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gatA-GST融合蛋白文献资料
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北京分离株Gassericin T基因的克隆、表达及活性检测
目的克隆格氏菌素T基因,在原核细胞中表达,并检测其抑菌活性.方法通过PCR技术,从3株L.gasseri北京分离株中特异性扩增格氏菌素T的成熟肽DNA编码片段(V1-1/gatA和V44-1/gatA),经TA克隆和序列测定后,进行同源比较分析.双酶切后的目的片段与表达载体pGEX-6P-1连接,得到高效融合表达质粒pGEX-gatA/V1-1和pGEX-gatA/V44-1,转化大肠杆菌BL21(DE3)PlysS,IPTG诱导表达,并检测表达产物的抑菌活性.结果目的蛋白以包涵体形式表达,表达量约29%.重组格氏菌素对于金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺氏菌和伤寒沙门氏菌具有明显的抑制生长作用.结论 所获得的重组格氏乳杆菌素具有明显的抑菌活性,有望成为新型抗菌素.
关键词： 格氏乳杆菌 格氏菌素T gatA-GST融合蛋白 抑菌活性
