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ICAM-2启动子文献资料
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使用人粘附分子-2启动子的衰变加速因子重组基因表达载体的构建及意义
目的:构建含人粘附分子-2(ICAM-2)启动子的人衰变因子(DAF)重组基因的真核细胞表达载体,运用于转基因动物克服异种器官排斥的研究.方法:双酶切本室已构建质粒pGEM-7Zf-DAF,得到含人ICAM-2启动子及DAFcDNA序列的插入片段(3 7Kb);双酶切pcDNA3真核表达载体,得到不含病毒启动子、含筛选基因Neo的一段DNA作为载体序列(4.4Kb);两段DNA进行连接反应后转化细菌;阳性转化菌落质粒抽提及酶切鉴定.根据人的ICAM-2启动子、DAFcDNA序列,设计引物行PCR特异扩增检验.结果:特异性3组酶切重组表达载体,产生符合设计的相应条带;PCR扩增出特异的318bp及1.7Kb的DNA片段,符合设计要求.结论:含人ICAM-2启动子的DAF重组基因表达载体获得成功.