020)和临床分期相关(P =0.042)；ROCK2在正常鳞状上皮与LSCC组织中的阳性表达率之间具有显著差异(P =0.039),而在不同LSCC组织中其差异表达仅与相应患者的肿瘤大小相关(P=0.045)；将LSCC组织中RhoC和ROCK2的表达同时为阳性定义为RhoC - ROCK2通路阳性,发现这条通路在不同LSCC组织中的差异表达均与淋巴结转移相关(P =0.004),但与肿瘤大小无关(P=0.319).结论 RhoC及其效应分子ROCK2的异常表达可能与LSCC的进展尤其是淋巴结转移的发生有关.
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ROCK抑制剂Y-27632对Hep-2细胞中RhoC及ROCK表达的影响
目的 探讨ROCK抑制剂Y-27632对喉癌细胞系Hep-2中RhoC及ROCK表达的影响.方法 在体外培养的喉癌细胞系Hep-2的培养液中加入ROCK抑制剂Y-27632后,用免疫荧光法,RT-PCR及Western blot检测喉癌细胞Hep-2细胞系RhoC及ROCK-1,ROCK-2的mRNA及蛋白的表达水平.结果 经过Y-27632处理后,Hep-2中RhoC及ROCK-1和ROCK-2在细胞的mRNA及蛋白的表达下降.结论 Y-27632可抑制ROCK-1、ROCK-2及RhoC的表达.
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RhoC表达对喉鳞癌Hep2肿瘤细胞凋亡、肿瘤干细胞标志物-ALDH1A1及细胞形态的影响
目的 研究Ras同源类似物C(ras homology C,RhoC)对喉鳞状细胞癌生物学行为的影响.方法 通过脂质体转染技术将外源基因导入喉鳞状细胞癌细胞-Hep2肿瘤细胞,抑制/增强肿瘤细胞中RhoC表达,TUNEL法检测RhoC对Hep2肿瘤细胞凋亡的影响,罗丹明标记的鬼笔环肽染色细胞骨架观察Hep2肿瘤细胞形态变化,实时荧光定量核酸扩增检测(real-time quantitative polymerase chain reaction detecting system,QPCR)方法检测RhoC对Hep2肿瘤细胞肿瘤干细胞标志物乙醛脱氢酶A1(aldehyde dehydrogenase 1 family,member A1,ALDH1A1)的表达的影响.结果 抑制RhoC表达可使Hep2肿瘤细胞凋亡增强,肿瘤细胞群中肿瘤干细胞标志物ALDH1A1 mRNA表达水平降低;改变RhoC表达后,肿瘤细胞形态发生了不同的改变.结论 RhoC在喉鳞癌的转移中具有重要的作用,以RhoC为治疗靶点在控制肿瘤转移方面具有重要的临床应用价值.
关键词： RhoC ALDH1A1 Hep2喉鳞癌肿瘤细胞 肿瘤干细胞 转移 -
RhoC基因与肿瘤的侵袭和转移
恶性肿瘤是严重危害人类健康的常见疾病,其主要生物学特征为侵袭和转移.肿瘤的侵袭、转移包括从原发部位浸润性生长、穿透细胞外基质、进入血管、淋巴管或体腔中游走、与靶器官黏附后向间质侵袭以及增殖形成转移灶等几个阶段.这是一个多步骤、多阶段、多基因的复杂过程.肿瘤细胞游走运动一直被视为其侵袭转移的关键步骤之一,并与肿瘤的转移、预后等有密切的关系.在肿瘤细胞的游走过程中,RhoC起着关键的作用.
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RhoC及PTEN在非小细胞肺癌中的表达及临床意义的探讨
目的 观察Ras同源性原癌基因C(RhoC)及张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达程度及其与临床病理学之间的关系,探索RhoC与PTEN在肺癌发生及演变过程中的作用机制及两者之间的关系,为非小细胞肺癌的发生机制提供理论基础,并为NSCLC的早期诊断提供新思路.方法 (1)试验分组:60例非小细胞肺癌标本及40例正常对照肺组织.(2)采用免疫组织化学方法检测RhoC及PTEN表达情况及其与临床病理学之间的关系. 结果 60例NSCLC组织中, RhoC蛋白阳性表达率分别为68.33%(41/60),显著高于正常肺组织,RhoC在NSCLC组织中阳性表达率与吸烟史、年龄及组织学类型无关,而与癌组织的分化程度、临床分期密切相关.PTEN在非小细胞肺癌组织中的阳性率为36.70%,显著低于非肺癌组织的阳性率80.00%(P<0.01);PTEN的表达与肺癌患者的细胞分化程度、TNM分期、肿瘤直径相关.RhoC和PTEN两者表达强度之间呈显著负相关(P<0.01).结论 (1)在非小细胞肺癌组织中RhoC的高表达与PTEN的低表达密切相关,可能参与了NSCLC的演进.(2)PTEN基因蛋白表达缺失在不同类型和不同分化程度的非小细胞肺癌发生、发展中存在重要意义,可作为判断肺癌生物学行为和患者预后的参考指标.
