首页 > 文献资料
-
mGM-CSF-mMIP-3α重组质粒的构建、表达及鉴定
目的:构建pCDNA3.1mGM-CSF-mMIP-3α重组质粒,为mGM-CSF-mMIP-3α基因治疗肿瘤的研究奠定基础.方法:利用本实验室保存的pCDNA3.1mGM-CSF和pCDNA3.1mMIP-3α质粒,采用分子生物学技术构建了pCDNA3.1mGM-CSF-mMIP-3α重组质粒.用PCR、酶切进行鉴定,然后用脂质体转染B16细胞,用G418筛选后通过ELISA和Western blot检测该融合蛋白.结果:重组质粒中含有mGM-CSF-mMIP-3α基因,转染B16细胞后,其表达产物能分泌到肿瘤细胞外,分泌到细胞外的产物用ELISA和Westernblot检测证明能与特异性mGM-CSF和mMIP-3α抗体结合.结论:成功构建含mGM-CSF-mMIP-3α真核表达重组质粒,有助于进一步研究其抗肿瘤作用.
关键词： 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 重组 巨噬细胞炎性蛋白3α 重组质粒 基因疗法 -
CD1a、巨噬细胞炎性蛋白3α及上皮细胞钙黏素mRNA在尖锐湿疣组织中的表达
目的:研究尖锐湿疣(CA)组织中朗格汉斯细胞(Langerhans'cell,LC)表面标志分子CDla、趋化因子巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α)及黏附分子上皮细胞钙黏素(E-cadherin)mRNA 表达,探讨CA局部LC改变的分子机制.方法:采用反转录(RT)-PCR法检测26例CA组织中CD1a、MIP-3α、E-cadherin的表达情况,并以10名正常人包皮组织作为对照.结果:①与正常对照组(0.7444±0.3667)相比,CA组织中CD1a mRNA表达(0.4066±0.267 1)显著降低(P<0.01),MIP-3α mRNA表达(0.318 1±0.163 2)低于正常对照组(0.616 3±0.1939)(P<0.01),E-cadherin mRNA表达(0.173 7+0.108 3)较正常对照组(0.378 6±0.146 0)显著降低(P<0.01).②CD1a和MIP-3α分子mRNA的表达呈正相关(r=0.953 3,P<0.01),CD1a和E-cadherin分子mRNA的表达也呈正相关(r=0.838 1,P<0.05).结论:CA组织中存在LC缺失和抗原提呈功能下降,LC的减少可能与表皮MIP-3α表达下降,进而导致LC前体细胞难以到达表皮有关,还可能与E-cadherin表达下降导致LC在表皮内难以滞留有关.
关键词： 尖锐湿疣 朗格汉斯细胞 CD1a 巨噬细胞炎性蛋白3α 上皮细胞钙黏素
