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以细胞筛为载体的玻璃化冷冻和慢速程序化冷冻保存人卵巢组织的效果比较
目的 比较以细胞筛为载体的玻璃化冷冻与慢速程序化冷冻用于人卵巢组织冷冻的效果. 方法 人卵巢组织取皮质切块后,随机分为3组:新鲜组织对照组(F组)、慢速程序化冷冻组(S组)及以细胞筛为载体玻璃化冷冻组(V组).卵巢组织冷冻复苏后,固定切片后行苏木素-伊红染色,观察卵泡形态;使用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术,观察卵泡凋亡情况;部分卵巢组织体外培养,隔日采集培养液后检测雌二醇(E2)浓度.比较三组卵泡正常形态率、卵泡凋亡率及E2浓度. 结果 与F组原始卵泡正常形态率(91.1%)相比,V组原始卵泡正常形态率(88.1%)无显著差异(P>0.05),而S组原始卵泡正常形态率(79.6%)显著下降(P<0.001);V组初级卵泡正常形态率(74.2%)与S组(73.6%)相似,但两组均低于F组(89.0%)(P<0.05);凋亡检测中,3组凋亡率无显著差异(P>0.05);体外培养2周,各组E2浓度持续上升,F组B浓度显著高于S组、V组(P<0.001),而S组与V组E2浓度无显著差异(P>0.05). 结论 以细胞筛为载体的玻璃化冷冻能较好地保存人卵巢组织,复苏后组织体外培养后,还可持续分泌E2.
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实验教学中细胞原代培养技术改进与实践研究
细胞原代培养是细胞生物学实验课的一项重要内容.如何简化、改进实验操作方法,减小难度,使学生在较短时间内较熟练掌握并取得良好的实验结果成为当务之急.应用细胞筛结合胰酶消化直接纯化成纤维细胞,使操作更为简便、培养效果更为良好.