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结肠癌组织中RhoC的表达及其临床意义的实验研究
目的 研究RhoC 在结肠癌组织中的表达与相关临床病理因素的关系.方法 采用免疫组织化学检测结肠癌和癌旁组织中RhoC 蛋白表达情况.结果 结肠癌组织中RhoC 蛋白表达阳性率明显高于相应癌旁组织,差异具有统计学意义(P＜0.05).RhoC 蛋白阳性表达结肠癌的浸润深度、临床分期和患者预后有关(P＜0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤分化程度和有无淋巴结转移无相关性(P＜0.05).结论 RhoC 在结肠癌组织中的过表达,并且参与了结肠癌的发生和发展.
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翼状胬肉标本中 RhoC 和 MMP -9的表达及相关性研究
目的：研究RhoC蛋白和基质金属蛋白酶-9（ MMP-9）在翼状胬肉中的表达及二者的相关性，探讨利用RhoC及MMP-9作为标记物评估翼状胬肉生物学特性的可行性。方法应用辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素免疫组织化学方法（ S-P法）对45例原发性翼状胬肉和16例正常球结膜组织中的RhoC及MMP-9蛋白进行检测。结果 RhoC及MMP-9蛋白在翼状胬肉组织中的表达均显著高于正常结膜组（P均＜0．05）。 RhoC及MMP-9蛋白表达之间的相关系数r＝0．562，有显著性差异（P＜0．05）。结论检测RhoC及MMP-9在翼状胬肉中的表达，可有效判断患者翼状胬肉的发病及复发情况，以便于早期采取相关治疗措施，减轻患者痛苦及经济负担。
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RhoC和EGFR在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义
目的 研究RhoC和EGFR在不同级别人脑胶质瘤组织中的表达情况,并探讨其与病理分级的关系及临床意义.方法 分别采用免疫组化(SP法)对215例不同级别人脑胶质瘤(胶质瘤组)和10例正常脑组织(对照组)中RhoC和EGFR的表达情况进行检测,并分析RhoC和EGFR表达的相关性.结果 与正常脑组织相比,RhoC和EGFR在人脑胶质瘤中的表达均显著增加.随着胶质瘤恶性程度的增加,EGFR和RhoC的阳性表达率逐渐增高,两者在胶质瘤组织中的表达呈正相关.结论 RhoC和EGFR在人脑胶质瘤中表达均显著增加,且其表达具有相关性.RhoC和EGFR信号通路可能在人脑胶质瘤的发生、发展和侵袭中起着一定的协同作用,可作为胶质瘤恶性程度的生物学指标.
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RhoC和Ki-67蛋白在翼状胬肉中的表达与临床病理特点的关系
目的 研究RhoC和Ki-67蛋白在翼状胬肉中的表达及二者的相关性,探讨RhoC及Ki-67作为标记物评估翼状胬肉生物学特性的可行性.方法 应用辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素免疫组织化学方法(S-P法)对45例原发性翼状胬肉及16例正常球结膜组织中的RhoC及Ki-67蛋白进行检测,分析二者相关性.结果 RhoC及Ki-67蛋白在翼状胬肉组织中的表达均显著高于正常结膜组(P均＜0.05).静止期和进展期翼状胬肉中Rho C及Ki-67表达比较差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 检测RhoC及Ki-67在翼状胬肉中的表达,可有效判断患者翼状胬肉的发病及复发情况,便于早期采取相关治疗措施,减轻患者痛苦及经济负担.
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RhoC和FoxM1与肿瘤转移关系的研究进展
RhoC(Ras homologous C)和叉头框转录因子M1(Forkhead Box M1,FoxM1)在人类多种恶性肿瘤侵袭和转移中起着重要作用.本文就RhoC和FoxM1基因表达与肿瘤转移关系的研究进展进行综述.
