锰对雄性小鼠中脑单胺类神经递质含量影响

目的 探讨锰对雄性小鼠中脑单胺类神经递质含量的影响.方法 将90只雄性昆明系小鼠随机分为3组(30,15mg/kg,盐水对照组),每日腹腔注射染毒,连续染6d停染1d.分别于染毒20,40,60d以后,颈椎脱臼处死.迅速剥出小鼠的全脑用锡箔包好后,置于液氮中保存.然后将组织制成匀浆并冷冻离心,取上清液移入离心管中.用高效液相色谱仪的紫外检测器测定其中单胺类神经递质的含量,并同时计算小鼠脏器系数.结果 3种单胺类神经递质多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、五羟色胺(5-HT)的含量均低于盐水对照组,呈不断下降趋势.其中多巴胺的含量在40,60d时下降明显,差异有统计学意义,P<0.05.同时发现,2个染毒组的雄性小鼠肝脏、脾脏、脑组织、以及睾丸的脏器系数与盐水对照组比较,均有不同程度变化,肝脏、脾脏的脏器系数增高,而脑组织、睾丸的脏器系数却降低.结论 金属锰的长期接触可能会影响雄性小鼠中脑单胺类神经递质含量,并且对某些脏器有一定的毒性作用.

VE和氟化物对小鼠睾丸脂质过氧化的联合作用

氟是机体生命活动所必需的微量元素之一,但过量的氟摄入可对机体产生明显损害.已有文献[1,2]报道,氟对雄性生殖系统具有毒性作用.一般认为,脂质过氧化作用增强是氟化物引起雄性生殖系统损害的主要机制,具体抗氧化作用的硒或维生素C(VC)具有拮抗作用[3,4].但具体机制还不清楚.维生素E(VE)与动物生殖和精子生成有关,同时又是公认的自由基清除剂.因此,本研究通过对雄性小鼠染氟同时给予一定剂量的VE,探讨VE和氟化物联合作用对雄性小鼠睾丸组织脂质过氧化的影响.

苦瓜水提取物对雄性小鼠精子影响

苦瓜作为一种药食兼用的草质藤木植物的果实,民间食用已有数百年历史,其药用价值越来越被人们所关注.随着研究的深入,人们发现苦瓜有较多的保健作用[1-3]和广阔的临床应用前景.对苦瓜的毒性研究发现,苦瓜对雄性动物具有较强的抗生育活性[3].国内外学者采用不同方法对苦瓜食用部分进行了分离提取及鉴定,从苦瓜中曾分离出苷类、蛋白质、多肽、氨基酸、糖类、生物碱类、有机酸、脂类、甾类、萜类、微量元素等多种化学成份[4].由于提取方法不同,导致苦瓜提取物成分各异,不同提取物的生物学作用亦不同.因此,本实验观察了苦瓜提取物对雄性小鼠精子的影响,旨在为更好地开发利用苦瓜系列产品提供科学依据.现报告如下.

雄性小鼠生殖细胞染色体制备方法的研究

目前,雄性小鼠生殖细胞染色体制备方法多数都采用文献方法[1],或在此基础上进行改进.这些方法在实际应用中都有一定的局限性.即要想制备较好的精原细胞染色体,就不可能同时制备可供分析的初级精母细胞和次级精母细胞染色体.为此,本文应用同一只小鼠的两侧睾丸,同时制备出次级精母细胞、初级精母细胞和精原细胞3种生殖细胞染色体标本.报告如下.

重质芳烃对雄性小鼠生殖细胞遗传效应的研究

目的探讨重质芳烃对雄性小鼠生殖细胞遗传效应.方法通过小鼠精子畸形实验和小鼠睾丸染色体畸变实验进行遗传毒性研究.结果在重质芳烃高剂量组,小鼠精子畸形率、睾丸染色体结构畸变率、性染色体早分离率、常染色体分离率与阴性对照组比较,差异呈高度显著性.结论重质芳烃对雄性小鼠生殖细胞有一定的遗传毒性,应重视重质芳烃对接触人群的潜在危害,并加强劳动卫生防护和健康监护.

