mTOR特异性siRNA重组表达载体的构建及鉴定
摘要： 目的：构建mTOR siRNA 重组表达载体，为探讨RNA干扰技术抑制巨噬细胞 mTOR 基因的相关研究奠定基础。方法设计具有短发夹结构的DNA序列,经退火成互补双链,再克隆至载体pGPU6/GFP/Neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,提取质粒行酶切鉴定后,并进行序列测定。再转染入巨噬细胞RAW264.7,进行荧光摄像和阳性克隆筛选。Western blot方法检测巨噬细胞mTOR蛋白表达。结果 DNA 测序结果及 PCR 鉴定证实成功构建小鼠 mTOR siRNA 重组表达载体。Western blot结果显示转染该重组载体的巨噬细胞mTOR蛋白表达下降约41%。结论 mTOR靶向RNA干扰重组表达载体构建成功,可以进行稳定筛选，该载体对巨噬细胞mTOR蛋白表达有抑制作用。
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利用按键精灵和VFP软件实现宫颈细胞学和病理学结果全自动配对
宫颈细胞学和病理学结果的比对是细胞学质控的重要措施之一，传统的手工方法费时费力，并且有时间滞后性。现介绍一种利用按键精灵和VFP软件实现全自动比对的方法，省时省力，并可每天自动进行，大大提高了比对效率和时效性。
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1671女性泌尿生殖道例支原体培养与药敏结果分析
支原体是一种介于细菌和病毒之间，能通过滤菌器，能在无生命培养基中生长繁殖的小原核细胞型微生物。可导致非淋菌性尿道炎、宫颈炎、盆腔炎、自然流产，并与不育不孕有关[1]。临床上能引起性病的支原体主要包括解脲脲原体和人型支原体[2]。为了了解本地区女性支原体感染和常用抗生素的耐药情况，以指导临床合理用药。笔者对2009年至2014年妇产科送检的1671例女性沁尿生殖道支原体培养及药敏结果进行了分析，现将结果报告如下。
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病理石蜡标本基因检测中DNA提取（离心柱型）的几点体会
随着分子生物技术在临床中开展，其所覆盖的检测疾病的范围越来越广，不仅在常规医学检验中，近年来随着临床靶向治疗的普及，病理肿瘤标本的相关基因检测也得到发展。然而，什么样的病理标本适合做基因检测？怎么才能够得到更多更好的DNA呢？是目前我们病理科开展此项目所面对的问题。经过我们不断实践，现将几点体会介绍如下。
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不孕症妇女生殖道支原体感染药敏分析
近年来，不孕不育症患病率呈上升趋势，严重影响已婚夫妇的正常生活，除环境、食品等因素外，微生物引起生殖道感染是不育的重要因素，近年来研究表明女性支原体感染率不断上升并可以从多方面损害人体生育能力，是导致女性不孕重要原因之一[1]。因此，由支原体感染造成的不孕不育越来越受到关注。为了解支原体与不孕不育症的关系，2011年6月至2013年5月，我们对来我院就诊不孕人群进行了支原体鉴定及药敏分析，现报告如下。
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宫颈液基细胞学离心涂片制片法及体会
液基细胞学检查技术已逐渐发展为一种宫颈疾病的普查与筛查手段，越来越受到国人的重视，液基细胞学检查基于制片原理的不同分为膜式法、离心法、自然沉降法、捕获法、离心＋手工操作法等[1]。无论那一种方法其终的目的是制作出可诊断的细胞数量多、无重叠的薄层细胞学涂片，我院从2012年开始采用离心涂片法，收集制作妇科住院及门诊液基细胞学标本2652例，现将制片方法和一些体会介绍如下。
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真空管采血顺序对电解质钾、钠测定结果的影响
随着检验项目的丰富，目前我院多数患者都采用软管双向针一针多真空管的采血方式。在含钾盐(EDTA-K2)、钠盐(枸橼酸钠)抗凝剂的真空管中，其钾钠离子浓度均高于人体正常值。本文旨在探讨在一针多真空管采血时，此种含抗凝剂真空管是否会对普通生化真空管造成交叉污染，进而引起电解质分析结果误差。以钾钠离子浓度测定为例，报告如下。
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564株革兰阴性杆菌感染的分布及耐药性回顾
革兰阴性杆菌是医院感染重要的条件致病菌，随着有创通气、有创损伤开展，广谱抗生素的广泛使用，感染日益增多，为了解革兰阴性杆菌感染现状，为临床抗感染提供依据，笔者对我院2013年1月至2013年12月医院感染分离的革兰阴性杆菌进行统计分析，现报告如下。
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溶血样本对血吸虫间接血凝试验检测结果的影响
血吸虫间接红细胞凝集试验(IHA)是检测血吸虫病人血清抗体常用的方法，广泛用于疫区血吸虫病人的筛查[1-3]。该方法在试验环节中影响因素较多[4，5]。溶血为血清学试验疑似干扰物质，在日常检验样本中常见，但目前市售血吸虫间接血凝试验产品说明书并无相关说明，为探讨溶血样本是否对检测结果产生影响，保证检测结果的可靠性，本文采用血吸虫间接血凝试剂对模拟溶血的血吸虫病人血清进行了检测，现将结果报告如下。
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高脂血标本对血红蛋白的干扰及校正方法
血红蛋白是血细胞分析中的一项重要检测指标。随着血细胞分析仪的应用，使Hb测定逐步以仪器法取代手工比色法。其优点是操作简单、快速，同时获得多项红细胞参数。但在日常工作中，我们发现血液细胞分析仪在某些项目的检测上有它的局限性，很多干扰因素引起的部分结果不准确并没有被广大检验工作者所认识。如高脂血、高胆红素、溶血均可使血浆产生浊度，干扰Hb比色测定[1]，引起分析误差。本文就高脂血症患者检测血红蛋白引起假性升高以及寻求校正高脂血干扰血红蛋白的测定方法进行了探讨，为临床诊断、治疗提供相对准确的实验室数据。
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光学法检测大血小板的临床应用价值分析
低值血小板计数一直是检验和临床的一个难点，目前血小板计数多使用各类血液分析仪完成，其计数原理多为经典的电阻抗法。近年来，虽然血细胞自动分析仪不断的更新换代，但是大多是限于在白细胞分类的技术上的改进，对于红细胞和血小板的计数大多停留在传统的阻抗法上面，并且是在同一通道进行检测。 SysmexXT-4000i血细胞分析仪采用了阻抗法和光学法对血小板进行联合检测，光学法的应用在血小板数量减少和形态异常的计数上具有更重要的临床意义。
