首页 > 文献资料
-
炎调方对巨噬细胞中HSP70表达及其效应的影响
目的:观察炎调方药物血清对离体巨噬细胞中热休克蛋白70(HSP70)及其他相关细胞因子的调控效应,以验证炎调方治疗脓毒症的作用途径和位点.方法:培养大鼠巨噬细胞RAW 264.7,将培养后的巨噬细胞RAW 264.7分为空白对照组(RAW 264.7+培养液)、正常血清组(RAW 264.7+正常大鼠血清)、炎调方药物血清组(RAW 264.7+炎调方药物血清),每组设4个平行孔.采用MTT比色法测定细胞增殖,确定炎调方药物血清的无毒性剂量范围;采用qRT-PCR方法检测细胞HSP70、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β、IL-8的mRNA表达;采用Western blot方法检测细胞HSP70、NF-κB蛋白表达,以ELISA方法检测细胞TNF-α、IL-1β、IL-8蛋白表达.结果:炎调方药物血清的无毒性浓度范围包括10％～30％,故后续实验选取20％浓度的炎调方药物血清进行.正常血清组的各项指标与空白对照组比较,其差异均无统计学意义(P＞0.05);与空白对照组和正常血清组比较,炎调方药物血清组RAW 264.7细胞的HSP70 mRNA和蛋白表达均明显升高(P＜0.01),NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-8的mRNA和蛋白表达均明显降低(P＜0.01).结论:炎调方治疗脓毒症的作用机制可能是上调HSP70的表达,进而抑制NF-κB的活化和相关细胞因子的表达.
-
炎调方对脓毒症大鼠肺热休克蛋白70和核因子-κB的调控作用
目的:探讨炎调方对脓毒症大鼠肺热休克蛋白70 (HSP70)和核因子-κB (NF-κB)的调控作用.方法:将清洁级健康雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组,采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型.用RT-qPCR法、SABC免疫组化方法、凝胶迁移电泳EMSA法测定大鼠肺组织HSP70 mRNA及蛋白表达、NF-κB活性,并用HE染色观察肺组织病理学改变.结果:炎调方组肺组织HSP70基因相对表达水平高于假手术组和模型组(P＜0.05),HSP70蛋白表达量高于正常组、假手术组和模型组(P＜0.05);正常组、假手术组、炎调方组大鼠肺组织NF-κB/P65相对灰度值均低于模型组(P＜0.01);病理切片显示炎调方组肺组织损伤轻于模型组.结论:炎调方能上调肺HSP70表达,降低肺NF-κB活性,改善肺组织病理形态学改变,减轻脓毒症导致的肺组织损伤.
-
NF-κB在脓毒症大鼠肺组织中的活性变化及炎调方对其活性的影响
目的 探讨炎调方对脓毒症大鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)活性及血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平变化的影响.方法 将雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组.盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型,于造模后2,8,12,24h处死大鼠,凝胶迁移电泳法(EMSA)检测右肺组织NF-κB活性,双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定HMGB1水平.结果 正常组及假手术组大鼠肺组织NF-κB微弱活化,模型组中,CLP术后2h NF-κB活性开始增强,24h仍有较强的活性;炎调方组与模型组相比,NF-κB活性各时间点均明显减弱.模型组HMGB1水平2h开始升高,炎调方组与模型组相比,HMGB1水平明显降低(P＜0.05).结论 炎调方能抑制脓毒症大鼠肺组织NF-κB活性,降低脓毒症大鼠血清HMGB1水平.
-
TRAF6-NF-κB/p38MAPK通路活性在脓毒症致急性肺损伤中肺泡巨噬细胞过度极化的作用及炎调方干预的可能性探讨
肺是脓毒症易受损靶器官,急性肺损伤(ALI)出现早,发生率高.M1型肺泡巨噬细胞(AM)过度活化是ALI肺部失控炎症反应的核心,TRAF6介导的NF-κB/p38MAPK通路是M1型AM细胞过度活化的关键.我们研究发现,炎调方能有效降低脓毒症患者及大鼠多种炎症介质水平,减轻肺损伤.本文旨在阐述我们对脓毒症导致ALI中医理论及炎调方的临床运用,并探讨炎调方减轻肺损伤作用可能机制,为中医药治疗ALI提供理论依据.
-
炎调方抑制LPS诱导人肺泡上皮细胞炎症因子释放机制研究
目的 体外观察炎调方通过NF-κB信号通路调控内毒素(LPS)诱导的人肺泡上皮(A549)细胞中炎症因子的释放.方法 采用炎调方药物血清方法,观察其对A549细胞的作用效果及其机制.MTT法观察细胞存活率;双抗体夹心酶联合免疫吸附法(ELISA法)检测细胞中白介素-8(IL-8)和前列腺素E2(PGE2)的表达;Western blot法检测环加氧酶2(COX2)和NF-κB的表达;运用NF-κB特异性抑制剂与炎调方联合运用,观察NF-κB信号通路对COX2的调控作用.结果LPS明显抑制了A549细胞增殖,炎调方药物血清(炎调方药物血清)能缓解LPS的细胞毒性;炎调方药物血清明显降低了LPS诱导的IL-8、PGE2和COX2释放和表达.炎调方药物血清通过NF-κB信号通路调控COX2表达.结论炎调方通过NF-κB信号通路调控LPS的细胞毒性和炎症因子释放.