Ⅱ型拟除虫菊酯对雄性小鼠脑内单胺类递质含量的影响

为了解Ⅱ型拟除虫菊酯类农药对雄性小鼠内脏器官的影响及对小鼠黑质纹状体多巴胺(DA)系统的毒性作用和可能的机制,将50只雄性昆明种小鼠随机分为5组(每组10只),分别为溴氰菊酯(DM)1.8 mg/kg组、3.6mg/kg组;氯氰菊酯(CP)4mg/kg组、8mg/kg组及色拉油对照组;连续1个月经口灌胃染毒后,测定脏器系数并采用高效液相色谱(HPLC)荧光检测法分别检测雄性小鼠全脑中多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)的含量.结果 显示,染毒各组小鼠肝、脾脏器系数均高于对照组,脑的脏器系数有所降低.脑内DA、NE、5-HT的含量都有不同程度的下降,DA在DM高剂量组与对照组之间的差异有统计学意义(P＜0.01);NE在DM高、低剂量组及CP高剂量组与对照组的比较中差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);5-HT在各级两组之间的含量差异并无统计学意义.提示DM和CP可以影响实验雄性小鼠的内脏器官,也可以降低脑内单胺类递质的含量.

氨基脲对雄性小鼠生殖功能的影响

目的:探讨氨基脲(semicarbazide,SEM)对雄性小鼠生殖功能的影响.方法:40只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)清洁级健康成年KM雄性小鼠按体重随机分成为4组,每组分为10只:溶剂对照组、低剂量SEM染毒组、中剂量SEM染毒组、高剂量SEM染毒组.溶剂对照组用去离子水灌胃;SEM染毒组按30、60、120 mg/kg.bw SEM溶液灌胃染毒6周,1次/日.后灌胃24h后,将其剖杀,取其血液和组织器官检测相关生殖指标.结果亚慢性SEM可致雄性小鼠生殖系统损伤.

维生素E和氟化物对雄性小鼠生殖功能的联合作用

目的探讨维生素E(VE)和氟化物对雄性小鼠生殖功能的联合作用.方法选择健康成年雄性小鼠,按体重随机分成5组:空白对照组、VE对照组、VE拮抗组、染氟1组和染氟2组,每组10只.染氟方式为小鼠饮用含氟化钠200 mg/L(VE拮抗组、染氟1组)或300 mg/L(染氟2组)的去离子水,VE采用灌胃方式每天给予200 mg/kg(VE对照组、VE拮抗组).每天1次观察动物并每周称量小鼠体重1次,饲养5周后,检测各组小鼠的血氟水平,附睾及睾丸的脏器系数,附睾尾精子数、精子活动度及精子畸形率.结果染氟2组、染氟1组及VE拮抗组大部分小鼠于受试后3～5周均出现不同程度氟斑牙,各组差异无显著性(P＞0.05);染氟2组血氟水平明显高于其他各组(P＜0.01),染氟1组、VE拮抗组的血氟水平也明显高于空白对照组、VE对照组(P＜0.01);各组小鼠体重、睾丸及附睾脏器系数、附睾尾精子数及精子畸形率差异无显著性(P＞0.05);而染氟2组、染氟1组、VE拮抗组的活精率及精子活动度明显低于空白对照组和VE对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论饮用含氟化钠200 mg/L或300 mg/L的去离子水的雄性小鼠活精率及精子活动度降低,染氟同时给予VE,未见明显改善作用.

目的：观察低剂量辐射（LDR）诱导胸腺细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的基本规律。方法：用X射线照射昆明系雄性小鼠，其诱导剂量（D1）及其后攻击剂量（D2）分别是75 mGy 和1.5 Gy。D1和D2间隔时间分别是3、6、12、24和60 h。D2照射后18 h胸腺细胞培养4、20 和44 h用流式细胞仪检测胸腺细胞凋亡小体（TAB）和细胞周期进程的变化。结果：当D1和D2间隔3、6和12 h，在D2照射后胸腺细胞培养4和20 h，D1 + D2组 TAB 百分数明显低于D2组（P<0.05），G0/G1和G2+M期细胞百分数也不同程度地低于D2组, 而S期细胞百分数却明显高于D2组（P<0.05或P<0.01）。结论：D1和D2分别是75 mGy（剂量率，12.5 mGy/min）和1.5 Gy（剂量率，0.287 Gy/min），D1和D2间隔3～12 h, 在小鼠全身照射后其胸腺细胞培养4和20 h可诱导细胞凋亡和细胞周期进程的适应性反应。

益肾康对慢性肾孟肾炎小鼠尿液IL-2的影响

1实验材料1.1实验动物昆明种雄性小鼠,体重20g±2g,鼠龄8W(黑龙江中医药大学实验动物中心);菌种:选用大肠杆菌O111-B4标准菌株(黑龙江省防疫站);试剂:致病性大肠杆菌O111-B4诊断血清(卫生部兰州生物制品厂);兔抗鼠IL-2及羊抗兔IgG,辣根过氧化物酶标记(北京天象人公司).

