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血府逐瘀汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响
目的:研究血府逐瘀汤对血瘀证血管内皮细胞黏附分子表达的影响.方法:采用免疫组织化学和RT-PCR两种方法观察血府逐瘀汤不同剂量(高、中、低)对血瘀证(大鼠)血管内皮细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、血小板-内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.结果:模型组ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNOS高表达,血府逐瘀汤能减少造模动物ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNOS的表达,而且随着药物剂量的减少,各分子表达呈递增趋势,具有量效关系.结论:血府逐瘀汤能降低血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达,且量效关系明显.
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Survivin mRNA在胃癌组织中的表达及意义
Survivin为凋亡蛋白抑制剂(UP)家族成员,广泛表达于人胚胎组织和肿瘤组织,并能强烈抑制细胞凋亡,与恶性肿瘤发病相关.2010年10月,我们采用RT-PCR法对Survivin mRNA在24份胃癌组织中的表达进行了检测,旨在进一步探讨胃癌发生、发展机制.
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两种检测方法对EV71病毒监测结果的影响研究
目的:比较RT-PCR法与RD细胞病毒分离法两种检测方法对监测EV71病毒结果的影响.方法:将151份标本分别经RT-PCR法与RD细胞病毒分离法检测出的阳性标本按不同分类及标本总阳性率进行数据统计,比较两种检验方法间的差异.结果:RT-PCR法与RD细胞病毒分离法检测出的阳性标本按不同分类统计比较后,两者无明显差异,无统计学意义(P＞0.05);两种方法检测出的标本总阳性率RD细胞病毒分离法为38.41%,而RT-PCR法为26.49%,差异有统计学意义(χ＜'2＞:4.89,P＜0.05).结论:RT-PCR法检测结果可以作为手足口EV71病毒监测结果进行分类数据统计分析,而标本监测年度总阳性率应以RD细胞病毒分离检测结果统计.
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慢性根尖周炎中Wnt5a与骨吸收的关系
目的:检测Wnt5a在慢性根尖周炎病损中的表达以及Wnt5a与病变范围的关系.方法:18例慢性根尖周炎患者,根据病变大小分为A组(d≥6 mm)、B组(6 mm＞d≥3 mm),21例因正畸需要而拔除的健康牙作对照组,采用RT-PCR(Real-Time PCR)法,从mRNA水平检测Wnt5a的表达,分析Wnt5a mRNA表达与临床病变范围的关系.A组、B组及对照组各随机抽取5例进行免疫组化.采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:RT-PCR结果中病例组Wnt5a mRNA表达水平显著高于对照组(P＜0.05);A组中Wnt5amRNA表达水平显著高于对照组(P＜0.01);A组中Wnt5amRNA表达水平与B组相比(P＜0.01);B组中Wnt5amRNA表达水平与正常对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).免疫组化结果中病例组Wnt5a表达水平显著高于正常对照组(P＜0.01),A组Wnt5a的表达水平显著高于正常对照组(P＜0.01);B组Wnt5a的表达水平高于正常对照组(P＜0.05);A组中Wnt5a表达水平高于B组(P＜0.05).结论:Wnt5a与慢性根尖周炎的骨组织吸收相关,可能促进了骨吸收的发展.
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清远市流行性感冒病原学监测分析
目的 分析2012年清远市流感病原学监测结果,了解流感病毒的流行特征以及流行优势毒株,为流感防控工作提供科学依据.方法 对清远市监测哨点医院就诊的流感样病例鼻咽拭子用RT-PCR法检测流感病毒核酸,同时用狗肾传代细胞(MDCK细胞)法分离流感病毒并进行毒株鉴定.结果 2012年共检测流感样病例鼻咽拭子标本489份,RT-PCR检出阳性115份,阳性率为23.52％,其中季节性H3型、B型和A未分型阳性率分别为45.22％、43.48％、11.30％.细胞培养分离出毒株97株,阳性率为19.84％,其中季节性H3N2型、Bv型、By型分离率分别为61.86％、35.05％和3.09％.1～2月份以B型流感病毒为主要优势毒株,3～7月份流感流行的优势毒株以季节性H3N2型为主,同时也伴随B型流感病毒流行,而8～12月份均未检测到流感阳性病例.结论 2012年清远市流感流行优势毒株为季节性H3N2型和B型,流行季节主要在春夏季.RT-PCR检测流感病毒的特异性和敏感性均较细胞培养法高,但细胞培养法作为流感病原学监测的基础,仍然是实验室诊断的金标准.
