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siRNA沉默NGAL基因对结肠癌细胞行为的影响
目的 探讨中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophils gelatinases-associated lipocalin,NGAL)的基因沉默作用对结肠癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法 采用转染试剂盒ribo FECTTM CP Transfection Kit负载NGALsiRNA转染结肠癌细胞株HT-29(转染组),以未转染的HT-29细胞为对照组.实时荧光定量PCR和ELISA分别检测细胞NGAL mRNA水平和细胞培养上清液中NGAL蛋白水平,采用细胞划痕实验、Promega Cell Proliferation Assay G3580和BD C6流式细胞仪分别检测细胞迁移、增殖和凋亡情况.结果 HT-29细胞转染NGALsiRNA 72 h后,转染组NGAL mRNA水平为对照组的0.123(P＜0.05);转染48 h后,转染组细胞培养上清液中NGAL蛋白为(0.328±0.055) μg/L,低于对照组的(1.071 +0.143) μg/L(t =8.205,P=0.001).转染48 h后,转染组凋亡率为(18.87±1.65)％,低于对照组的(11.93±1.90)％(t=-4.752,P=0.009).转染24h后,转染组细胞迁移率为对照组的(23.35±6.35)％(t=11.930,P＜0.01).转染48 h后,转染组细胞增殖率为对照组的(90.00±5.30)％(t=1.983,P=0.118).结论 NGALsiRNA可以抑制结肠癌细胞NGAL基因和蛋白的表达,抑制细胞迁移,促进细胞凋亡.
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明胶酶及其抑制剂在慢性格林-巴利综合征中的表达
目的 观察MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2在慢性格林-巴利综合征(CIDP)腓肠神经中的表达部位及水平,探讨它们在CIDP发病机制中的作用.方法 收集CIDP和NIN腓肠神经活检蜡块,用免疫组化分别检测CIDP组和NIN组腓肠神经中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达,光镜观察表达部位,并比较各指标在两组中表达水平的差异性.结果 MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在CIDP腓肠神经中的血管、T淋巴细胞和神经纤维均有阳性表达且高于对照组(均P＜0.05).结论 MMP-9在CIDP的发病机制中起重要作用;TIMP-1和TIMP-2在CIDP中可能通过增加表达来拮抗明胶酶而起保护作用.
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尿KIM-1、NGAL在心脏瓣膜置换术后急性肾损伤中的早期诊断意义
目的 探讨肾损伤因子-1(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白(NGAL)对心脏瓣膜置换术后急性肾损伤的临床监测意义.方法 选取2010年12月至2013年12月于本院及李惠利医院胸外科行体外循环下瓣膜置换手术的患者1 115例,将其中发生急性肾损伤(AKI)的60例患者作为实验组,并选择临床资料相匹配的未发生AKI的60例作为对照组.分别留取术前及术后2、4、6、12、24、48 h时间点的血液和尿液标本,测定标本中血清肌酐(Scr)及尿液KIM-1、NGAL水平.结果 与术前相比,AKI组患者KIM-1由术后4h开始逐渐升高,峰值出现在12 h;NGAL术后2h开始升高,峰值出现在6h,差异均有统计学意义(P＜0.01).尿KIM-1和尿NGAL与血Scr均呈正相关(r=0.839,0.801,P＜0.05).结论 心脏瓣膜置换术后,尿KIM-1、NGAL可作为AKI发生的早期诊断标志物,对AKI具有早期诊断价值.