中波紫外线致雄性小鼠生殖系统损伤

[目的]本文以小鼠为实验材料探讨中波紫外线( ultraviolet-B,UVB)对雄性小鼠生殖系统造成的光辐射损伤.[方法]将36只雄性小鼠随机分为空白对照组、2h照射组和3h照射组,每组12只,照射组用UVB( 285nm)连续照射30d.照射后称其体重并将小鼠处死,取出睾丸、附睾并称重,求睾体比,检测附睾中精子活率及精子畸形率,观察睾丸组织病理学变化,测定睾丸组织超氧化物歧化酶( superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量. [结果]照射组小鼠的体重和睾体比明显低于对照组(P＜0.01)；精子活率也下降,差异有统计学意义(P＜0.05)；精子的畸形率上升但差异无统计学意义(P＞0.05).睾丸病理学变化:睾丸间质水肿与曲细精管分离；生精上皮排列疏松、脱落至管腔；管腔变窄；管腔中的精子数减少,并且3h照射组造成的辐射损伤更大.睾丸组织SOD活性和MDA含量变化:紫外辐射能够明显降低SOD活性、增加MDA含量(P＜0.01),并且呈现剂量效应. [结论]UVB辐射可引起雄性小鼠体重和睾体比降低、精子活率下降、睾丸组织病变、SOD活性降低、MDA含量增加,但对小鼠的精子畸形率影响不明显,损伤主要是由于紫外线辐射产生的活性氧簇( ROS)间接引起.

对二氯苯染毒雄性小鼠体细胞与生殖细胞染色体畸变分析

[目的] 研究对二氯苯的遗传毒性作用.[方法] 40只雄性昆明种小鼠随机分成5组,每组8只.实验组小鼠连续5 d分别以1 800、900、450 mg/kg剂量对二氯苯经口灌胃,阴性对照组小鼠以等量花生油灌胃,阳性对照组小鼠以40 mg/kg剂量环磷酰胺腹腔注射.末次染毒24 h后处死动物,分析骨髓细胞以及精原细胞与初级精母细胞染色体畸变率.[结果] 对二氯苯各剂量染毒组雄性小鼠骨髓细胞以及精原细胞和初级精母细胞染色体畸变率与阴性对照组比较均无统计学显著性增高(P＞0.05),各剂量染毒组初级精母细胞常染色体早熟分离发生率与阴性对照组比较也均无统计学显著性差异(P＞0.05),但高剂量染毒组初级精母细胞性染色体早熟分离发生率非常显著高于阴性对照组(P＜0.01).[结论] 在本实验剂量下未观察到对二氯苯对骨髓细胞染色体结构畸变的诱发作用,但一定剂量对二氯苯可能对初级精母细胞性染色体早熟分离有一定的影响.

丙烯腈对雄性ICR小鼠生殖细胞毒性

[目的]探讨丙烯腈对雄性小鼠生殖细胞的毒性作用.[方法]雄性ICR小鼠以0、2.5、5、10mg/kg体重剂量连续腹腔注射染毒5d,2周后处死动物,观察睾丸中早期精细胞微核;ICR雄性小鼠以0、6、12、24mg/kg体重连续灌胃染毒5d后于每周末处死部分动物,连续5周,分析附睾精子畸形率.[结果]早期精细胞微核实验结果表明,染毒剂量≥5.0mg/kg,早期精细胞微核明显增加,微核率与染毒剂量之间存在剂量反应关系(y=0.270x-0.816,r=0.988).精子畸形实验结果表明,第2周起24mg/kg组附睾精子畸形率增加即有显著意义(P＜0.05),12、24mg/kg体重剂量组染毒后第5周末附睾精子畸形率极明显升高(P＜0.01).精子畸形种类主要以头部畸形为主,主要包括无钩、不定型、香蕉型.[结论]丙烯腈能够引起早期精细胞遗传损伤,精子畸形数增加,从而影响雄性小鼠的生殖功能.

壬基酚对雄性小鼠生精能力及睾酮的影响

[目的]研究壬基酚对雄性小鼠生精能力及血清性激素睾酮的影响. [方法]雄性昆明种小鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为壬基酚25、50、1 00 mg/kg剂量染毒组和溶剂对照组(玉米油).各组隔日灌胃给予相应剂量的壬基酚溶液,连续35d后处死小鼠取血,用酶联免疫法测定小鼠血清睾酮的水平.取左侧睾丸做组织病理切片,取双侧附睾制备精子悬液,并在光学显微镜下进行精子计数,计算活精子率和精子畸形率. [结果] 35d后,与对照组相比,100mg/kg剂量染毒组小鼠睾丸组织病理学切片显示曲细精管萎缩,体重减轻幅度升高,睾丸重量下降,精子数量、精子活动度均降低,精子畸形率增高(均P＜ 0.05).染毒组小鼠血清睾酮含量、精子数量与壬基酚浓度存在明显剂量-反应关系(r=-0.98,r=-0.96;P＜0.05). [结论]壬基酚对雄性小鼠生殖系统有一定损害作用,高剂量的壬基酚能损伤小鼠的生精功能.

