首页 > 文献资料
-
乌司他丁注射液对急性肺损伤循环内皮祖细胞血管生成能力的影响
目的：观察乌司他丁注射液对急性肺损伤循环内皮祖细胞血管生成能力的影响。方法成年新西兰大耳白兔(2.5 kg~3.0 kg)共40只随机分为3组，正常对照组、急性肺损伤组、急性肺损伤组+乌司他丁治疗组分别采用免疫组化法观察肺毛细血管密度，病理评价肺泡炎症。检测体外内皮祖细胞成血管能力。结果 HE染色评估肺泡炎症发现急性肺损伤与乌司他丁治疗组差异有统计学意义(P<0.05)；免疫组化观察到乌司他丁治疗组肺毛细血管密度较正常对照组、急性肺损伤组增加(P<0.05)；在体外进行细胞培养同样发现乌司他丁治疗组内皮祖细胞的成血管能力较正常对照组、急性肺损伤组提高(P<0.05)。结论乌司他丁注射液能提高急性肺损伤循环内皮祖细胞成血管能力。
-
乌司他丁注射液改善急性肺损伤兔循环内皮祖细胞成血管能力及对PKB／eNOS／NO通路的影响
目的：观察乌司他丁注射液对急性肺损伤循环内皮祖细胞血管生成能力及对 PKB /eNOS /NO 通路的影响。方法体外细胞实验共分为5组：正常对照组、急性肺损伤组、乌司他丁治疗组、乌司他丁＋ LY294002组，乌司他丁＋ L NAME组分别进行体外皮祖细胞成血管能力检测；PKB、eNOS 蛋白检测；NO 浓度检测。结果乌司他丁治疗组较急性肺损伤组体外成血管数目增加， PKB、eNOS蛋白表达上升，NO 浓度上升，差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论乌司他丁注射液通过 PKB /eNOS /NO 通路，提高循环内皮祖细胞成血管能力。
-
β-榄香烯对血管内皮细胞增殖及成血管能力的影响
目的 观察β-榄香烯对血管内皮细胞增殖,细胞周期以及成血管能力的影响,探讨β-榄香烯对肿瘤血管生成的抑制作用.方法 人脐静脉内皮细胞ECV-304体外培养,β-榄香烯干预;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测β-榄香烯对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期;Matrigel胶检测细胞成血管能力.结果 ECV-304细胞经过β-榄香烯干预,其存活率明显降低,并呈计量依赖性.细胞周期检测结果显示,β-榄香烯干预后,G1期细胞增多,进入S期及G2期细胞明显减少,细胞周期被阻滞于G1期;接种于Matrigel胶的ECV-304细胞经β-榄香烯干预后,形成管腔数目减少,成血管能力明显降低.结论 β-榄香烯可直接干扰血管内皮细胞的增殖及细胞周期,阻滞细胞从G1期进入S期及G2期,并降低其成血管能力.
-
低氧诱导因子1α与骨形态发生蛋白6协同过表达骨髓间充质干细胞在低氧环境下的成骨和成血管效应
背景:目前认为低氧诱导因子1α是维持机体细胞内氧稳态的重要调控因子之一,骨形态发生蛋白6是成骨活性强的骨形态发生蛋白之一,实验拟构建二者共表达的骨髓间充质干细胞系,以研究细胞在低氧状态下的耐受及功能受益问题.目的:探讨体外模拟低氧环境下低氧诱导因子1α和骨形态发生蛋白6协同过表达骨髓间充质干细胞的成骨和成血管生物学特性.方法:分离培养鉴定SD大鼠骨髓间充质干细胞,将已构建好的携带有骨形态发生蛋白6和低氧诱导因子1α双基因的腺病毒真核表达载体共同感染骨髓间充质干细胞,在体积分数为21％O2,2％O2条件下分别进行培养,并以常氧状态下未转染的骨髓间充质干细胞作为对照组,RT-qPCR检测各组细胞HIF-1α、VEGF、BMP-6、GLUT-1、SIRT-1、OCN、RUNX2、AKP的mRNA水平.各组骨髓间充质干细胞与人脐静脉内皮细胞共培养后,观察体外小管形成能力;各组骨髓间充质干细胞经成骨诱导培养基干预后,碱性磷酸酶染色及茜素红染色鉴定成骨效果.结果与结论:①流式细胞仪检测结果显示第4代骨髓间充质干细胞高表达CD29、CD90、CD44,低表达CD45、CD11、CD34;②低氧组骨髓间充质干细胞VEGF、GLUT-1、SIRT-1、OCN、RUNX2、AKP mRNA表达水平高于常氧组(P<0.01);③低氧组小管形成数量要明显高于对照组,差异有非常显著性意义(P<0.01);④低氧组细胞出现更多的钙结节及圆形矿化结节;⑤上述结果表明,低氧诱导因子1α与骨形态发生蛋白6协同过表达骨髓间充质干细胞在体外低氧环境下具有更强的血管生成及成骨分化能力.
-
β-榄香烯对血管内皮细胞成血管能力、细胞凋亡及MMP-2和MMP-9活性的影响
目的 观察β-榄香烯对血管内皮细胞成血管能力、细胞凋亡及基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9活性的影响,探讨β-榄香烯对肿瘤血管生成的抑制作用.方法 人血管内皮细胞株ECV304体外培养,Matrigel胶检测血管内皮细胞的成血管能力,Annexin- V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,明胶酶谱实验检测血管内皮细胞中MMP-2和MMP-9的活性.结果 接种于Matrigel胶的ECV304细胞经β-榄香烯作用后,形成管腔数目明显减少.随着β-榄香烯浓度增加及作用时间延长,ECV304细胞凋亡明显增多.明胶酶谱实验结果显示,β-榄香烯可明显抑制内皮细胞中MMP-2和MMP-9的活性.结论 β-榄香烯可以促进体外培养的血管内皮细胞凋亡,抑制血管内皮细胞的成血管能力,使血管内皮细胞在Matrigel胶中形成的管腔数目减少,同时β-榄香烯能够抑制血管内皮细胞中MMP-2和MMP-9的活性.
