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ZFP580基因文献资料
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C57BL/6小鼠ZFP580 C端编码基因的克隆及序列分析
[目的]克隆C57BL/6小鼠ZFP580 C端编码基因cDNA序列,并进行序列测定和分析.[方法]参照GENBANK公布的C57BL/6小鼠ZFP580 eDNA序列(注册号为 AK005257),根据ZFP580 C端编码基因cDNA序列设计1对引物,采用RT-PCR技术,从C57BL/6小鼠的肾脏组织中扩增ZFP580 C端编码基因cDNA序列,回收纯化后与T载体连接,构建重组子pMD18-T-ZFP580,转化大肠杆菌DH5α.阳性克隆以限制性酶切分析与PCR法鉴定后,测定序列并分析.[结果]自C57BL/6小鼠肾脏组织获得总RNA,扩增出255 bp的基因片段,成功构建阳性克隆重组子pMD-T-ZFP580,经双酶切和PCR鉴定与预期结果一致.所测定的C57BL/6小鼠ZFP580 C端基因cDNA序列与日本RIKEN基因组中心于GENBANK注册(注册号为AK005257)的完全一致,与人ZNF580 C端编码基因cDNA序列比较.核苷酸序列同源性为90%;该cDNA序列所编码的氨基酸序列与人ZNF580基因C端比较,同源性为100%,均编码有3个串联重复的C2H2型锌指蛋白主构域.其氨基酸序列与大鼠、犬、牛比较,同源性分别为100%、100%、98%.[结论] 成功克隆C57BL/6小鼠ZFP580 C端编码基因,该基因在不同种属间高度保守.