碲化镉量子点对雄性小鼠精子质量和睾丸组织的毒性效应

[目的]探讨碲化镉量子点(CdTe quantum dots,CdTe QDs)对雄性小鼠精子质量和睾丸组织的影响.[方法]将32只雄性ICR小鼠随机分为4组,分别为对照组(pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液)和低剂量(0.3 μmol/kg)、中剂量(0.9 μmol/kg)和高剂量(2.7 μmol/kg)(以体重计,余同)CdTe QDs染毒组,每组8只.采用腹腔注射法隔日染毒1次,染毒3周.检测小鼠体重、生殖器官脏器系数、精子数量和精子畸形率、睾丸组织病理学及睾丸组织中乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性变化情况.[结果]染毒后,各组小鼠体重差异均无统计学意义(P＞0.05).高剂量组小鼠睾丸脏器系数低于对照组(P＜0.05).各组小鼠睾丸重量、附睾重量及脏器系数差异均无统计学意义(P＞0.05).各剂量组小鼠精子数量与对照组[(3.35±0.76)×107/g]比较均减少(P＜0.05),高剂量组精子数量[(1.08±0.34)×107/g]比中剂量组[(1.73±0.61)×107/g]、低剂量组[(2.37±0.91)×1O7/g]减少(P＜0.05).中剂量组[(13.09±3.09)％]、高剂量组[(18.29±2.25)％]小鼠精子畸形率与对照组[(4.16±0.53)％]、低剂量组[(5.07±0.83)％]比较均升高(P＜0.008);高剂量组与中剂量组比较,其精子畸形率升高(P＜ 0.008).睾丸组织病理学观察结果显示,各剂量组染毒小鼠睾丸组织出现不同程度损伤.与对照组比较,各剂量组小鼠睾丸LDH和SOD活性无明显变化(P＞0.05),SDH活性下降(P＜0.05).[结论] CdTe QDs会导致雄性小鼠精子数量减少,精子畸形率升高,睾丸组织受损以及睾丸SDH活性下降.

莫达非尼对小鼠自主活动的影响

目的:研究莫达非尼对小鼠自主活动的影响,以评价莫达非尼对小鼠神经系统的作用.方法:应用计算机视频分析系统观察莫达非尼对雄性小鼠单位时间内活动的总活动度、平均速度和线性度的影响.结果:对照组在相同时间点相比,120mg/kg的莫达非尼可以显著升高小鼠单位时间内活动的总活动度、平均速度以及线性度.60mg/kg异丙嗪可以部分拮抗莫达非尼对小鼠自主活动的影响.结论:莫达非尼可以兴奋小鼠中枢神经系统,机制可能与胆碱能系统或5-HT系统有关.

弓形虫感染对雄性小鼠睾丸细胞周期影响的实验研究

目的研究弓形虫感染对雄性小鼠睾丸组织细胞周期的影响.方法应用流式细胞术检测弓形虫感染103/ml、104/ml、106/ml 3个剂量组小鼠睾丸组织细胞周期,并设立生理盐水和环磷酰胺对照组.结果不同剂量的弓形虫感染均可使小鼠睾丸组织细胞各时相的细胞百分数发生变化,并随着剂量的增加,G0/G1、S时相的细胞百分数明显减少,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05).G2/M时相的细胞百分数逐渐增多,各剂量组与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05).结论弓形虫感染可能抑制小鼠睾丸细胞的DNA合成,可引起G2期细胞阻滞,从而使细胞的有丝分裂延伸.

