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着床丝氨酸蛋白酶-1/2在胚胎着床过程中的作用
着床丝氨酸蛋白酶-1(ISP1)和着床丝氨酸蛋白酶-2(ISP2)是于2001年首次报道的S1丝氨酸蛋白酶家族的新成员,迄今仅在小鼠卵细胞、受精卵和早胚、以及子宫组织中发现这两种蛋白酶的表达,具有较高的细胞和组织特异性.在体和离体实验证实,ISP1和ISP2在小鼠胚胎着床过程中发挥关键作用,是潜在的抗着床药物靶分子.现就10年来对ISP1和ISP2的研究进展作一综述.
关键词: 胚胎着床 着床丝氨酸蛋白酶-1 着床丝氨酸蛋白酶-2 -
重组着床丝氨酸蛋白酶-2(ISP2)在昆虫细胞中的表达
目的:利用昆虫细胞表达着床丝氨酸蛋白酶-2(implantation serine proteinase-2,ISP2).方法:将ISP2 cDNA克隆入核型多角体病毒(AcNPV)非融合蛋白基因表达载体pVL1392,获得的重组表达载体pVL1392/ISP2,与BaculGoldTM线性杆状病毒DNA共转染昆虫细胞Sf9,经多次扩增后获得高滴度的重组病毒AcNPV-ISP2.将此重组病毒感染昆虫细胞,收集转染细胞培养上清液.结果:用SDS-PAGE考马斯亮蓝染色和Western blot测得培养上清液中有表达蛋白,分子量为40kD左右.结论:用杆状病毒系统表达的ISP2能分泌到细胞外,有利于产物的分离纯化,为进一步研究ISP2在着床中的生物功能奠定了基础.
关键词: 着床 着床丝氨酸蛋白酶-2 表达 昆虫-杆状病毒系统