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苗药血人参不同提取部位体内外对乳腺癌4T1细胞的影响
目的 研究血人参提取物体内外对乳腺癌4T1细胞的影响.方法 采用MTT法检测血人参不同提取部位体外对4T1细胞的抗肿瘤活性,计算细胞增殖抑制率及半数抑制浓度(IC50);建立小鼠4T1实体瘤模型,随机分为模型组、血人参不同提取部位(石油醚部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位、乙醇提取物)组、顺铂组,给药15d后观察小鼠脏器指数、体质量,计算抑瘤率,进行肿瘤病理切片,观察病理改变.结果 血人参醋酸乙酯部位、正丁醇部位及乙醇提取物对4T1细胞的IC50值分别为228.9、323.4、322.6 μg/mL;血人参石油醚部位组、醋酸乙酯部位组、正丁醇部位组、水部位组、乙醇提取物组及顺铂组对4T1荷瘤小鼠的抑瘤率分别为(55.88±6.68)％、(66.67±14.32)％、(65.71±12.38)％、(53.81±16.17)％、(43.73±25.73)％、(76.85±11.38)％;血人参不同提取部位组中,石油醚部位组具有降低脾指数、升高胸腺指数及白细胞介素(IL-2)水平的作用;从肿瘤体积和抑瘤率结果来看是醋酸乙酯部位好.HE染色显示石油醚部位组肿瘤细胞明显比模型组少,细胞排列松散,病理性核分裂现象、肿瘤细胞浸润较模型组少,有少量淋巴细胞、巨噬细胞浸润.结论 血人参提取物在体内外对4T1细胞生长具有一定的抑制作用,其体内作用机制可能是增强机体的免疫力,从而达到抑制肿瘤生长的效果.
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NKG2D配体RAE1ε对乳腺癌细胞4T1衍生MDSC功能的影响
目的:探讨表达小鼠NKG2D配体之一视黄酸早期转录因子1s(retinoic acid early transcript 1s,RAE1ε)的原B淋巴细胞BaF3对乳腺癌细胞株4T1成瘤小鼠来源的髓系抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)功能的影响.方法:以小鼠原B淋巴细胞株BaF3为基础,构建表达RAE1ε的BaF3-RAE1ε细胞以及表达空质粒的BaF3-mock对照细胞.通过4T1原位肿瘤模型诱导产生CD 11 b+Gr-1+MDSC,将BaF3-mock细胞和BaF3-RAE1ε细胞作为刺激细胞,分别与脾MDSC共培养,流式细胞术检测MDSC表面CD40、CD80、F4/80、CD11c的表达和MDSC内活性氧(ROS)的水平;ELISA法检测共培养上清液IL-10、IL-4和IFN-γ的含量;Griess法检测共培养上清液一氮化氮(NO)的浓度.磁珠分选共培养体系中的MDSC,检测裂解后精氨酸酶的活性;另外,将分选后的MDSC与抗CD3/抗CD28抗体活化的脾细胞共培养,CFSE法检测活化的CD3+CD8+T细胞增殖情况.结果:成功获得4T1原位肿瘤模型来源的小鼠脾MDSC.与BaF3-mock细胞相比,BaF3-RAE1ε细胞刺激对MDSC分泌IL-4、IFN-γ、IL-10和NO的水平没有明显影响(P＞0.05);对MDSC表达CD40、CD80、F4/80、CD11c和ROS也没有显著影响(P＞0.05).与BaF3-mock细胞相比,BaF3-RAE1ε细胞刺激显著提高MDSC的精氨酸酶活性(156.166±1.209 vs 110.135±7.356,P＜0.01),并明显增强MDSC对CD8+T细胞增殖的抑制作用.结论:RAE-1ε在体外增强4T1成瘤小鼠来源的MDSC的抑制功能.
关键词： 视黄酸早期转录因子1ε 髓系抑制性细胞 精氨酸酶 乳腺癌4T1细胞 -
银杏多糖对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖及GLUT家族基因表达的影响
目的 探讨银杏多糖对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖、凋亡的影响及可能机制.方法 用不同浓度的银杏多糖处理对数生长期的小鼠乳腺癌4T1细胞,分别用MTT法和台盼蓝拒染法检测银杏多糖对4T1细胞增殖的抑制和细胞毒性作用;用DAPI核染色检测银杏多糖对4T1 细胞凋亡的影响;qRT-PCR检测银杏多糖对4T1细胞葡萄糖转运蛋白家族基因表达的影响.结果 银杏叶和银杏外种皮多糖呈剂量时间依赖性抑制4T1细胞增殖,并且随着银杏多糖剂量的增加,细胞活力明显下降、毒性明显增强,细胞凋亡增加. qRT-PCR结果显示,银杏多糖可以明显降低葡萄糖转运蛋白1的基因表达.结论 银杏多糖可抑制4T1细胞的增殖和诱导 细胞凋亡,并通过调节葡萄糖转运蛋白家族基因表达,干预癌细胞的能量代谢,提示银杏多糖对4T1细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用可能通过干预葡萄糖转运蛋白基因的表达实现的.
