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实时定量PCR检测急性白血病细胞系自然杀伤细胞配体的表达
目的 利用实时定量PCR方法检测急性白血病细胞系的NK配体表达,探讨不同来源白血病的NK配体差异表达规律.方法 通过实时定量PCR方法,以β-actin为内参基因,分别检测急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞系(CEM、Jurkat T、Reh)和急性髓系白血病(AML)细胞系(HL-60、KG-1a、NB4)表面23种NK配体(MICA、MICB、ULBP-1、ULBP-2、ULBP-3、ULBP-4、HLA-E、HLA-G、CD48、NBTA、HLA-F、LLT-1、PVR、Nectin2、CD72、CD80、ICAM-1、LFA-3、CRACC、Fas、DR4、DR5、TNFR1)的表达情况,利用独立样本t检验进行组间比较.结果 有4种NK配体的表达水平在ALL组和AML组间差异具有统计学意义.其中,ULBP-2 ALL组(CEM细胞:1,Jurkat T细胞:0.617,Reh细胞:0.246)高于AML组(HL-60细胞:0.000,KG-1a细胞:0.003,NB4细胞:0.000)(P=0.047),CD48、PVR(PVR-1、PVR-2)和DR4 AML组(HL-60细胞分别为13.987、4.403、10.334、8.711,KG-1a细胞分别为5.387、2.900、7.315、4.512,NB4细胞分别为7.763、3.248、7.049、6.127)高于ALL组(CEM细胞均为1,Jurkat T细胞分别为2.035、1.553、3.888、0.449,Reh细胞分别为1.559、0.000、0.000、1.304)(P=0.044、0.014、0.014、0.011),而其余配体表达水平组间差异无统计学意义.结论 ULBP-2、CD48、PVR和DR4可能是ALL和AML的差异表达基因,为应用基于NK细胞的过继免疫治疗打下基础.