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血清NGAL、KIM-1、CysC在肾肿瘤患者中的表达及应用研究
目的 比较肾肿瘤患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子-1(KIM-1)及胱抑素(CysC)表达水平及临床意义.方法 选择浙江大学国际医院2016年1月至2017年3月确诊的120例肾肿瘤患者为研究组,并选择同期60例体检志愿者为对照组.采用ELISA法测定血清NGAL、KIM-1水平,电化学发光法测定血清CysC水平,比较各组NGAL、KIM-1、CysC水平差异,分析其相关性.结果 研究组患者血清NGAL、KIM-1、CysC水平显著高于对照组;恶性肿瘤患者血清NGAL、KIM-1、CysC水平显著高于良性肿瘤患者;1级肿瘤血清NGAL、KIM-1、CysC水平低于2级、3级和4级肿瘤患者,Furhman分级越高血清NGAL、KIM-1、CysC水平越高,差异均有统计学意义(P<0.05).肾损伤程度与血清NGAL、KIM-1、CysC水平存在密切相关性,血清NGAL表达与KIM-1、CysC水平呈正相关(r=0.812、0.765,P<0.05),KIM-1表达与CysC水平呈正相关(r=0.832,P<0.05).多元回归分析显示,血清NGAL、KIM-1、CysC表达水平与肾肿瘤患者Furhman分级密切相关(P<0.05).结论 肾肿瘤患者血清NGAL、KIM-1、CysC水平显著升高,临床分期越高,其表达水平越高,具有密切的相关性,可作为肾肿瘤的诊断标志物.
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血清NGAL、肾损伤分子1联合检测对新生儿脓毒症肾损伤患儿28天死亡率的预测价值研究
目的 探讨血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子1(KIM-1)联合检测对评估新生儿脓毒血症急性肾损伤的预后价值.方法 收集首都儿科研究所附属儿童医院新生儿内科收住的确诊为新生儿脓毒症肾损伤63例患儿的临床资料.记录患儿一般情况,新生儿危重病例评分(NCIS);抽取静脉血及尿液,检测所有患儿血清中NGAL及KIM-1的表达情况.随访28 d,跟踪新生儿死亡情况.Pearson相关分析检验NGAL、KIM-1与NCIS的相关性;多因素回归分析NGAL、KIM-1以及其他危险因素与新生儿脓毒症肾损伤28天死亡率的相关性.ROC曲线分析比较NGAL、KIM-1在新生儿脓毒症肾损伤预后评估中的价值,后进一步用ROC曲线分析NGAL、KIM-1联合对新生儿脓毒症肾损伤预后的评估价值.结果 随访28 d后,⑴63例新生儿脓毒症肾损伤中22例死亡,占整体人数的34.92％;⑵相比于生存组,死亡组患者血清NGAL、KIM-1表达上升(P<0.01);⑶Pearson相关分析结果显示,外周血NGAL、KIM-1表达与NCIS呈负相关;⑷多因素回归结果显示,NGAL、KIM-1均为新生儿脓毒症肾损伤死亡的独立危险因素(P<0.01);⑸ROC曲线分析结果显示,NGAL、KIM-1预测新生儿脓毒症肾损伤28天死亡率的曲线下面积(AUC)分别为0.79(95％CI:0.75～0.93)、0.84(95％CI:0.71～0.90),NGAL、KIM-1两者联合检测AUC值优于单一检测NGAL、KIM-1,AUC为0.89(95％CI:0.78～0.94)(P<0.01);敏感度KIM-1优于NGAL,特异度NGAL优于KIM-1,两者联合检测敏感度、特异度均优于单一检测NGAL、KIM-1.结论 NGAL、KIM-1联合检测在评估新生儿脓毒症肾损伤28天死亡率时具有良好的预测价值.
关键词： 明胶酶类/代谢 膜糖蛋白类/代谢 脓毒症/并发症/代谢 肾/损伤 死亡率 -
血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对住院心力衰竭患者肾功能的预测
目的 探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对住院心力衰竭(简称心衰)患者肾功能的预测价值.方法 连续入选396例因心衰住院的患者,根据慢性肾脏病流行病学合作研究公式(CKD-EPI)计算肾小球滤过率(eGFR),将入选患者分为心肾综合征(CRS)组[eGFR＜60 ml/(min·1.73 m2),凡=97]和非CRS组[eGFR≥60 ml/(min·1.73 m2),n=299],测定两组患者NGAL、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)、肌酐、尿素氮等指标浓度.结果 CRS组NGAL、NT-proBNP水平均明显高于非CRS组(P＜0.01).NGAL与NT-ProBNP、肌酐、尿素氮呈正相关(r=0.194、0.527、0.433,P＜0.01).NGAL及NT-ProBNP、尿素氮预测住院心衰患者肾功能恶化ROC曲线下面积分别为0.863、0.681、0.828(P＜0.01).结论 血浆NGAL对住院心衰患者肾功能恶化具有独立预测的作用.