-
非对称性二甲基精氨酸对内皮生长晕细胞生物学功能的影响
目的 观察非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对内皮生长晕细胞(EOC)及其生物学功能的影响.方法 分离脐血中单个核细胞,采用贴壁培养法培养EOC,以免疫细胞化学染色及荧光染色法鉴定其内皮细胞特性.以10μmol/L ADMA及配制ADMA的溶剂(含0.5 % DMSO的EBM-2培养基),分别与第二代细胞孵育72h,检测并对比细胞的凋亡率、增殖能力及血管生成能力.结果 免疫细胞染色后可见细胞表面VIII因子相关抗原、CD34以及Flk-1均阳性表达,DiI-ac-LDL和FITC-UEA-Ⅰ荧光染色后可见双染色阳性细胞均为正在分化的EOC.ADMA组细胞凋亡率[(5.96±0.12)%]显著高于正常组[(1.48±0.03)%](P< 0.01),而细胞增值活性及血管生成活性(0.27、0.02、8.25、0.96)均明显弱于正常组(8.25、0.96、16.25、1.71)(P<0.05或0.01).结论 ADMA能促进EOC凋亡,抑制其增值活性及血管生成活性,其对EOC细胞功能的损伤作用可能是通过氧化应激机制实现的.
关键词： 内皮生长晕细胞 非对称性二甲基精氨酸 氧化应激 增殖能力 成血管能力 -
DMOG对人牙周膜干细胞成骨分化和成血管能力影响的体外研究
目的 探讨二甲氧已二酰甘氨酸(DMOG)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)体外成骨分化和成血管能力的影响.方法 采用组织块法分离培养hPDLSCs,应用流式细胞仪进行鉴定.给予0、0.1、1、10、100 μmol/L的DMOG处理,MTI法分析DMOG对hPDLSCs增殖能力和细胞活力影响,RT-PCR检测核心结合因子2(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA表达,Western blot法检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、VEGF蛋白表达.成骨诱导14 d后行ALP染色及茜素红染色.结果 从人牙周膜组织中分离培养的细胞经鉴定为hPDLSCs.MTI结果显示,DMOG可呈剂量依赖性地抑制hPDLSCs的增殖(P＜0.05),DMOG能提高缺血清条件下hPDLSCs的细胞活力(P＜0.05).RT-PCR和Western blot结果显示,10μmol/L的DMOG可显著上调RUNX2、ALP、OCN基因mRNA表达(P＜0.05),而100 μmol/L的DMOG可显著上调VEGF基因mRNA和HIF-1α、VEGF蛋白水平的表达(P＜0.05).ALP和茜素红染色显示,10 μmol/L的DMOG可显著促进hPDLSCs成骨分化中ALP的表达和钙结节的形成.结论 DMOG通过上调HIF-1α的表达,促进hPDLSCs的成骨分化和成血管能力.
-
内皮生长晕细胞冻存和复苏的可行性
目的 研究冻存对内皮生长晕细胞增殖能力和成血管能力的影响,探讨内皮生长晕细胞冻存和复苏的可行性.方法 分离脐血中单个核细胞,采用贴壁培养法培养扩增内皮生长晕细胞,免疫组织化学染色和荧光染色法鉴定其内皮细胞特性.扩增后的细胞采用浓度为650μmol/L(体积比为50 mL/L)和1040,μmol/L(体积比为80mL/L)二甲基亚砜的培养基冻存至液氮中,24 h后复苏并观察冻存细胞的复苏率、复苏后细胞的增殖能力和成血管能力的改变.结果 采用贴壁法培养的细胞具有多种内皮细胞特性.细胞采用含不同浓度二甲基亚砜(50 mL/L和80 mL/L)的培养基冻存后,其复苏率差异无统计学意义,细胞的增殖能力在复苏后36 h内50 mL/L、80 mL/L二甲基亚砜组均较未冻存组减弱(P＜0.05),72 h后三组间比较差异无统计学意义.而复苏后6 h内成血管速率较未冻存组减弱(P＜0.05),但30 h后三组间比较差异无统计学意义.结论 内皮生长晕细胞可以进行冻存和复苏.
-
β-榄香烯对血管内皮细胞增殖及成血管能力的影响
目的 观察β-榄香烯对血管内皮细胞增殖,细胞周期以及成血管能力的影响,探讨β-榄香烯对肿瘤血管生成的抑制作用.方法 人脐静脉内皮细胞ECV-304体外培养,β-榄香烯干预;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测β-榄香烯对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期;Matrigel胶检测细胞成血管能力.结果 ECV-304细胞经过β-榄香烯干预,其存活率明显降低,并呈计量依赖性.细胞周期检测结果显示,β-榄香烯干预后,G1期细胞增多,进入S期及G2期细胞明显减少,细胞周期被阻滞于G1期;接种于Matrigel胶的ECV-304细胞经β-榄香烯干预后,形成管腔数目减少,成血管能力明显降低.结论 β-榄香烯可直接干扰血管内皮细胞的增殖及细胞周期,阻滞细胞从G1期进入S期及G2期,并降低其成血管能力.
