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颌下腺细胞在不同生物材料上生长的比较研究
目的 研究体外培养条件下,颌下腺细胞在几种生物材料表面的生长及形态,为组织工程化人工涎腺构建提供依据.方法 分别将SD大鼠的颌下腺细胞接种在10mm×10mm的PGA (polyglicolic acid)、PLLA (Poly-(L)-lactic acid)及脱细胞处理后的SD大鼠气管材料表面进行体外培养,对细胞在不同材料上生长情况、形态进行观察.结果 体外培养条件下,生长在SD大鼠气管表面的细胞密度大于PGA及PLLA.扫描电镜下脱细胞气管上的颌下腺细胞见分泌颗粒.结论 SD大鼠脱细胞气管可用作组织工程化人工涎腺构建研究的生物材料.
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构建人工涎腺样组织的脱细胞气管基质支架
背景: 目前还没有找到理想的构建组织工程化人工涎腺的支架材料,具有良好中空样结构的脱细胞气管基质材料有着良好的可应用的发展前景.目的: 将下颌下腺细胞与家兔及SD大鼠的脱细胞气管基质共培养,评价其生物相容性.设计、时间及地点: 随机对照动物实验,于2003-02/2005-05在四川大学华西医院的卫生部移植与免疫重点实验室完成.材料: 用改良去污和酶交联法,去除SD大鼠和家兔气管的细胞,制备脱细胞气管基质.方法: SD大鼠18只随机分为2组,一组颊部皮F植入SD大鼠的脱细胞气管,另一组植入家兔的脱细胞气管.将传至第3代的下颌下腺细胞接种到2种脱细胞气管和PGA膜上培养,对照组进行无材料12孔板单纯细胞接种,进行细胞/支架材料复合体培养.主要观察指标: 光镜、扫描电镜观察脱细胞气管基质的组织结构和内壁的拓扑结构.于1,4,12周,对埋置在颊部皮下脱细胞气管周围的组织进行炎症反应评估.在培养的1~7d,每天对各组细胞进行计数,并分别于培养第1,3,5,7天.以MTT法测定各组细胞的A值及其上清液中的淀粉酶活性.结果: 两种动物气管中的细胞被完全去除.在颊部皮下埋置的两种脱细胞气管周围的组织未见明显炎症反应.生长在2种脱细胞气管上的下颌下腺细胞数明显多于PGA膜(P<0.05),其上清液中淀粉酶活性及细胞的A值也高于PGA膜(P<0.05).结论: 自制的脱细胞气管基质保持了中空状,并有良好的组织相容性和细胞相容性.
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脱细胞气管基质制备及组织相容性初步研究
目的:制作脱细胞气管基质,为组织工程化人工涎腺样组织的体外构建研究提供天然衍生生物导管支架材料.方法:用改良的去污剂-酶联合多步法脱除家兔、SD大鼠气管组织中的细胞,并将处理后的气管行HE染色,观察脱细胞及组织结构情况;扫描电镜下观察气管壁表面结构.然后将脱细胞气管植入SD大鼠面颊部,并于1、4、12周后取出进行组织学观察.结果:处理后的气管组织中细胞脱落完全,管腔内壁纤维组织完整、能保持气管原有的中空状管形.扫描电镜见气管内壁为规则的粗糙沟槽状结构.植入体内12周后与周围组织相容较好,未见明显管腔塌陷及炎性反应.结论:制备的气管材料,细胞脱落完全,是进行组织工程化人工涎腺样组织体外构建研究较理想的细胞外基质材料.
