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Gag-Pol基因文献资料
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表达HIV-1 Gag-Pol抗原的重组痘病毒的构建及免疫原性
目的 构建稳定高效表达HIV-1 Gag-Pol蛋白的重组痘病毒载体疫苗,并检测其体液免疫效果.方法 将修饰型HIV-1 Gag-Pol基因插入到痘病毒表达载体pSC11m2启动子P7.5下游,经与野生型痘病毒同源重组后,进行蓝白斑筛选.用筛选得到的重组病毒rM-GP转染HEK293细胞,经SDS-PAGE和Western blot检测表达蛋白.用该重组病毒免疫BALB/c小鼠,并检测体液免疫应答.结果 已筛选到稳定高效表达HIV-1 Gag-Pol蛋白的重组痘病毒载体rM-GP,经Westernblot,在免疫小鼠血清中检测到抗HIV-1 p24蛋白的特异性抗体.结论 重组痘病毒载体rM-GP能稳定高效表达HIV-1 Gag-Pol蛋白,并能引起有效的体液免疫应答.
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HIV-1 DNA疫苗的构建及免疫原性
目的 构建稳定表达HIV-1 Gag-Pol蛋白的DNA疫苗,提高目的基因的表达效率.方法 对HIV-1野生型Gag-Pol基因序列进行优化,使用本室构建的表达载体VR,构建重组质粒VR-GPCINS.将构建的重组质粒VR-GPCINS转染HEK293细胞,Western blot鉴定表达产物.用构建的DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,Western blot检测体液免疫反应.结果 成功构建能稳定高效表达HIV-1 Gag-Pol蛋白的VR-GPCINS质粒,Western blot在免疫小鼠的血清中检测到抗p24的特异性抗体.结论 含优化Gag-Pol基因序列的质粒DNA疫苗VR-GPCINS在细胞表达和体液免疫方面均明显优于含野生型Gag-Pol基因序列的质粒DNA疫苗VR-GP.