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尿脱落细胞端粒酶催化亚基活性检测对早期诊断移行膀胱癌的价值
目的 探讨尿脱落细胞检测端粒酶催化亚基(hTERT)早期诊断移行膀胱癌(TCC)的价值.方法 用RT-PCR法分别对膀胱癌组织、正常膀胱组织及TCC和正常对照组尿脱落细胞进行hTERT检测.结果 28例TCC癌组织hTERT表达呈100%阳性,正常膀胱组织25例均无阳性表达.28例TCC患者中,尿脱落细胞hTERT表达阳性率为88.1%(25/28),正常对照组尿脱落细胞hTERT表达阳性率为6.7%(2/30).结论 尿脱落细胞hTERT检测敏感性高,无创伤,可用于膀胱癌的早期诊断.
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hTERT mRNA在食管癌组织中的表达及意义
目的 研究凋亡调控基因hTERT mRNA在食管癌癌组织中的表达及意义.方法 采用RT-PCR检测52例食管癌组织、30例癌旁食管组织(距离肿瘤至少5 cm)和7例非食管癌黏膜组织中hTERT mRNA的表达情况.结果 hTERT mRNA在食管癌组织和癌旁食管组织中表达的阳性率明显高于非食管癌组织(P＜0.05),食管癌组织中的表达阳性率与癌旁食管组织的表达阳性率差异无统计学意义(P＞0.05);hTERT mRNA在食管癌组织中的表达与患者年龄、病理类型、分化程度、浸润程度、淋巴转移和临床分期无相关性(P＞0.05).结论 hTERT mRNA在食管癌组织中的表达可能是早期事件,检测hTERT mRNA的表达可能对食管癌的早期诊断及治疗具有指导意义.
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RT-PCR法与血凝抑制法鉴定流感病毒的比较
目的比较逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)与血凝抑制法在流感病毒鉴定中的优劣,以期建立能快速、特异地从临床标本中检测并鉴定流感病毒的新方法.方法用常规细胞培养法增殖病毒后,分别用RT-PCR反应法和常规血凝抑制法进行流感病毒鉴定.结果在13份发生细胞病理变化的标本中RT-PCR阳性标本为9份,其中甲型7份(6份甲3亚型、l份甲l亚型),乙型2份;而用血凝抑制法鉴定阳性标本仅6份.结论 RT-PCR法快速、特异、灵敏,在流感病毒鉴定中具有较大的应用价值.
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成都地区腹泻病例人杯状病毒感染状况研究
目的 了解成都地区2010年7～12月之间人杯状病毒感染性腹泻的情况.方法 采集成都市2家哨点医院2010年7～12月之间腹泻病人的大便标本501份,采用RT-PCR方法,对501份大便标本同时进行诺如病毒、札如病毒核酸检测.结果 501份标本中检出阳性122份,核酸阳性率为24.35％ (122/501),其中诺如病毒GⅠ型1份,占阳性标本的0.82％ (1/122);诺如病毒GⅡ型100份,占阳性标本的81.97％ (100/122);札如病毒18份,占阳性标本的14.75％(18/122);诺如病毒GⅡ型和札如病毒共同感染3份,占阳性标本的2.46％ (3/122).5岁以下儿童患者标本病毒核酸阳性检出率为24.3％ (109/449),其中诺如病毒GⅡ型的检出率高;5～18岁患者标本病毒核酸阳性检出率为14.29％(1/7),标本检验结果为诺如病毒GⅡ型;18岁以上患者标本阳性检出率为26.67％ (12/45),其中诺如病毒GⅡ型检出率高.9、10、11 3个月病毒核酸检出率较高,其中9月份病毒核酸检出率高为36.51％ (23/63).结论 成都地区人杯状病毒感染性腹泻的病原体以诺如病毒GⅡ型为主,主要在秋冬季节高发,且婴幼儿和成人同样容易感染.
