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失血性休克大鼠海马中HSP70表达及死后稳定性研究
目的:探讨失血性休克死亡大鼠海马中热休克蛋白(Heat-shock protein 70,HSP70)的表达情况以及其死后稳定性.方法:健康SD大鼠105只,随机分成5组:正常组、假手术组、失血性休克组、创伤对照组、死后稳定性组.采用放血法使大鼠动脉血压降至40 mmHg,建立大鼠失血性休克模型(休克组、稳定性组)及重物砸伤脑组织建立脑挫伤模型(创伤组),运用免疫组化和图像分析技术,检测生前以及死后不同时间点大鼠海马中HSP70的表达变化规律.结果:与正常组、假手术组和创伤对照组比较,失血性休克1h后各亚组海马HSP70均表达明显增强(P<0.01),死后稳定性组各时间点HSP70表达无显著性差异(P>0.05).结论:HSP70在失血性休克大鼠海马中特异性表达,在-20℃条件下,死后稳定性好.
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大鼠脑外伤后BDNF的表达及其死后稳定性的研究
目的:探讨脑外伤后脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophieal factor,BDNF)表达的变化和损伤时间的关系及其死后稳定性.方法:将健康SD大鼠105只,随机分成4组:正常组、假手术组、脑外伤组、死后稳定性组.采用重物砸伤脑组织建立脑外伤模型(创伤组、稳定性组),运用免疫组化和图像分析技术,检测各组BDNF的表达变化规律.结果:与正常组、假手术组比较,损伤后0.5 h,BDNF的免疫反应阳性细胞在损伤区周围增多,损伤后6 h BDNF阳性细胞数达高峰,以后逐渐下降,24 h后降至接近正常;死后稳定性组各时间点BDNF表达无显著性差异(P＞0.05).结论:脑外伤后BDNF表达与损伤时间具有相关性;在-20℃条件下,死后稳定性好.
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大鼠皮肤切创后E-选择素表达及稳定性研究
目的 探讨大鼠皮肤切创后E-选择素表达规律及法医学意义.方法 健康SD大鼠90只,随机分成4组:正常对照组、活体切创组(30min～7d 12个时间点)、死后切创组(30min～3h 3个时间点)、死后稳定性组(-20℃6h～7d 9个时间点,25℃6h～3d 5个时间点).在大鼠头部建立皮肤切创模型,按设定的时间点取皮肤检材,运用免疫组化和图像分析技术,检测血管内皮E-选择素的表达规律.结果 在活体切创组中,伤后1h E-选择素在血管内皮细胞内即呈阳性表达,持续至伤后7d,且随时间变化呈规律性表达.在正常对照及死后切创组未见阳性表达.死后-20℃稳定性组各时间点E-选择素表达与死后即刻比较无显著性差异(P>0.05).25℃各时间点与死后即刻比较有显著性差异(P<0.01).结论 E-选择素在创伤后血管内皮细胞内特异性的表达具有时序性规律,且低温条件下稳定性较好.
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VEGF在家兔缺血心肌中的表达及其死后稳定性研究
目的 观察心肌中VEGF在死后一定时间的稳定性及表达的变化规律,评价其对死后诊断机体早期心肌缺血的作用.方法 用冠状动脉结扎法建立家兔急性心肌缺血模型,应用SP法染色、图像分析和统计学处理系统,检测缺血心肌细胞内VEGF阳性表达面积和强度,并对VEGF在死后不同时间的稳定性进行比较. 结果 VEGF在缺血心肌组织中,见灶性或成片心肌细胞强阳性表达,部分细胞呈阴性或弱阳性表达,血管内皮及平滑肌细胞表达弱阳性,间质表达阴性;在4℃放置,随时间延长,缺血心肌组织VEGF阳性表达有减弱趋势,至10d时缺血心肌组织仍可见VEGF在少许心肌细胞胞浆内呈弱阳性表达.在4℃放置10d以内,缺血心肌和正常心肌标本之间VEGF阳性表达具有极显著性差异. 结论 VEGF能耐受一定程度自溶及腐败的影响,其免疫组化检测对于判断死后4℃放置10d以内的尸体是否出现过心肌缺血具有一定意义.
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心肌梗死6项免疫组化指标的死后稳定性比较
目的探讨用于早期心肌梗死死后诊断的维连接蛋白(Fn)、纤维蛋白原(Fg)、补体(C5)、肌红蛋白(Mb)、肌动蛋白(HHF35)、结蛋白(Dm)等6项免疫组化指标在死后不同时间的稳定性.方法应用免疫组织化学法、图像分析和统计学处理系统,检测缺血心肌细胞内Mb、HHF35、Dm的缺失面积和Fn、Fg、C5的阳性反应面积,并对6项免疫组化指标在死后不同时间的稳定性进行比较.结果正常心肌组织4℃放置1～2d,Dm、HHF35、Mb染色均匀,未见明显缺失;放置3d以上,即可见Dm、HHF35、Mb明显缺失,且随放置时间延长,缺失面积逐步增大.缺血心肌组织随放置时间延长,Dm、HHF35、Mb的缺失面积逐步增大,Fg、C5、Fn阳性反应面积逐渐减少;放置14d以上,Fg呈阴性反应;放置21d以上,C5呈阴性反应;放置28d,Fn仍呈阳性反应.正常心肌组织放置不同时间,均未见Fg、C5、Fn阳性反应.图像分析结果显示阳性反应面积逐步减少.结论Dm、HHF35、Mb的稳定性差,易受死后自溶的影响,只适用于新鲜尸体(死后1～2d);Fg次之,可用于死后4℃放置7d的尸体;C5较好,可用于死后4℃放置14d的尸体;Fn稳定性好,可用于死后4℃放置28d的尸体.
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纤维连接蛋白诊断心肌梗死的死后稳定性研究
建立狗急性心肌缺血模型,应用免疫组织化学和图像分析技术,对用纤维连接蛋白诊断心肌梗死的稳定性进行研究.心肌缺血组织随死后放置时间延长,纤维连接蛋白阳性反应面积逐渐减少,但放置4周仍呈阳性反应;而正常心肌组织放置不同时间,均未见阳性反应.纤维连接蛋白在心肌梗死死后诊断上具有很好的稳定性,在法医学实践中具有重要实用价值.
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心肌肌钙蛋白T在家兔缺血心肌中的表达及其死后稳定性
目的 探寻心肌肌钙蛋白T(cTnT)在家兔缺血心肌中的表达规律及其死后稳定性,并对其在法医学实践中诊断早期心肌缺血的应用价值进行评价.方法 用冠状动脉结扎法建立家兔急性心肌缺血模型,应用免疫组织化学法、图像分析和统计学处理系统,检测死后cTnT表达情况,并对实验组和对照组cTnT的表达进行比较.结果 缺血区心肌组织可见明显不规则灶状、片状cTnT缺失区,间质呈阴性表达.在4℃放置.随放置时间延长,正常和缺血心肌组织cTnT阳性表达均有减弱趋势,至14d时均完全缺失.但仅在4℃放置1～7d内,缺血心肌和正常心肌标本之间cTnT阳性反应具有显著性差异.结论 cTnT的免疫组化表达用于认定死后4℃放置的尸体是否有死前心肌缺血时,宜在7d以内进行.