纳米二氧化钛对雄性小鼠生殖系统的影响

目的:研究纳米二氧化钛(TiO2)对雄性小鼠的在体作用,主要观察其对雄性小鼠生殖系统的影响. 方法:45只6周龄的雄性ICR小鼠随机均分3组,实验组隔日腹腔注射纳米TiO2(200 mg/kg或500 mg/kg),对照组注射等体积生理盐水,共给药5次,停药l周后,测量心脏、肝、肾、脾、睾丸和附睾的脏器系数,血清生化指标、睾酮和雌二醇水平;显微镜卜观察附睾精子数量、活率、畸形率和睾丸内精子计数;主要脏器作病理切片和HE染色,TUNEL法检测睾丸生殖细胞凋亡. 结果:与对照组相比,给药200 mg/kg纳米TiO2组上述指标均无明显改变(P>0.05);给药500 mg/kg组小鼠的心、肝和肾质量系数显著降低(P<0.05);丙氨酸氨基转移酶(ALT)、丙氨酸氨基转移酶/天门冬氨酸氨基转移酶(ALT/AST)、尿素氮(BUN)均显著升高(P均<0.05);附睾精子数,精子活率以及睾丸内精子计数均显著降低,精子畸形率增高,睾丸生殖细胞凋亡明显增多(P均<0.05).肝、肾、脾、睾丸和附睾的病理切片观察未见明显改变. 结论:小剂量的纳米TiO2对雄性小鼠无明显影响,较大剂量的纳米TiO2对雄性小鼠肝、肾功能有轻度影响,对小鼠精子生成和精子功能有明显影响,并诱导睾丸生殖细胞凋亡.

清利生精丸对大肠埃希菌感染小鼠生殖细胞凋亡及Fas/FasL表达的影响

目的:探讨清利生精丸是否具有抗生殖细胞凋亡及影响Fas/FasL的表达作用,从分子水平进一步阐明清利生精丸治疗大肠埃希菌感染所致男性不育的机制. 方法:将50只雄性昆明小鼠,经膀胱注射大肠埃希菌建立动物感染模型,观察15 d后随机分为5组(10只/组):模型组(不治疗)、大剂量(22.5 g/ml)、中剂量(13.5 g/ml)、小剂量(4.50g/ml)3个清利生精丸治疗组、呋喃坦啶西药治疗组,编码依次为MN、MTa、MTb、MTc、MTd组;另取10只同样小鼠膀胱注射生理盐水作为正常对照组(编码为CT).各治疗组连续灌胃药液10 d后,应用流式细胞术检测小鼠睾丸生殖细胞凋亡率,免疫组化测定生殖细胞Fas/FasL蛋白表达水平和同时观察睾丸组织的病理变化.结果:MN组生殖细胞凋亡率(57.44%)与CT组(28.54%)、MTa组(30.11%)、MTb组(28.59%)相比,差异有显著性(P<0.01);MN组生殖细胞凋亡率与MTc组(46.54%)和MTd组(43.41%)比较,有所增加,但无显著性差异(P>0.05).MN组小鼠睾丸生殖细胞Fas/FasL蛋白的表达水平明显高于CT、清利生精丸各治疗组和MTd组,差异有显著性(P<0.01);MN组小鼠睾丸组织出现明显的病理改变,其他各组未见明显异常. 结论:实验雄性小鼠感染大肠埃希菌后,可导致小鼠睾丸生殖细胞凋亡增加,Fas/FasL蛋白的表达水平上升;清利生精丸通过降低Fas/FasL蛋白的表达,降低生殖细胞的凋亡率,提高生殖能力,可作为治疗大肠埃希菌感染性不育的有效药物之一.

精子相关抗原6与速激肽1相互作用关系的探讨

目的:构建速激肽1(Tac1)基因真核表达载体并探讨其与精子相关抗原6(SPAG6)之间的相互作用. 方法:提取10只昆明雄性小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、睾丸8个组织的RNA,逆转录成cDNA后,用RT-PCR法观察Tac1在各组织中的表达.构建Tac1/pGADT7、Tac1/pEGFP-N2重组质粒,将Tac1/pEGFP-N2转染至CHO和COS-1细胞,采用免疫荧光染色及Western印迹检测TAC1在细胞中的定位和蛋白表达.将Tac1/pGADT7与Spag6/pGBKT7进行酵母双杂交实验,提取酵母蛋白用Western印迹检测TAC1与SPAG6之间是否存在相互作用. 结果:Tac1主要在睾丸、脑、心脏中表达.酶切和测序鉴定表明Tac1重组质粒构建成功,酶切鉴定片段390 bp.TAC1单独转染时,定位于CHO细胞的整个胞体,与SPAG6质粒共转染后,TAC1被募集至细胞微管中表达,用Western印迹检测到相对分子质量约为40 000的融合蛋白表达.与SPAG6的酵母双杂交实验显示TACl/SPAG6在缺少3种氨基酸(Leu、Trp、His)的培养板上有菌落生成,经Western印迹证实酵母融合蛋白中含有TAC1和SPAG6. 结论:成功构建Tac1重组质粒,并利用该质粒证实了TAC1与SPAG6之间存在相互作用关系.