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染料木黄酮对ox-LDL诱导人静脉平滑肌细胞MCP-1表达的影响
目的:研究染料木黄酮(Gen)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉血管平滑肌细胞(hUVSMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA和蛋白表达的影响.方法:以hUVSMC为对象,采用逆转录聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验观察不同浓度Gen(1.0×10-5、3.0×10-5、9.0×10-5mol/L)对ox-LDL诱导的MCP-1 mRNA和蛋白表达的影响.结果:三种浓度的Gen均能明显降低ox-LDL诱导的hUVSMC MCP-1mRNA和蛋白的表达,且高剂量与生理浓度的17β-雌二醇有相近的作用.结论:染料木黄酮能下调ox-LDL诱导的hUVSMC MCP-1mRNA和蛋白的表达,这可能是染料木黄酮抗动脉粥样硬化的重要机制之一.
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反油酸对人脐静脉平滑肌细胞活力的影响
平滑肌细胞是血管壁中膜的主要细胞成分,是动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)和血管成形术后再狭窄(restenosis after angioplasty,RAA)等病理过程形成和发展的重要部位,对血管壁的完整性和紧张性的调节也起重要作用[1],其异常增殖及形态学转变将导致动脉粥样硬化过程中泡沫细胞形成,促进病情发展和恶化[2-3].反式脂肪酸(TFA)是在反式构型中至少有一个双键不饱和脂肪酸,常在氢化植物油中有较高含量[4],研究显示TFA的摄入量和心血管疾病的发生率有密切关系[5],特别是和动脉粥样硬化的发生呈正相关[6],本研究以体外培养人脐静脉平滑肌细胞株为实验材料,反油酸(transC18∶1)为诱导因素,通过MTT法及流式细胞术观察其对HUVSMC活力的影响,初步探讨TFA与动脉粥样硬化之间的关系.
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不同浓度葡萄糖环境下Fe~(2+)对人脐静脉平滑肌细胞增殖及基质金属蛋白酶-2分泌的促进作用
目的:探讨正常及高葡萄糖环境下,Fe~(2+)对人脐静脉平滑肌细胞(HUVSMC)增殖及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)分泌的作用.方法:以相同浓度接种普通培养液及高浓度葡萄糖培养液培养的3~5代HUVSMC为正常组及高糖组,分别以不同浓度Fe~(2+)处理.培养24 h后,四甲基氮唑盐(MMT)比色法测定细胞增殖水平,ELISA试剂盒检测细胞培养上清中MMP-2含量.结果:不同浓度葡萄糖环境下,0.012 5-0.1000 g/L浓度Fe~(2+)均能促进HUVSMC增殖,且高糖组作用较正常组强;正常组Fe~(2+)浓度在0.1 g/L时能促进HUVSMC分泌MMP-2,高糖组所有浓度Fe~(2+)均表现促分泌作用.结论:适当浓度的Fe~(2+)能影响HUVSMC的生物学特性,促进HUVSMC的增殖与MMP-2的分泌,且高糖环境下促进作用更为显著.
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金雀异黄素抑制ox-LDL诱导的人脐静脉平滑肌细胞MCP-1表达的信号途径初探
目的研究金雀异黄素抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1mRNA和蛋白表达的作用机制.方法采用逆转录聚合酶链反应技术和酶联免疫吸附试验测定细胞中单核细胞趋化蛋白-1mRNA的表达量及蛋白的含量.观察雌激素受体拮抗剂他莫昔芬对金雀异黄素抑制单核细胞趋化蛋白-1表达作用的影响.结果他莫昔芬不能阻断金雀异黄素抑制单核细胞趋化蛋白-1mRNA和蛋白表达的作用(P>0.05).结论金雀异黄素下调氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1的表达可能主要是通过非雌激素受体途径所介导.
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一种改进的人脐静脉平滑肌细胞培养方法
血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle,VSMC)在心血管疾病的发生中占有重要的地位.采用培养的VSMC进行相关机制研究是一种普遍应用的实验方法.由于人体组织取材限制,很难获取大量原代培养的人VSMC.本室以健康胎儿脐静脉血管为材料,建立起一套完整的人脐静脉平滑肌细胞(human umbilical vein smooth muscle cells,hUVSMC)培养方法,具有周期短,细胞长出率高,可大规模培养等特点.