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基于多元功效成分的干姜干燥方法研究
目的 比较不同干燥方法对干姜药材中6种活性成分的影响,探讨干燥过程中干姜成分的动态变化和水分动力学变化.方法 采用HPLC同时测定干姜中的多元功效成分,以6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、6-姜烯酚、α-姜黄烯、(E)-β-金合欢烯为指标,对不同干燥方法所得干姜进行综合评价;利用Weibull函数模拟干姜干燥过程中水分的动态变化结合成分动态变化,探讨干姜干燥过程的原理.结果 12种干燥方法对干姜中多元功效成分有一定影响,干燥过程各成分呈波动变化,Weibull函数模拟干姜干燥过程的r2均大于0.990.以控温鼓风60℃干燥所得干姜较优;含水量范围6％～15％为干姜加工的适宜水分;干姜干燥过程中6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚和6-姜烯酚与含水量呈显著的负相关关系.结论 Weibull分布函数能够较好的模拟干姜干燥过程的水分变化,对干姜干燥过程的预测、调控具有重要意义,同时为使用现代干燥技术干燥干姜药材提供了技术依据.
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BRAF在10-姜酚抗黑色素瘤中作用的分子模拟及实验研究
目的:采用分子模拟技术及细胞实验研究BRAF蛋白在10-姜酚(10-G)抗黑色素瘤中的作用.方法:将10-G(10、20和40μmol/L)刺激人皮肤黑色素瘤A375细胞24 h,采用MTS法和细胞计数检测细胞活力.采用分子对接及分子动力学模拟分析10-G与BRAF蛋白之间的相互关系.采用Western blot技术检测p-BRAF、总BRAF、p-MEK1/2、p-ERK1/2和p-P38的蛋白水平.结果:10-G可剂量依赖性地降低A375细胞活力和数量,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).10-G与野生型BRAF之间的结合能为-7.358 kcal/mol,与V600E突变型的BRAF之间的结合能为-8.255 kcal/mol.分子动力学模拟证实BRAFV600E与10-G之间的结合是稳定的.10-G能显著抑制A375细胞中p-BRAF、p-MEK1/2和p-P38的蛋白水平(P<0.01),对p-ERK1/2的蛋白水平没有影响.结论:10-G能够抑制黑色素瘤细胞的生长,其机制可能与抑制BRAF激活有关.
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10-姜酚通过Src/STAT3信号通路抑制肝癌HepG2细胞增殖
目的 研究10-姜酚通过Src/STAT3信号通路抑制肝癌HepG2细胞增殖.方法 使用SYBYL-X2.1软件对10-姜酚与Src之间的相互结合进行模拟.选择10-姜酚低、中、高浓度(1、3、10 μmol/L)处理肝癌细胞HepG2 24 h,同时设立正常对照组.MTT检测各组细胞活力;EdU染色检测各组细胞增殖并计算阳性细胞数;Western blot检测Src(p-Src)及STAT3(p-STAT3)的表达水平;qPCR技术检测STAT3靶基因CyclinD1和cmyc的表达.结果 10-姜酚可以与Src的氨基酸残基TRY-340、MET-341、MET-314、ASP404、ILE-336形成氢键连接.与对照组相比,MTT显示,10-姜酚(3、10μmol/L)显著降低HepG2的细胞活性(P＜0.001);EdU染色显示,10-姜酚(1、3、10 μmol/L)均能显著降低HepG2细胞EdU染色阳性细胞数(P＜0.001);Western blot显示,10-姜酚(3、10 μmol/L)显著降低HepG2的细胞Src及STAT3的磷酸化表达水平(P＜0.01);qPCR显示,10-姜酚(1、3、10 μmol/L)显著降低STAT3靶基因CyclinD1和cmyc的基因表达水平(P＜0.01).结论 10-姜酚能剂量依赖性的抑制肝癌HepG2细胞的增殖,抑制Src及其下游的STAT3的激活.
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RP-HPLC法测定干姜、炮姜和生姜中3种姜酚的含量
目的:建立测定干姜、炮姜和生姜3种药用姜中6-姜酚、8-姜酚和10-姜酚含量的方法.方法:采用反相高效液相色谱法.色谱柱为依利特Hypersil ODS 2(250mm×4.6mm,5m),流动相为乙腈-水(72:28),流速为1 mL·min-1,检测波长为280 nm,柱温为25℃,进样量为10 μL.结果:6-姜酚、8-姜酚和10-姜酚的进样浓度分别在1.156～231.200 μg·mL-1(r=0.999 9)、1.072～214.400μg·mL-1(r=0.999 8)、1.031～206.200 μg·mL-1(r=0.999 9)范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系;平均加样回收率分别为97.50%、98.06%、96.39%,RSD分别为1.18%、0.87%、1.37%(n均为6).结论:本方法快速、准确、简便、高效,可为药用姜的质量控制和评价提供依据.
