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  • 高渗液对体外培养星形胶质细胞中水通道蛋白4 mRNA表达的影响

    作者:李燕华;孙善全

    目的研究体外培养星形胶质细胞高渗状态下水通道蛋白4(AQP4)mRNA表达的变化特点及其所起的作用.方法取生后2 d的新生Wistar大鼠大脑皮质进行星形胶质细胞纯培养,分别用不同渗透压的高渗培养液作用于星形胶质细胞,建立星形胶质细胞对高渗反应的实验模型;采用原位杂交、乳酸脱氢酶(LDH)活性测定及图像分析等方法,研究体外培养星形胶质细胞对高渗液的反应和AQP4 mRNA的表达规律.结果 320、333和345 mmol/L的高渗培养液作用于星形胶质细胞3、6、12和24 h后,LDH活性测定的吸光度A值在各时间点均显著高于对照组(P均<0.05);原位杂交分析表明,AQP4 mRNA表达明显增高,与正常组相比有显著意义,尤以高渗液作用12 h时明显,而且与作用时间及渗透压相关.结论在高渗状态下,细胞活性明显下降,AQP4 mRNA表达增强.AQP4可能在高渗性脱水的早期起重要的调节作用.

  • 星形胶质细胞AQP9在高渗液中的表达变化

    作者:李燕华;李吕力;王铁建;董艳玲

    目的 研究星形胶质细胞水通道蛋白-9(aquaporin-9,AQP9)在高渗培养液中的表达变化及AQP9在高渗性脱水中的作用.方法 取生后2 d的新生Wistar大鼠大脑皮层进行星形胶质细胞纯培养,分别予不同程度的高渗堵养液作用于细胞,建立星形胶质细胞对高渗液反应的实验模型.通过免疫细胞化学和PT-PCR方法研究星形胶质细胞对高渗液的反应及AQP9mRNA和蛋白的表达变化.结果 星形胶质细胞经渗透压为320、333 mmol/L的培养液作用3、6、12、24 h后,AQP9 mRNA和蛋白的表达均显著高于对照组(P<0.05),尤以作用6 h后较明显,而且AQP9 mRNA和蛋白的表达呈显著正相关(r>0.7971,P<0.01).结论 高渗引起AQP9基因表达上调,AQP9在高渗性脱水的早期可能起到重要的代偿作用.

  • 星形胶质细胞水通道蛋白-4在高渗液中的表达变化

    作者:李燕华;孙善全;王铁建;李吕力

    目的研究高渗培养液对体外培养星形胶质细胞表达水通道蛋白-4(Aquaporin-4,AQP4)的影响及AQP4在高渗性脱水中的作用.方法取生后2 d的Wistar大鼠的大脑皮层进行星形胶质细胞纯培养,分别予不同程度的高渗培养液作用于星形胶质细胞,建立星形胶质细胞对高渗液反应的实验模型.通过形态学观察、PT-PCR、免疫细胞化学、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及图像分析等方法,研究体外星形胶质细胞对高渗液的反应及AQP4 mRNA和蛋白的表达变化.结果高渗组各时相点吸光度A值均低于对照组(P<0.05),星形胶质细胞表现出特征性的细胞脱水形态学变化,AQP4mRNA和蛋白的表达均显著高于对照组(P<0.01),尤以作用12 h后明显,而且AQP4 mRNA和蛋白的表达呈显著正相关(rs>0.8485,Ps<0.01).结论在高渗状态下,AQP4 mRNA和蛋白的表达增强,AQP4表达上调在高渗性脱水的早期(<12 h)可能起到重要的代偿作用.

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