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川芎嗪与外源性β-神经生长因子对缺氧大鼠海马神经元活性影响的研究
目的:探讨川芎嗪和外源性β-神经生长因子(NGF)对缺氧大鼠海马神经元活性的影响.方法:选取24 h内出生SD乳鼠,进行体外原代培养大鼠海马神经元14 d后分为6组进行相应处理,每组设16个复孔.空白对照组为无细胞生长,每孔加磷酸盐缓冲液( PBS)100 μl;模型对照组每孔加无血清基础培养液100 μl;川芎嗪高、中、低剂量组每孔分别加盐酸川芎嗪注射液4、1和0.25 μl(终浓度分别为800、200和50 mg/L);β -NGF组每孔加含β-NGF终浓度为25 μg/L基础培养液至100 μl .继续培养后在终止培养前2.5 h模拟缺氧环境,以四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法检测各组缺氧2.5 h后海马神经元活性,测量波长595 nm处的吸光度(A)值.光镜下观察各组海马神经元形态.结果:与模型对照组相比,川芎嗪高剂量组A值显著降低(P＜0.05),川芎嗪中剂量组和β-NGF组显著升高(P均＜0.05),而川芎嗪低剂量组无明显变化(P＞0.05).川芎嗪中剂量组与β-NGF组相比差异无显著性(P＞0.05).光镜下观察 ,随缺氧时间的延长,川芎嗪中剂量组与β-NGF组海马神经元可见不同程度胞体肿大、晕光减弱,以轴突水肿断裂为主,而其他组海马神经元以胞核内容物浓缩甚至胞核破裂、胞质进行性浓缩改变为主.结论:外源性β-NGF与一定剂量范围的川芎嗪具有保持缺氧海马神经元活性的效果,而且川芎嗪的剂量与神经元活性之间存在一定的量-效关系.
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银杏内酯B对胆固醇和载脂蛋白E4损伤海马神经元活性和生长的影响
目的 探讨高胆固醇和载脂蛋白E4(apoE4)对海马神经元生长和活性的影响及银杏内酯B的保护作用.方法 采用无血清培养基体外培养初生大鼠海马神经元,采用神经元特异性烯醇化酶免疫荧光进行鉴定.用160 μg/ml的银杏内酯B处理海马神经元16 h,40 μg/ml 25-OH-胆固醇和30μg/ml apoE4继续处理24 h.MTT比色实验观察海马神经元生长活力的改变;Image-Proplus分析系统观察神经元长突起长度和胞体长短经的改变.结果 25-OH-胆固醇和apoE4降低海马神经元活性,抑制海马神经元突起的生长,与单纯apoE4和单纯胆固醇相比有显著性差异;银杏内酯B对神经元活性有提高趋势,但与模型组无显著差异(P＞0.05),银杏内酯B可以有效促进损伤神经元突起生长,与模型组相比有显著差异(P＜0.05).结论 高胆固醇在apoE4环境下损伤海马神经元,促进老年性痴呆的发生,银杏内酯B对损伤神经元在一定程度上有保护作用.