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PTEN和Kj-67在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义
目的 检测PTEN和Ki-67在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 收集甘肃省天水市第一人民医院2012年9月至2015年3月期间手术切除后经病理证实为原发性甲状腺癌的石蜡包埋组织40例及术后离体组织14例,分别应用免疫组织化学SP法和RT-PCR法检测PTEN和Ki-67蛋白和mRNA在甲状腺癌组织及其相应癌旁组织中的表达,并分析PTEN和Ki-67蛋白表达与甲状腺癌患者临床病理指标之间的关系.结果 ①PTEN蛋白表达阳性率在甲状腺癌组织中明显低于其在相应癌旁组织中的表达阳性率[35.0％ (14/40)比60.0％(24/40),P＜0.05],Ki-67蛋白表达阳性率在甲状腺癌组织中明显高于其在相应癌旁组织中的表达阳性率[72.5％(29/40)比42.5％ (17/40),P＜0.05].②PTEN mRNA表达相对灰度值在14例甲状腺癌标本中明显低于其在相应癌旁组织中的表达(0.225 7±0.036 3比0.503 6±0.037 5,P＜0.05);Ki-67 mRNA表达相对灰度值在14例甲状腺癌标本中明显高于其在相应癌旁组织中的表达(1.212 1±0.042 1比0.293 6±0.027 4,P＜0.05).③PTEN和Ki-67蛋白表达与甲状腺癌的组织学分级、病理类型、肿瘤分期及有无区域淋巴结转移有关(P＜0.05),而与甲状腺癌患者的性别、年龄及肿瘤包膜是否完整无关(P＞0.05).④PTEN蛋白和Ki-67蛋白在甲状腺癌中的表达呈明显负相关(rs =-0.605,P=0.000),而其在相应癌旁组织中的表达无相关性(rs=-0.021,P=0.899).结论 PTEN和Ki-67基因在甲状腺癌组织中异常表达,其可能与甲状腺癌的发生、发展及其机制有一定关系,二者联合可能有助于甲状腺癌病理类型的鉴别、生物学行为的判断和临床分期,可能作为甲状腺癌基因诊断、治疗的新靶点.
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NASBA法定量检测HIV病毒载量42例结果分析
定量检测HIV病毒载量,是观察和了解AIDS病情发展的常用的方法.目前国际上检测HIV病毒载量主要有三种方法,即逆转录核酸扩增法(RT-PCR法)、核酸序列扩增实验(NASBA法)及分支DNA杂交实验(bDNA法),采用多的是NASBA法和bDNA法,我院采用NASBA法对42例HIV确诊患者检测HIV病毒载量,现将结果报道如下.
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pNO胃癌淋巴结微转移临床意义的研究
目的 探索联合使用RT-PCR及免疫组织化学染色法(IHC)同时检测胃癌淋巴结微转移(LNM),分析胃癌淋巴结微转移对胃癌临床诊治的影响.方法 选取接受手术的pN0期胃癌患者32例.应用IHC和RT-PCR法联合检测术后淋巴结CK20的表达,分析LNM与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、浸润深度、分化程度等临床病理资料的关系.结果 经IHC法检测出6例患者、共14个淋巴结中CK20阳性,LNM阳性率为21.87％;经RT-PCR法检测出10例患者、共23个淋巴结中CK20 mRNA阳性,LNM阳性率为31.25％.两种方法均为阳性的患者7例,RT-PCR法呈阳性而IHC阴性的患者4例,IHC结果阳性而RT-PCR法阴性患者1例.此研究共检出11例患者存在LNM.不同分化程度pN0期胃癌LNM间差异有统计学意义(P＜0.05),低分化胃癌较中-高分化胃癌更易出现LNM.结论 胃癌LNM与分化程度有关,低分化胃癌较中-高分化胃癌更易出现微转移,临床医生给低分化胃癌患者采用缩小手术治疗方式时需慎重.IHC和RT-PCR法联合检测胃癌INM可提高微转移的检出率.
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EML4-ALK融合基因变体1和变体3质控品的建立
目的:建立EML4-ALK融合基因质控品,用于评价人类EML4-ALK融合基因突变检测试剂盒的性能.方法:根据人类EML4-ALK融合基因序列,合成EML4-ALK融合基因变体1(V1)和变体3(V3)的基因序列.采用限制性内切酶KpnⅠ和HindⅢ对带有目的基因的质粒和表达载体分别进行酶切,将目的基因与载体连接,转化DH5α感受态细胞,筛选阳性菌落进行测序.将测序结果正确的单个菌落进行超声诱导,制备假病毒溶液,并用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对假病毒溶液提取的RNA进行检测.结果:对人类EML4-ALK融合基因V1和V3质控品进行序列测定和荧光定量RT-PCR检测,结果表明成功建立了人类EML4-ALK融合基因V1和V3假病毒质控品.结论:本研究建立了人类EML4-ALK融合基因变体假病毒质控品的方法.可为药物靶向治疗基因检测试剂质量控制提供参考.
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检验腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的临床作用探讨
目的:研究检验腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的临床作用.方法:研究选取了2017年3月至2018年3月,在我院接受治疗的小肠结肠炎患者280例作为主要研究对象.全部患者随机分为对照组与观察组.对照组应用传统培养方法,观察组使用RT-PCR方法检验.结果:观察组检验中,阳性样本数量为33例,阴性样本数量为107例,检出率为23.57％,明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:RT-PCR法在小肠结肠炎耶尔森菌检验中,检验效果更好,临床价值更高.