-
炎调方对脓毒症急性呼吸窘迫综合征(热炽营血证)患者血细胞因子的影响
目的 观察炎调方治疗脓毒症急性呼吸窘迫征(热炽营血证)对患者外周血白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的调控作用及临床疗效.方法 将患者随机分为炎调方组22例和对照组23例,对照组予西医常规治疗,炎调方组在西医常规治疗的基础上加用炎调方,观察两组患者治疗前后外周血细胞因子水平、胸部X线或CT检查、动脉血气分析SaO2、氧合指数、使用机械通气的治疗时间和病死率等,评价两组中西医临床疗效.结果 经治疗,两组外周血细胞因子IL-2、IL-6、IL-8和TNF-α水平均有明显下降,炎调方组低于对照组；两组SaO2、氧合指数水平均有明显提高,炎调方组均高于对照组；炎调方组存活患者机械通气治疗时间短于对照组；中西医临床疗效均有优于对照组的趋势.以上差异均有统计学意义(P＜ 0.05或0.01).结论 炎调方通过下调外周血细胞因子水平而减轻炎症反应及对肺组织的持续损伤,治疗脓毒症急性呼吸窘迫综合征(热炽营血证)有确切的临床疗效.
-
炎调方对脓毒症大鼠血清炎症因子的调控作用
目的 探讨炎调方对脓毒症大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-10(IL-10)水平的调控作用.方法 将雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组.采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症大鼠模型,分别于造模后2、8、12、24h处死动物,双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血清TNF-α、IL-6、IL-10水平,留取完整左肺组织行病理切片,评估肺脏损伤情况.结果 模型组各时间点TNF-α、IL-6、IL-10水平均高于假手术组；炎调方组与模型组相比,TNF-α水平明显降低,IL-6水平除24 h外均明显下降,IL-10水平各时间点均明显升高.病理切片显示炎调方组肺损伤轻于模型组.结论 炎调方能下调脓毒症大鼠TNF-α、IL-6水平,对IL-10有上调作用,并能减轻脓毒症肺损伤.
-
炎调方对脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织热休克蛋白70mRNA和p38丝裂原活化蛋白激酶的影响
目的 探讨炎调方对脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织热休克蛋白70 (HSP70) mRNA和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的调控作用.方法 将清洁级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、炎调方(生药量9.9 g/kg)组、谷氨酰胺组、槲皮素组,采用盲肠结扎穿孔术法(CLP)建立脓毒症ALI模型.观察大鼠一般状况,各组分别于术后4、6、8、10、12、18、24 h采集肺组织标本,HE染色观察肺组织病理学改变;实时荧光定量PCR法检测肺组织HSP70 mRNA的表达水平;Western Blotting法检测肺组织p38 MAPK的蛋白表达水平.结果 炎调方组、谷氨酰胺组大鼠与模型组比较,术后不同时间点的精神状态、活动量等明显好转,可见少量稀便;肺组织损伤程度明显减轻,腔内出血较少,肺实变较轻.炎调方组不同时间点的肺组织HSP70 mRNA表达水平显著高于假手术组、模型组(除24 h时间点外)、槲皮素组(P＜0.01),在8、12、18、24 h时间点显著低于谷氨酰胺组(P＜0.01);炎调方组不同时间点的肺组织p38MAPK的蛋白表达量显著低于模型组、槲皮素组(P＜0.01),在4、6、10h时间点明显低于谷氨酰胺组(P＜0.05、0.01).结论 炎调方可通过上调肺组织HSP70-mRNA的表达,下调肺组织p38 MAPK的蛋白表达,改善肺组织损伤,对脓毒症ALI发挥保护作用.
关键词： 炎调方 脓毒症 急性肺损伤 HSP70热休克蛋白 p38丝裂原活化蛋白激酶 -
炎调方对脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织髓过氧化物酶和丙二醛水平的影响
目的 观察炎调方对脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)水平的影响.方法 清洁级健康雄性SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、炎调方组、地塞米松组,炎调方组ig 9.9 g/kg炎调方,地塞米松组ig 0.45 mg/kg地塞米松,每天给药1次,连续给药3d.末次ig2h后采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症ALI模型,分别于造模后24 h处死动物,进行肺组织HE染色,测定各组大鼠湿/干重比(W/D),肺组织MPO、MDA水平.结果 模型组大鼠肺组织损伤程度、MPO及MDA水平较对照组及假手术组显著增高(P＜0.01),炎调方组、地塞米松组肺组织损伤程度、MPO及MDA水平较模型组显著降低(P＜0.05、0.01).结论 炎调方可有效减轻脓毒症ALI大鼠的炎症及氧化应激反应.
-
炎调方治疗脓毒症致急性胃肠损伤的可行性探讨
脓毒症易并发急性胃肠损伤,其主要病理生理为脓毒症导致的炎症反应.笔者认为其中医病因为腑实营热,通腑清营法切中病机.炎调方具有通腑清营功能,前期研究发现,炎调方能缓解脓毒症炎症反应.基于以上认识,本文拟从“缓解炎症反应——通腑清营”角度探讨炎调方治疗脓毒症致急性胃肠损伤的可行性.
