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猪睾丸细胞系文献资料
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冷应激条件下猪睾丸细胞中RNA结合基序蛋白3过表达对Caspase3表达的影响
目的:探讨冷应激(32℃)条件下,猪睾丸(ST)细胞系中RNA结合基序蛋白3(RBM3)过表达时凋亡蛋白半胱天冬酶3(Caspase 3)表达量变化情况.方法:利用本实验室成功构建的携带绿色荧光蛋白(GFP)的RBM3过表达慢病毒载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-RBM3和空病毒载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-DEST分别感染ST细胞,作为过表达病毒(OEV)组和空载体病毒-(EVV)组,此外还设立野生型细胞(WTC)组作对照,利用实时荧光定量RCR(qPCR)法和Western blot分析法检测各组中RBM3 mRNA和蛋白的表达情况.然后对各组细胞进行37℃以及32℃(2 h、4h,8h)的冷应激处理,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测各组Caspase 3表达量的变化.结果:OEV组RBM3基因和蛋白相对表达量高于EVV组和WTC组.在37℃以及32C冷应激实验(2h、4h,8h)中,OEV组Caspase 3表达量显著低于EVV组和WTC组.结论:冷应激ST细胞中RBM3过表达能够显著地降低Caspase 3的表达程度,为RBM3基因具有抵抗低温诱导ST细胞凋亡作用提供实验依据.
关键词： RNA结合基序蛋白3 冷应激 过表达 猪睾丸细胞系 半胱天冬酶3
