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circRNA002144在PM2.5诱导人正常支气管上皮细胞炎性反应中的机制研究
目的 研究circRNA002144在PM2.5暴露人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的表达及其下游靶基因的差异表达情况,并探讨circRNA002144在PM2.5诱导BEAS-2B细胞发生炎性反应中可能的调控机制.方法 分别以0、30、60、90、120、150μ/ml的PM2.5暴露BEAS-2B细胞48 h,收集细胞上清液用酶联免疫(ELISA)实验检测白细胞介素-6(IL-6)的分泌量;收集细胞,以Trizol试剂裂解细胞后提取总RNA,以实时定量PCR(qRT-PCR)检测不同浓度PM2.5染毒BEAS-2B细胞中circRNA 002144表达水平的变化;然后利用RegRNA和TargetScan预测与circRNA002144相互作用的miRNAs以及靶向的下游mRNA,选择炎症相关的mRNA进一步检测.结果 与对照组相比,不同浓度的PM2.5染毒组BEAS-2B细胞炎性细胞因子IL-6的表达均升高,且有剂量依赖关系;circRNA 002144的表达水平均升高,且随着PM2.5染毒浓度的增加呈高表达,在120 μg/ml染毒组,相对表达量增高4.79倍,差异均有统计学意义(P＜0.01);结合生物信息学预测分析和qRT-PCR检测发现,相比于对照组,与circRNA 002144相互作用的hsa-miR-608和hsa-miR-92a-2-5p在PM2.5染毒组细胞呈现低表达的趋势,这两个miRNAs共同靶向的STAT3则呈现高表达,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 circRNA002144在PM2.5诱导BEAS-2B细胞发生炎性反应中可能发挥促炎的作用,可能通过下调hsa-miR-608和hsa-miR-92a-2-5p促进IL-6分泌,进而激活STAT3炎症通路.
